PPgBBM - Doutorado em Bioquímica e Biologia Molecular
URI Permanente para esta coleçãohttps://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/45718
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Tese Bioprospecção de compostos do fungo Langermannia bicolor: potencial modulador de antibióticos, atividade antioxidante e avaliação de toxicidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-12-04) Moura, Geovanna Maria de Medeiros; Santos, Elizeu Antunes dos; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0002-3480-2218; http://lattes.cnpq.br/0915146393491834; Veras, Bruno Oliveira de; Oliveira, Maria Tatiana Alves; Santos, Paula Ivani Medeiros dos; Paiva, Weslley de SouzaA seleção e aumento da variedade de bactérias multirresistentes tem impulsionado a busca por novos agentes terapêuticos e adjuvantes. Neste estudo investigamos as propriedades de um extrato do cogumelo Langermannia bicolor como modulador de antibióticos (gentamicina, norfloxacina e ampicilina) contra linhagens multirresistentes de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, bem como a sua ação antioxidante e sua toxicidade in vitro e in vivo. O extrato bruto aquoso de L. bicolor foi fracionado com volumes crescentes de acetona, resultando em três frações (F0.5, F1 e F2), que apresentaram diferentes perfis bioquímicos. Testes com eritrócitos humanos revelaram que o extrato e as frações não possuem ação hemolítica, enquanto os ensaios de redução de MTT em células fibroblásticas (NHI/3T3), apenas o extrato bruto reduziu a viabilidade em 50%. Em diferentes estágios de desenvolvimento de zebrafish (Danio rerio), os ensaios in vivo confirmaram a ausência de toxicidade das frações, através de análises em briotóxicas, batimentos cárdiacos e testes comportamentais. Embora nenhuma fração tenha demonstrado atividade antibacteriana direta, todas exibiram efeitos moduladores significativos quando combinadas com antibióticos convencionais nas bactérias multirresistentes testadas. Notavelmente, a fração F2, rica em proteínas, com maiores atividades proteolíticas e hemaglutinante, reduziu a Concentração Inibitória Mínima (CIM) da gentamicina em todas as linhagens testadas. As frações também foram potentes antioxidantes in vitro e in vivo. A fraçãoF0.5, rica em compostos fenólicos e flavonoides, exibiu o espectro mais amplo de atividades antioxidantes, incluindo quelação de metais (Fe+2 e Cu+2), sequestro de radicais livres (OH• e O2-•) e proteção celular, concomitante e preventiva, contra estresse oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio (H2O2) em células 3T3. Já a fração F1, com predominância decarboidratos, após o estresse de H2O2, foi capaz de corrigir o dano oxidativo. In vivo, todas as frações protegeram os embriões de zebrafish expostos a H2O2.Na quantificação das espécies reativas de oxigênio (EROs) pela sonda fluorescente (DCFH), as larvas de zebrafish tratadas com a F0.5 e, em seguida, com H2O2 reduziram significativamente a produção de EROs em suas células, com valores menores, até, do que os das larvas não expostas ao agente oxidante. De forma menos expressiva, F1 e F2 também protegeram as células do zebrafish, reduzindo a produção de EROs. Ao explorar de forma pioneira o potencial terapêutico de L. bicolor, nosso estudo pavimenta o caminho para investigações futuras, mais aprofundadas, sobre a composição de bioativos desse cogumelo e seus respectivos mecanismos moleculares, envolvidos nas propriedades encontradas: potencialização de antibióticos e proteção contra o estresse oxidativo.Tese Ações antibacteriana, moduladora de antibióticos e antiproteásicas de frações proteicas da semente de catingueira (Poincianella pyramidalis Tul.)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-08-30) Cruz, Joelton Igor Oliveira da; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0001-5751-7682; http://lattes.cnpq.br/2448189217304566; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Veras, Bruno Oliveira de; Oliveira, Maria Tatiana Alves; Santos, Paula Ivani Medeiros dosA resistência bacteriana, bem como os distúrbios inflamatórios, são problemas de saúde pública expressivos que levam milhares de pessoas aos hospitais todos os anos, sendo muitas vezes necessários vários dias de internação para o tratamento, gerando custos excessivos e, por vezes, sem resolução do problema. Considerando a importância da descoberta de novas substâncias que mitiguem esses problemas, este trabalho teve como objetivo avaliar o extrato bruto e frações proteicas da semente de Poincianella pyramidalis (Tul.) quanto às atividades antibacteriana, moduladora de antibióticos, e inibitória de proteases. Os extratos proteicos foram obtidos com tampão Tris-HCL 0,05M, pH 7,5, e posterior fracionamento nas faixas de saturação: 0-30% (F1), 30-60% (F2) e 60-90% (F3) de sulfato de amônio. O perfil eletroforético revelou diversas bandas proteicas entre 12 e 225 KDa. A fração enriquecida em inibidor (FE) foi obtida utilizando apenas uma cromatografia de afinidade em Tripsina-Sepharose após a extração. O teste da atividade antimicrobiana foi realizado através do ensaio de microdiluição e a ação moduladora dos antibióticos ampicilina, norfloxacino e gentamicina, utilizando uma concentração subinibitória CIM/8. Embora as amostras não tenham apresentado ação antimicrobiana direta sobre as linhagens ATCC Escherichia coli, Staphylococcus aureus e S. aureus resistente a meticilina (MRSA), observou-se que, em uma concentração de 128 µg/mL, as amostras associadas aos diferentes antibióticos (aminoglicosídeo, β-lactâmico e fluoroquinolona) tiveram uma ação sinérgica contra as cepas multirresistentes de E. coli, S. aureus e Pseudomonas aeruginosa. Enquanto as demais amostras inibiram a ação das serinoproteases testadas em porcentagens acima de 80%, FE reduziu 50% das atividades das enzimas tripsina, elastase neutrofílica humana (ENH) e quimotripsina, nas concentrações de 0,017, 0,023 e 0,156 µg/µL, respectivamente, e sua atividade antitripsina foi mantida em altas temperaturas (80 ºC) e ampla faixa de pH (2 a 12). Não foi observada atividade hemolítica em concentrações até 10x maiores que a IC50, viabilizando assim, o seu uso em possíveis preparações farmacológicas. Desta forma, conseguimos separar de forma relativamente simples, produtos derivados das sementes de P. pyramidalis com atividades relevantes no contexto clínico, considerando o seu potencial de aplicação no combate a infecções causadas por bactérias resistentes, bem como nos distúrbios de proteases inflamatórias, e com redução dos custos do tratamento.Tese Abordagem em bioquímica quântica aplicados à modulação de SIRT6 e PIM1: desvendando novas estratégias terapêuticas com flavonoides(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-01-24) Matias, Érika Geicianny de Carvalho; Fulco, Umberto Laino; Oliveira, Jonas Ivan Nobre; https://orcid.org/0000-0003-1646-921X; http://lattes.cnpq.br/2461374517882321; https://orcid.org/0000-0002-4528-9878; http://lattes.cnpq.br/9579151361576173; http://lattes.cnpq.br/1220783177888532; Silva Júnior, Edilson Dantas da; Filho, Antonio de Macedo; Bezerra, Katyanna Sales; Ribeiro Júnior, Luiz AntonioAs doenças metabólicas e os cânceres afetam milhões de pessoas em todo o mundo caracterizando um problema de saúde e bem estar da sociedade. Nesse cenário surgem duas proteínas SIRT6 e PIM1, essas macromoléculas tem se destacado como potenciais alvos terapêuticos frente a essas patologias, uma vez que suas funções regulatórias estão diretamente associadas à prevenção dessas doenças. SIRT6 é uma deacilase dependente de NAD+ e sua ativação tem potencial contra doenças metabólicas e relacionadas ao envelhecimento, em contrapartida a sua inibição é considerada uma promessa na terapia contra o câncer. A investigação da modulação dessa proteína por moléculas específicas destaca-se como uma área promissora. PIM1 é um proto-oncogene superexpresso em diversos tipos de câncer humano e sua inibição é considerada um alvo promissor para a terapia do câncer. Aqui, exploramos a modulação de SIRT6 com os flavonoides quercetina (QUE) e seu derivado isoquercetina (ISO), além da galato catequina (GC) e da susbstância tricostanina-A (TSA); bem como da proteína PIM1 com os flavonoides quercetina (QUE), miricetina (MIC) e pentahidroxiflavona (PTH), proporcionando uma visão detalhada das interações moleculares que levam à ativação e/ou inibição dessas proteínas. Para isso empregamos métodos computacionais na perspectiva da Modelagem Molecular por meio da técnica do Fracionamento Molecular com Caps Conjugados (MFCC) e em conformidade com os parâmetros de cálculos da Teoria do Funcional da Densidade (DFT). Essas avaliações se deram em um raio de até 10,0 Å de distância dos moduladores. A análise energética do complexo SIRT6- moduladores demonstrou que as substâncias ativadoras (GC) e (TSA) foram mais expressivas em comparação com as moléculas inibidoras (QUE) e (ISO). Em contrapartida, para o complexo PIM1-inibidores o flavonoide que apresentou interação mais expressiva foi a (PTH) seguido da (QUE) e da (MIC). Nossos resultados fornecem evidências relevantes para o desenvolvimento racional de novos fármacos direcionados para SIRT6 e PIM1 com potencial para impactar a regulação dessas proteínas e abrir perspectivas na pesquisa de novas abordagens terapêuticas para doenças metabólicas e câncer.Tese Estudo do efeito de proteínas e peptídeos naturais bioativos no tratamento de diabetes mellitus(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-12-27) Medeiros, Isaiane; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Rezende, Adriana Augusto de; Moreira, Ana Luisa Pires; Souza, Augusto Monteiro de; Melo, Eduardo Borges deO diabetes mellitus (DM) é um problema de saúde pública, caracterizado pela hiperglicemia. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de proteínas e peptídeos naturais bioativos no tratamento de DM. Dessa forma, esta tese está dividida em três capítulos. No primeiro foi realizado o protocolo da revisão sistemática (RS) conforme registrado no International Register of Prospective Systematic Review (PROSPERO, número: CRD42022355540), que norteou a construção da RS apresentada no segundo capítulo. No segundo capítulo, foi realizada a RS que teve o objetivo de responder à pergunta de partida: quais peptídeos ou proteínas vêm sendo estudados in sílico para o tratamento de diabetes mellitus? Os artigos foram selecionados de acordo com PECOs (População, Exposição e Contexto), nas bases de dados PubMed, ScienceDirect, Scopus, Web of Science, Virtual Health Library e EMBASE. Com base nos critérios de elegibilidade, foram incluídos cinco artigos e a avaliação do risco de viés foi realizada utilizando a ferramenta adaptada Strengthening the Reporting of Empirical Simulation Studies (STRESS). Os resultados mostraram que proteínas e/ou peptídeos extraídos de fontes naturais interagiram in sílico com alvos terapêuticos envolvidos no manejo do DM, como αamilase, dipeptidil peptidase IV (DPP-IV), α-glicosidase, receptor de insulina (RI), transportador de glicose tipo 2 (GLUT-2) e proteína transportadora de sódio-glicose (SGLT1), e quando reavaliados in vivo, promoveram a redução de glicemia de jejum, melhora da morfologia pancreática, regulação positiva da secreção e expressão de insulina, redução ou manutenção de insulina plasmática, diminuição em HOMA-IR, aumento de HOMA-β e manutenção de GLP-1. Com isso, foi demonstrado que os estudos in sílico ofereciam percepções cruciais sobre estratégias terapêuticas para o DM. No terceiro capítulo, foi realizado um estudo pré-clínico para avaliar o efeito do inibidor de tripsina isolado de semente de tamarindo (ITT) em peixes-zebra, com glicemia de jejum aumentada desencadeada por hiperalimentação com Artemia sp. Foram avaliados glicação de proteínas (in vitro e in vivo), parâmetros bioquímicos, expressão relativa do gene do RI, além de alterações morfológicas em órgãos e tecidos relevantes para o DM2. O diagnóstico de DM2 foi feito utilizando AccuChek®, para avaliação da glicemia capilar dos peixes em jejum, antes do início dos tratamentos. Os animais (N = 140), de ambos os sexos, foram dristribuídos em quatro grupos (n = 35): 1) animais saudáveis sem tratamento e normoalimentados; 2) animais com DM2 sem tratamento e hiperalimentados; 3) animais com DM2 tratados com de ITT (25 mg/L) e hiperalimentados; 4) animais com DM2 tratados com ITT (25 mg/L) e normoalimentados durante 10 dias. Foi verificada glicemia de jejum de 62,33 mg/dL (2,52) para animais normoalimentados e 104,70 mg/dL (4,16) para os animais hiperalimentados pré-tratamento (p = 0,008). Não foi verificada alteração significativa (p > 0,05) de glicação in vitro da albumina sérica bovina para as concentrações de ITT de 1,4 e 5 mg/mL; em contrapartida a concentração de 25 mg/mL de ITT aumentou a glicação significativamente (p < 0,01). Esse achado não se manteve, ao verificar a formação de produtos finais de glicação avançada (AGEs) in vivo (p > 0,05) entre os grupos analisados, utilizando 25 mg/L. Após o tratamento, verificou-se redução significativa (p < 0,01) de glicemia de jejum, HOMA-IR e índice QUICKI e aumento significativo (p < 0,01) de HOMA-β nos animais tratados com ITT e hiperalimentação em relação ao grupo de animais com DM2 sem tratamento, mas esses valores não tiveram diferença significativa (p > 0,05) para os animais saudáveis, com exceção para índice QUICKI. Enquanto foram observados aumentos significativos (p < 0,01) de insulina para todos os grupos em relação ao controle saudável. Além disso, o ITT promoveu a regulação negativa da expressão relativa do RI em tecido adiposo e muscular esquelético. Adicionalmente, nos achados histopatológicos, foi verificada menor adiposidade visceral, esteatose pancreática e hepática, e degeneração renal nos animais tratados com ITT e hiperalimentação. Contudo, ainda são necessários novos estudos para elucidar os mecanismos de redução da glicemia de jejum.Tese Ação antioxidante e efeito neuroprotetor de polissacarídeos sulfatados(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-12-04) Lucena, Alessandra Marinho Miranda; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0001-5109-1991; http://lattes.cnpq.br/9200036511632745; https://orcid.org/0000-0002-1698-5428; http://lattes.cnpq.br/5486564758103808; Scortecci, Katia Castanho; Guzen, Fausto Pierdona; Santos, Pablo de Castro; Ferreira, Éder GalinariAs doenças neurodegenerativas são produtos de mecanismos biológicos multifatoriais, que envolvem causas exógenas e endógenas. Em decorrência do aumento da expectativa de vida e do crescimento previsto de condições demenciais, há uma crescente preocupação na busca de prevenção e tratamento mais efetivos para a neurodegeneração. O estresse oxidativo tem se mostrado um fator importante no desenvolvimento e na progressão dessas doenças, devido a características intrínsecas ao tecido nervoso, como a baixa capacidade de regeneração e a alta demanda energética. As algas marinhas são fontes de diversas moléculas bioativas, com destaque para os polissacarídeos sulfatados (PS). Esses compostos são importantes para a sobrevivência das algas e possuem atividades biológicas significativas, como a antioxidante e a anti-inflamatória. Tais propriedades podem ser úteis no tratamento de doenças neurodegenerativa. Os PS das algas têm se mostrado uma promissora alternativa para a neuroproteção. Foram identificadas 9 espécies de algas cujos PS apresentam ação antioxidante em diferentes condições. E foram obtidas 44 frações ricas em polissacarídeos sulfatados (FRP). Essas FRP passaram por avaliação de sua citotoxicidade, em células Neuro-2A, em diferentes concentrações (0,1; 0,25; 0,5 e 1 mg/mL). A partir de cada FRP foram selecionadas duas concentrações, sendo uma mais alta e outra mais baixa, que obtiveram valores de redução de MTT igual ou superior a 80 %, para análise de proteção contra o dano oxidativo induzido pelo peróxido de hidrogênio. Para selecionar as FRP que seriam avaliadas quanto aos possíveis mecanismos de proteção empregados, foram levados em consideração os resultados dos parâmetros de rendimento, de efeito citotóxico e do potencial neuroprotetor em cultivo celular, para a construção de um Score. Os possíveis mecanismos envolvidos, foram analisados através da determinação do potencial de sequestro de peróxido de hidrogênio; e do efeito sobre a expressão de genes da via antioxidante (Keap1, Nfr2, Sod1, Cat, Gpx, Hmox1, Gclc, Gclm) e das subunidades do fator de transcrição NFκβ (Nfkb1 e Rela). Além disso foi avaliada a capacidade de proteção antioxidante em modelo in vivo (Zebrafish). Das 44 FRP avaliadas, 42 não apresentaram efeito citotóxico contra células Neuro-2A, em pelo menos uma das concentrações avaliadas. Todas as algas avaliadas tiveram FRP que protegeram as células Neuro-2A de dano oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio. Além disso, através do Score, foi possível observar que as algas marrons tiveram os melhores resultados. Com base nesses dados, foram selecionadas 4 FRP (DJ 1.2, SF 0.5, SS 1.3 e DM 1.0) para a avaliação dos possíveis mecanismos envolvidos. A partir da obtenção dos dados demonstram que os mecanismos utilizados por essas amostras vão desde atuação direta sobre as moléculas oxidantes até a modulação de mecanismos antioxidantes endógenos, promovendo aumento na expressão de genes relacionados a tradução de enzimas antioxidantes e redução na expressão de gene relacionado a uma resposta pró-inflamatória e pró-oxidante. Além disso, esses polissacarídeos se mostraram capazes de promover proteção contra o estresse oxidativo em modelo in vivo. Esses dados são importantes para o desenvolvimento das futuras avaliações dessas moléculas, tendo em vista que trouxeram conhecimento sobre seu potencial efeito neuroprotetor, seus possíveis mecanismos e sua atividade antioxidante em organismos mais complexos.Tese Lectina manganês-dependente da peçonha de bothrops moojeni com atividade bacteriostática: isolamento e caracterização(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-10-15) Nunes, Ellynes Amancio Correia; Migliolo, Ludovico; Luna, Karla Patrícia de Oliveira; https://orcid.org/0000-0002-6027-9109; http://lattes.cnpq.br/0781953872281542; Uchôa, Adriana Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Santos, Elizeu Antunes dos; Zuliani, Juliana Pavan; Franco, Octávio LuizA rica diversidade de moléculas bioativas presentes em peçonhas de animais oferece um vasto potencial para o desenvolvimento de novos fármacos. As peçonhas ofídicas são um complexo de molecular proteico, cuja diversidade de toxinas e seus mecanismos de ação explicam a variedade de manifestações clínicas observadas em envenenamentos por serpentes. O estudo das proteínas da peçonha ofídica permite explorar suas atividades biológicas. Nesse contexto, objetivou-se investigar o potencial biotecnológico de lectinas presentes na peçonha de Bothrops moojeni. A partir da revisão bibliográfica sobre lectinas ofídicas, foi formulada a hipótese de que essas proteínas podem apresentar atividades antibióticas. Para testar essa hipótese, foram realizados o isolamento, a caracterização bioquímica e a avaliação das atividades biológicas de uma lectina purificada da peçonha. O isolamento e identificação da lectina foi realizado por cromatografia de exclusão molecular em coluna de Sephacryl S-100, equilibrada com tampão bicarbonato de amônio 50 mM e pH 7,8, com vazão de 680 µL.min-1. As frações com atividade hemaglutinante foram submetidas a cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa em coluna C18, utilizando um gradiente linear de acetonitrila e água em ácido trifluoroacético 0,1% como fase móvel. A pureza da proteína foi avaliada por eletroforese em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 12,5%, sob condições redutoras. A presença de lectinas nas diferentes frações foi monitorada pela atividade hemaglutinante utilizando eritrócitos humanos a 2% (v/v) em PBS. A determinação de especificidade e dependência de íons foi investigada por hemaglutinação na presença de diferentes açúcares e íons, respectivamente. A influência do pH e temperatura na atividade hemaglutinante foi investigada em uma faixa de pH de 2 a 11, temperaturas de -4 a 100°C. A atividade hemolítica foi avaliada pela liberação de hemoglobina de eritrócitos de sangue humano tipo A, em uma concentração de 2% v:v, utilizando o método de espectrofotometria a 425 nm. A atividade antibacteriana contra Acinetobacter baumannii e Staphylococcus aureus foi determinada por ensaios modificados de inibição do crescimento por micro diluição em caldo. A formação de biofilme foi quantificada pelo método de cristal violeta. A cromatografia de exclusão molecular resultou em um perfil com seis frações proteicas distintas. A análise por ensaios de hemaglutinação revelou que as frações 5 e 6 apresentavam atividade hemaglutinante. A fração 5, com maior atividade, foi denominada BmoojL. A caracterização bioquímica da lectina BmoojL revelou que sua atividade é dependente de manganês e inibida por diversos monossacarídeos, como glicose, frutose e manose. Além disso, a proteína mostrou-se estável em uma ampla faixa de pH (5-9) e temperatura (até 80°C). BmoojL não foi hemolítica nas concentrações avaliadas (31,25-500 µg. mL-1), com porcentagem de hemólise abaixo de 10%. Os ensaios antibacterianos mostraram que apesar de não ter atingido a concentração inibitória mínima, BmoojL reduziu o crescimento bacteriano de A. baumannii a partir da concentração de 64 µg.mL-1 sendo, portanto, bacteriostática. O ensaio antibiofilme mostrou que para S. aureus, BmoojL foi efetivo, reduzindo consideravelmente o crescimento do biofilme em todas as concentrações testadas (16 - 512 µg.mL-1) em cerca de 50%. Dessa forma, o estudo permitiu isolar uma molécula com atividade lectínica manganês dependente com potencial para exercer atividade bacteriostática e antibiofilme, contribuindo para a pesquisa de moléculas bioativas derivadas de serpentes peçonhentas. Embora haja alguns estudos envolvendo tais moléculas e suas atividade heterólogas, quando comparado a outros grupos moleculares, o estudo envolvendo as lectinas de serpentes é uma área ainda pouco explorada, e esses achados mostram o que ainda há para se conhecer acerca destas moléculas e direcionar e propor novas atividades que venham somar as pesquisas biotecnológicas envolvendo esses grupos animais.Tese Desenvolvimento de blends contendo fucoidan A e avaliação da atividade antioxidante in vitro e in vivo em modelo Caenorhabditis elegans e zebrafish (Danio rerio)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-09-30) Silva, Cynthia Haynara Ferreira da; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-6764-5749; http://lattes.cnpq.br/7171255005743711; Gomes, Dayanne Lopes; Costa, Leandro Silva; Negreiros, Marília Medeiros Fernandes de; Ferreira, Éder GalinariO estresse oxidativo é um processo fisiológico importante na regulação e manutenção de diversos processos básicos nos organismos e em doenças como as cardiovasculares, neurodegenerativas e câncer. Há um interesse crescente em identificar novas moléculas, principalmente de fontes naturais, que tenham propriedades antioxidantes. As macroalgas marinhas já se destacam como alimento funcional e como fonte de moléculas ativas com diversas propriedades, como os polissacarídeos sulfatados (PS). Um exemplo, é o PS fucoidan A (FucA), extraído da alga Spatoglossum schröederi que tem sido estudado pelo seu potencial antitrombótico, anti-inflamatório e antigenotóxica. Entretanto, FucA não demonstra uma atividade antioxidante significativa. A presença dessa propriedade antioxidante poderia potencializar os efeitos das atividades biológicas já identificadas. Uma estratégia de potencializar os efeitos de uma molécula é a modificação química pela adição de grupos funcionais e pela elaboração de blends que combinem as propriedades de dois componentes. Com o objetivo de potencializar a atividade antioxidante de FucA, utilizou-se uma ferramenta de planejamento fatorial e gráfico de superfície de respostas para elaborar blends contendo FucA e Dextrana modificada com ácido gálico (Dex-Gal). Análises químicas e estruturais confirmaram que Dex-Gal foi modificada com adição de 3% de AG e apresentou capacidade antioxidante total (CAT) 3,2 maior do que a Dex não modificada. Dex-Gal e FucA foram submetidas ao planejamento fatorial para combinação de diferentes proporções para desenvolver cinco blends (BLD1, BLD2, BLD3, BLD4 e BLD5). Dois blend, BLD1 e BLD5 apresentaram baixa atividade nos testes antioxidantes realizados. No teste CAT, três blends se destacaram: BLD4 (22 Eq. AA), BLD3 (17 Eq. AA), e BLD2 (13 Eq. AA). No teste de poder redutor, BLD4 se destacou com 28% de redução, contra 17% do BLD2 e 15% do BLD3. Notavelmente, BLD4 também se destacou no teste de sequestro de radical hidroxila com cerca de 100% de atividade. A análise dos gráficos de superfície confirmou que a proporção ideal do blend de FucA e de Dex-Gal é a formulada no BLD4, com 1:1 de cada componente. BLD4 foi selecionado para os testes antioxidantes em células da linhagem 3T3 e em modelo biológico Caenorhabditis elegans e zebrafish (Danio rerio). BLD4 não apresentou citotoxicidade em células 3T3 e protegeu preventivamente as células contra estresse oxidativo induzido por H2O2; protegeu as larvas de C. elegans aumentando a sobrevivência em estresse oxidativo com álcool terc-butil hidroperóxido (T-BOOH) e diminuiu em 30% a quantidade de espécies reativas de oxigênio intracelular; e, por fim, protegeu embriões de zebrafish contra estresse oxidativo por H2O2. Portanto, em célula e em modelo C. elegans, BLD4 apresentou melhor desempenho quando comparado com seus componentes de forma isolada.Tese Testes de nutrigenética: aplicações na prevenção e tratamento da obesidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-06-26) Duarte, Mychelle Kytchia Rodrigues Nunes; Lima, Lucymara Fassarella Agnez; Morais, Ana Heloneida de Araújo; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; https://orcid.org/0000-0003-0642-3162; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; http://lattes.cnpq.br/2852620720413523; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; Amaral, Viviane Souza do; Marum, Annete Bressan Rente Ferreira; Fujii, Tatiane Mieko de MenesesA obesidade é uma doença crônica, complexa, e potencialmente poligênica. Neste contexto, vários tratamentos são elencados para atenuar o crescimento vertiginoso da doença e a genômica nutricional vem ganhando destaque com possíveis ferramentas para auxiliar na prevenção e/ou tratamento da obesidade, como os testes de nutrigenética (TN). Dessa forma, esta tese divide-se em dois capítulos, tendo como objetivo avaliar se os TN podem ser utilizados para prevenção e/ou tratamento da obesidade. No primeiro capítulo, foi realizada uma revisão narrativa para mostrar o panorama atual da obesidade e dos TN, perpassando sobre as temáticas da nutrição de precisão, expossoma, testes genéticos comercializados diretamente ao consumidor. Os benefícios e os aspectos negativos da utilização dos TN como ferramenta para auxílio na prevenção ou tratamento do sobrepeso e obesidade também foram analisados. Algumas entidades, como a Associação Brasileira para o Estudo da Obesidade e Síndrome Metabólica (ABESO) se posicionam de forma contrária ao uso dos TN para obesidade. Já a Academia de Nutrição e Dietética recomenda a utilização, porém não de forma isolada, mas dentro de um contexto de anamnese bem realizado. Assim, os TN não devem ser utilizados isoladamente no tratamento da obesidade, mas sempre associado com uma avaliação clínica, dentro de um tratamento individualizado ou a nível de saúde pública. No segundo capítulo, foi realizado um estudo retrospectivo, avaliando a relação de 29 polimorfismos de genes candidatos relacionados com a obesidade. Assim, 112 indivíduos foram divididos em dois grupos: 64 eutróficos (IMC< 25 Kg/m²) e 48 com sobrepeso e obesidade (IMC≥ 25 g/m²). Foi verificado que a população estava em equilíbrio de Hardy–Weinberg e uma análise logística multivariada foi realizada para verificar se os polimorfismos tinham associação com o sobrepeso e obesidade. Nessa análise foi encontrado que dos 29 polimorfismos listados no TN comercializado no Brasil, apenas o ADIPOQ rs17300539, PPARG rs1801282 estavam associados com o sobrepeso e obesidade; já o SOD rs4880 estava relacionado com proteção ao sobrepeso e obesidade. Assim, foi mostrado que são necessários mais estudos para validar quais SNP estão relacionados com o sobrepeso e obesidade na população Brasileira. Então, a tese mostra que os TN podem ser utilizados na prática clínica, mas não de forma isolada. Somado à utilização dos TN deve ser realizada uma boa anamnese clínica, pois as escolhas de estilo de vida, mesmo o paciente possuindo SNP que aumentem a predisposição para obesidade, podem alterar epigeneticamente á expressão dos genes e impactar no fenótipo.Tese Desenvolvimento de vacina multiepítopo e análise de potenciais inibidores da protease Mpro do Sars-CoV-2 via vacinologia reversa e bioquímica computacional(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-09-09) Campos, Daniel Melo de Oliveira; Oliveira, Jonas Ivan Nobre; Fulco, Umberto Laino; https://orcid.org/0000-0002-4528-9878; http://lattes.cnpq.br/9579151361576173; https://orcid.org/0000-0003-1646-921X; http://lattes.cnpq.br/2461374517882321; https://orcid.org/0000-0003-4016-3018; http://lattes.cnpq.br/9298368233770302; Rodrigues Neto, João Firmino; Vianna, Jéssica de Fátima; Bezerra, Katyanna SalesAs infecções causadas pelo SARS-CoV-2 representaram uma ameaça significativa à saúde pública global e continua sendo uma questão relevante e complexa. Esta tese teve como objetivo explorar novas abordagens para o combate ao vírus, focando no desenvolvimento de uma vacina multiepítopo e na identificação de potenciais inibidores da protease Mpro. Foram realizados dois estudos in silico: um dedicado ao design de uma vacina multiepítopo utilizando vacinologia reversa e outro voltado para o desenvolvimento de inibidores não covalentes por meio de química computacional. Além disso, a tese inclui uma revisão crítica sobre estratégias antivirais emergentes. Dessa forma, o primeiro capítulo desta tese apresenta uma revisão em forma de comentário sobre os alvos promissores e as estratégias farmacológicas adotadas durante o período pandêmico. Entre os principais alvos estavam a Mpro, a glicoproteína S e a TMPRSS2. Conclui-se que, apesar dos avanços, ainda eram necessárias evidências definitivas sobre a eficácia desses tratamentos. Enquanto isso, o reposicionamento de medicamentos existentes e o uso de plasma convalescente permaneciam como as melhores alternativas até que uma vacina eficaz fosse desenvolvida. No segundo capítulo, realizamos um estudo in sílico para o desenvolvimento de uma nova vacina multiepítopo contra SARS-CoV-2, incluindo as variantes Alfa, Beta, Gama, Delta e Omicron. Utilizamos uma abordagem imunoinformática para identificar os melhores epítopos imunogênicos das quatro proteínas estruturais do vírus (S, M, N e E) de 475 genomas sequenciados de regiões com alta incidência da doença. A vacina foi modelada, refinada, validada, e seu acoplamento molecular com o receptor TLR3 foi avaliado. Os resultados sugerem que a vacina candidata aumenta a resposta de anticorpos e deve ser testada em ensaios clínicos. No terceiro capítulo, avaliamos e comparamos dois potenciais inibidores não covalentes da Mpro do SARS-CoV-2, WU-04 e ML188, utilizando abordagens de química computacional, incluindo cálculos quânticos e análise ADMET. Nossos resultados revelaram que os resíduos Met165, Asn142, Glu166, His41 e Leu141 são críticos, pois interagem com alta afinidade com ambos os inibidores, sugerindo que esses resíduos são essenciais para a estabilização do complexo. A energia total calculada para o complexo Mpro-WU-04 foi de -52,21 kcal/mol, enquanto para o Mpro-ML188 foi de -40,47 kcal/mol, indicando que o inibidor WU-04 possui maior afinidade energética.Tese Efeitos da retirada de sacarose e de etanol sobre comportamentos relacionados à ansiedade e à depressão: investigação do papel da via das quinureninas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-02-27) Albino, Maryelle de Cássia; Rachetti, Vanessa de Paula Soares; Ferreira, Frederico Rogério; http://lattes.cnpq.br/1524215726056886; https://orcid.org/0000-0001-6783-5430; http://lattes.cnpq.br/6589553518544930; Silva Júnior, Edilson Dantas da; Gavioli, Elaine Cristina; Fernandes, Isabella Maria de Oliveira Pontes; Zanoveli, Janaina MenezesO uso repetido e prolongado de substâncias psicoativas provocam neuroadaptações que favorecem o desenvolvimento de tolerância, dependência química e sintomas de abstinência em tentativas de interrupção de consumo. Tais sintomas causam grande sofrimento psíquico e constituem-se fatores de reforço negativo do uso. A via das quinureninas é uma possível candidata à neuromodulação e à contribuição para as alterações emocionais comportamentais da retirada devido a indoleamina 2,3-dioxigenase (IDO), principal enzima da via, metabolizar grande parte do triptofano encefálico, interferindo na síntese de serotonina e gerar metabólitos neuroativos e reativos. Para analisar essa hipótese, este trabalho investigou os efeitos da retirada de sacarose e de etanol sobre comportamentos relacionados à ansiedade e à depressão, sobre a atividade da IDO e o perfil sorológico de ratas Wistar. Mulheres são mais vulneráveis ao desenvolvimento de transtornos emocionais e alimentares quando comparadas aos homens. Além disso, foi investigada a ação prebiótica da fibra alimentar inulina em ratas em exposição e retirada de etanol. É conhecido que o etanol causa prejuízos na microbiota e na permeabilidade intestinal levando a quadros inflamatórios que poderiam interferir na atividade neural e respostas emocionais. Portanto, na etapa experimental 1, as ratas foram submetidas à dieta líquida de sacarose por 16 dias e à retirada de sacarose a curto prazo (48h) ou a longo prazo (21 dias). Após, realizaram testes comportamentais do campo aberto (CA - 72h e dia 22º de abstinência) e natação forçada (NF - dia 4 e 5º, 23 e 24º de abstinência). Na etapa experimental 2, as fêmeas foram submetidas à dieta líquida exclusiva de etanol em concentração crescente (2, 4 e 6%) por 21 dias e a abstinência por 22 dias. Depois, passaram por testes comportamentais nos dias 22 (labirinto em cruz elevado - LCE), 23 (spray de sacarose - SS), 24 (marble burying - MB), 25 (pré-NF) e 26 (NF) dias de abstinência. O tratamento com inulina consistiu na administração de solução (100 mg/Kg ou 300 mg/Kg via oral, gavagem) a partir do 14º dia de exposição ao etanol até ao final dos testes comportamentais. Por fim, os animais foram eutanasiados para coleta de amostras de sangue, do córtex frontal, do estriado e do hipocampo. Nenhuma alteração comportamental foi vista nos animais em retirada de sacarose, porém as ratas expostas a sacarose de forma contínua reduziram a imobilidade no NF. Já as ratas em retirada de etanol exibiram menor exploração dos braços abertos no LCE, maior enterramento de bolas de vidro no MB e maior tempo de imobilidade no NF. Quando tratadas com inulina na dose de 100 ou 300 mg/Kg, as fêmeas em retirada etanólica apresentaram comportamento semelhante aos controles na exploração dos braços abertos do LCE. Ainda, as ratas em retirada e tratamento com inulina 300 mg/Kg apresentaram comportamento semelhante aos controles no enterramento de bolas de vidro e na imobilidade no NF. Não houve alteração no nível de quinureninas, marcadores de estresse oxidativo encefálicos e marcadores do perfil sorológico dos animais, com exceção dos expostos a sacarose que apresentaram aumento dos triglicerídeos plasmáticos. Em conclusão, o consumo prolongado de sacarose demonstrou um efeito antidepressivo. A retirada de etanol promoveu comportamentos do tipo ansiosos e depressivos que foram mitigados pelo tratamento com a inulina. O prebiótico inulina demonstrou um potencial candidato para o tratamento do transtorno por uso de álcool.Tese Aplicação do sequenciamento de leituras curtas no estudo da variabilidade genômica de organismos relevantes para a carcinicultura(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-12-01) Soares, Paulo Eduardo Toscano; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-1341-4814; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; https://orcid.org/0000-0002-4159-8569; http://lattes.cnpq.br/1232677110942724; Dalmolin, Rodrigo Juliani Siqueira; Sakamoto, Tetsu; Ortega, José Miguel; Farias, Sávio Torres deNas últimas duas décadas, o sequenciamento de leituras curtas se tornou uma ferramenta central nos estudos genômicos permitindo a rápida e precisa descoberta de sequências de DNA em alta quantidade. Isso viabilizou a aplicação do sequenciamento em atividades de interesse econômico como a carcinicultura permitindo, por exemplo, a identificação de patógenos e a genotipagem, tanto de centenas a milhares de camarões simultaneamente quanto a detecção de variantes genéticas desses patógenos. Esse sequenciamento pode também auxiliar na descoberta de marcadores genéticos, como os microsatélites e SNPs, que podem ser reunidos em um painel de genotipagem, tornando escalável e reduzindo o custo por amostra da sua aplicação. Especificamente na carcinicultura, esta tecnologia tem se mostrado extremamente valiosa, principalmente para o estudo do genoma de camarões. As análises dos genomas nuclear e mitocondrial fornecem informações cruciais sobre origem, adaptabilidade e outros aspectos evolutivos que são vitais para a otimização da criação de camarões. Devido à alta profundidade de cobertura dos desses sequenciamentos, é possível capturar a diversidade genética nas amostras, permitindo descobrir variações genéticas em populações mitocondriais (heteroplasmia) ocorrendo nos camarões e nos patógenos, como os vírus que os acometem. Surge assim, uma oportunidade única de se estudar os impactos dessa diversidade genética no uso de marcadores mitocondriais e na descoberta de variantes e quasispécies virais. Isso se traduz em práticas de manejo mais informadas, minimizando surtos e otimizando a saúde dos camarões. Já a implementação de painéis baseados em SNPs é um claro exemplo do impacto da genotipagem, demonstrando como a tecnologia pode ser usada para melhorar as práticas de seleção genética em carcinicultura. Neste trabalho, avaliou-se o impacto da diversidade genética mitocondrial, em um vírus que acomete a carcinicultura e no camarão por abordagens de bioinformática. Primeiro, foram avaliadas a ocorrência de heteroplasmia analisando-se dados do sequenciamento do músculo de um único camarão, detectando padrões de variabilidade e conservação nos mitogenomas desse indivíduo, além de comparar essa variabilidade interna com a observada entre outros mitogenomas e observar o impacto em marcadores na região de controle, muito utilizada em estudos populacionais. Segundo, avaliou-se a variabilidade genética do vírus da mionecrose infecciosa do camarão obtido em tanques em situação de surto viral, obtendo-se o genótipo da variante mais prevalente para análises filogenéticas, revelando sua possível origem e relação com demais linhagens existentes, e de variantes secundárias, avaliando a ocorrência de quasispécies virais. Por último, a partir de dados previamente existentes, foi desenvolvido um painel de 25 marcadores de SNPs (15 genômicos e 10 mitocondriais) objetivando a genotipagem a baixo custo do camarão Penaeus vannamei por amplificação por PCR multiplex seguido de análises de parentesco in silico. Atualmente este último projeto encontra-se em andamento e já teve os iniciadores avaliados, restando agora seguir com o sequenciamento e as análises de bioinformática. Em suma, este trabalho mostrou que o sequenciamento de leituras curtas é capaz de capturar a diversidade genética, trazendo novas percepções para a carcinicultura ao expor o impacto em marcadores, a variabilidade viral e, futuramente, o impacto dessa variabilidade em painéis de genotipagem.Tese Anticorpos anti-flaviviridae nas síndromes de Guillain-Barré e congênita associada à infecção pelo vírus Zika(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-10-09) Souza, Cássio Ricardo de Medeiros; Jerônimo, Selma Maria Bezerra; http://lattes.cnpq.br/7120263570947836; https://orcid.org/0000-0002-7783-9862; http://lattes.cnpq.br/1594370808039696; Costa, Eliardo Guimarães da; http://lattes.cnpq.br/3160805152538713; Egito, Eryvaldo Socrates Tabosa do; Carvalho, Lucas Pedreira de; Carvalho, Luiz Bezerra deEntre 2015 e 2016, o Brasil experimentou a maior epidemia do vírus Zika (ZIKV) já registrada até então, que se tornou problema de saúde pública não só pelo grande número de casos, mas principalmente pelo surgimento de outros quadros clínicos de maior gravidade associados à infecção, como a Síndrome de Guillain-Barré (SGB) e a Síndrome Congênita do ZIKV (SCZ). A avaliação da eficácia do diagnóstico sorológico e do perfil de resposta de anticorpos são duas grandes problemáticas no contexto da infecção por ZIKV. O diagnóstico sorológico é realizado principalmente através da detecção de anticorpos anti-NS1, mas há evidências de reatividade cruzada com outros flavivírus, prejudicando o diagnóstico específico da infecção por ZIKV. É de grande importância também o estudo da resposta e cinética de anticorpos anti-ZIKV pós infecção, a fim de determinar a existência de resposta de longo prazo e sua capacidade protetora. Essa tese, portanto, se debruça sobre essas duas problemáticas. Inicialmente, avaliou-se a eficácia da sorologia baseada em NS1 para detecção de IgM, IgG total e IgG3 anti-ZIKV e anti-DENV, e sua aplicação no diagnóstico da infecção prévia por ZIKV em casos de SGB. Observou-se a presença de anticorpos anti-ZIKV e anti-DENV em pacientes que desenvolveram SGB, avaliados entre 2009 e 2018 residentes de área endêmica para DENV. A presença desses anticorpos em indivíduos que desenvolveram a síndrome anteriormente à introdução do ZIKV no território é um indicativo da ocorrência de reatividade cruzada entre anticorpos anti-flaviviridae. Os achados indicam que a sorologia para detecção de IgM e IgG total anti-NS1, apesar de apresentarem sensibilidade considerável, não possuem especificidade suficiente para possibilitar o diagnóstico diferencial da infecção por ZIKV. Por sua vez, a sorologia para detecção de IgG3 anti-NS1 possui melhor performance, tornando possível a identificação de casos de SGB associados à infecção por ZIKV. Em seguida, determinou-se a presença de anticorpos anti-NS1 e anti-E contra ZIKV e/ou DENV, bem como a presença de anticorpos neutralizantes anti-ZIKV, em mulheres que deram à luz crianças com SCZ avaliadas em dois períodos distintos, entre 8 e 24 meses pós-parto e entre 25 e 44 meses pós-parto, a fim de identificar se há resposta de anticorpos protetores de longo prazo. Os resultados indicam presença significativa de anticorpos anti-NS1 e anti-E, bem como de anticorpos neutralizantes anti-ZIKV, em mulheres avaliadas entre 8 e 24 meses pós-parto, interpretados aqui como sinal exposição prévia a ZIKV. No segundo grupo, não foi possível identificar presença significativa de anticorpos anti-NS1 e anti-E, sugerindo decaimento dessa resposta ao longo do tempo; entretanto, registrou-se presença significativa de anticorpos neutralizantes no soro dessas mulheres. A atividade neutralizante contra ZIKV está relacionada à presença de anticorpos antiZIKV no primeiro grupo e, no segundo, esse fenômeno se correlaciona com a presença de anticorpos anti-DENV, sugerindo possível proteção cruzada entre anticorpos anti-ZIKV e anti-DENV. Estudos mais aprofundados são necessários para uma melhor caracterização do papel de anticorpos IgG3 como marcadores específicos de infecção recente por ZIKV, bem como o papel de anticorpos anti-NS1 e anti-E de longa duração como indutores de atividade neutralizante anti-ZIKV, a fim de prover melhores estratégias para o diagnóstico sorológico específico da infecção e um melhor entendimento da cinética e papel protetor de anticorpos anti-ZIKV.Tese Novas alternativas para o tratamento contra infecções bacterianas: avaliação do potencial do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo (ITT) como agente anti-infeccioso(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-02-23) Matias, Lídia Leonize Rodrigues; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Damasceno, Karla Suzanne Florentino da Silva Chaves; https://orcid.org/0000-0001-6884-1023; http://lattes.cnpq.br/0325141188932441; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; https://orcid.org/0000-0002-0731-8172; http://lattes.cnpq.br/3283329912419192; Sousa Júnior, Francisco Canindé de; Lima, Mayara Santa Rosa; Lopes, Patricia Santos; Machado, Richele Janaina AraújoAs infecções têm se tornado uma ameaça preocupante à saúde pública, principalmente quando causadas por bactérias resistentes aos antimicrobianos atualmente disponíveis. O objetivo desta tese foi estudar novas alternativas e agentes anti-infecciosos para tratamentos contra infecções bacterianas. Para isso, foram realizados uma revisão narrativa e um estudo in vivo e in vitro sobre a temática. Dessa forma, o primeiro capítulo desta tese apresenta uma revisão narrativa sobre novas alternativas biomédicas em tratamentos antibacterianos. Como resultado, constatou-se que algumas áreas de pesquisa, visando controlar as infecções bacterianas, vêm se destacando, sendo elas: bioinformática, nanotecnologia, genômica, além de estudos desenvolvidos com moléculas naturais, como os peptídeos antimicrobianos. Ademais, os artigos trazidos nessa revisão apresentaram pesquisas promissoras no campo de desenvolvimento de agentes antimicrobianos, bem como seus mecanismos de ação e, ainda, as estratégias para minimizar as consequências da resistência bacteriana. A revisão ao apresentar atuais alternativas em tratamentos antibacterianos poderá contribuir para estudos futuros na área. No segundo capítulo, foi investigado o efeito do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo (ITT) na sobrevivência de Caenorhabditis elegans (C. elegans) (cepa selvagem) sob condições de infecção bacteriana. O ITT foi obtido por isolamento em cromatografia de afinidade Trypsin-Sepharose CNBr-4B, teve a sua quantificação proteica realizada pelo método de Bradford e sua atividade específica monitorada por ensaio antitríptico. Os animais foram mantidos em meio Nematode Growth Medium (NGM) com a bactéria Escherichia coli (OP50) como fonte alimentar a 20ºC e, para as análises realizadas, foram expostos previamente a diferentes concentrações de ITT, no estágio L1 até atingirem L4, além de um grupo controle sem tratamento. Além disso, foi investigada a toxicidade por meio da avaliação da ovoposição, progênie, locomoção e tamanho corporal. Posteriormente, foi realizado o teste de infecção bacteriana com Staphylococcus aureus em C. elegans submetidos previamente às concentrações de 0,1 e 1,0 mg/mL de ITT. Foi realizado o teste de estresse oxidativo, no qual os nematóides foram expostos ao agente estressor hidroperóxido de terc-butilo (TBOOH). Em seguida, foram realizados os testes de curva de crescimento bacteriano, atividade antioxidante e antibacteriana, ambos in vitro. No teste de toxicidade, o ITT não se apresentou tóxico, não sendo observada diferença estatística para os parâmetros de toxicidade avaliados entre o grupo controle e as demais concentrações testadas (p>0,05). Quanto ao tamanho corporal, as concentrações testadas de ITT levaram a comprimentos estatisticamente maiores de C. elegans (p<0,05) quando comparados com o controle sem tratamento. Em relação às análises de infecção bacteriana, os animais submetidos a 0,1 mg/mL e 1,0 mg/mL de ITT apresentaram uma sobrevivência de 16,10% e 30,32%, respectivamente, maiores quando comparados com o grupo de C. elegans infectado sem tratamento (8,08%). Para compreender a atuação do ITT na sobrevivência dos animais, no teste de estresse oxidativo, em todas as concentrações testadas de ITT foi observada uma maior sobrevivência em relação ao controle nos tempos de 12h e 18h (p<0,05). Nos estudos in vitro quanto a curva de crescimento bacteriano, não foi observada atividade inibitória do ITT em relação à bactéria Escherichia coli (OP50) (p>0,05) nas concentrações testadas, assim como não foram observadas atividades antibacteriana e antioxidante. Diante dos resultados, constatou-se uma maior sobrevivência do C. elegans quando expostos previamente ao ITT, entretanto por via distinta da antioxidante e da antibacteriana. Dessa forma, o estudo contribuiu para uma consolidação do entendimento teórico e científico por meio da revisão narrativa e dos testes com ITT, respectivamente, sobre novas alternativas para controle de infecção bacteriana.Tese Extratos de Talisia esculenta apresentam compostos bioativos com atividade antioxidante e potencial anti-inflamatório, em modelos in vitro e in vivo(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-10-24) Cordeiro, Maria Lúcia da Silva; Scortecci, Katia Castanho; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; http://lattes.cnpq.br/2753398293028955; Uchoa, Adriana Ferreira; Gomes, Dayanne Lopes; Santos, Deborah Yara Alves Cursino dos; Câmara, Rafael Barros Gomes daConhecida popularmente como Pitombeira, Talisia esculenta (Sapindaceae) é uma espécie nativa do nordeste brasileiro que possui potencial econômico e medicinal. Os frutos desta planta são utilizados na alimentação e suas cascas atualmente têm seu potencial farmacológico pouco explorado, sendo descartado sem nenhuma aplicação biotecnológica A infusão de suas folhas é utilizada na medicina popular com indicação contra dores no quadril, reumatismo e pressão alta, porém, até o momento estudos de avaliação de seu potencial farmacológico, toxicológico e composição fitoquímica são escassos. Diante desse contexto, esse estudo teve como objetivos obter os extratos hidroetanólicos e as infusões das folhas e cascas dos frutos de T. esculenta, realizar sua caracterização fitoquímica e investigar seu potencial antioxidante e antiinflamatório in vitro e sua toxicidade e capacidade antioxidante in vivo, utilizando dois modelos animais, Tenebrio molitor e Zebrafish. Para isso, foram preparados o extrato hidroetanólico (70%) e o extrato aquoso (infusão) a partir das folhas frescas e cascas dos frutos da espécie, obtendo-se assim o extrato hidroetanólico das folhas (HF), infusão das folhas (IF), extrato hidroetanólico das cascas dos frutos (HC) e infusão das cascas dos frutos (IC). Inicialmente, a avaliação da capacidade antioxidante foi realizada por meio dos ensaios de Capacidade Antioxidante Total (CAT), sequestro do radical DPPH, poder redutor e quelação de Cobre. Os extratos tiveram seu efeito citotoxico avaliado pelo teste MTT e foram analisados quanto ao seu efeito sobre a migração celular e sua capacidade antioxidante em células NHI/3T3. Os extratos IF e HC foram selecionados para ter seus efeitos investigados em T. molitor e para caracterização fitoquímica, que foi realizada por meio da quantificação do teor de fenolicos, flavonoides e análise por CLAE-DAD (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detecção por arranjo de diodos). Também foi analizado nesse trabalho, o potencial antioxidante e antiinflamatório de todos os extratos de T. esculenta sobre a linhagem de macrófagos RAW 264.7. Ademais, investigou-se os efeitos protetores dos extratos de T. esculenta com os modelos de estresse oxidativo induzido por H2O2 e CuSO4 e ascorbato em Zebrafish, com base na análise dos níveis de espécies reativas de oxigênio (ERO). Os resultados revelaram que ambos os extratos apresentaram capacidade de sequestro de radicais, assim como uma elevada capacidade de quelação de íons cobre. Observou-se que os extratos de T. esculenta não apresentaram efeitos citotóxicos sobre a linhagem NHI/3T3, e apresentaram efeitos protetores contra o dano oxidativo induzido por CuSO4 e ascorbato. A análise da sobrevivência em larvas de T. molitor mostrou que IF e HC não apresentaram toxicidade significativa, nas concentrações avaliadas e foram capazes de reduzir o efeito do CuSO4 sobre os animais, uma vez que foi verificado uma maior sobrevivência de larvas tratadas com os extratos, com relação ao controle positivo, bem como menor melanização nos animais. A análise por CLAE-DAD revelou a presença de compostos em sua maioria da classe dos flavonoides, e identificou-se a presença de ácido gálico, quercitrina e rutina. Os resultados com modelo celular RAW 264.7 demonstraram a ausência de citotoxicidade pelo ensaio MTT e que os extratos de T. esculenta também foram capazes de reduzir os danos causados pelo estresse oxidativo induzido por H2O2 nos macrófagos. No entanto, apenas HC foi capaz de reduzir a produção de óxido nítrico (NO), quando os macrófagos foram estimulados com Lipopolissacarídeo (LPS). Todos os extratos reduziram os níveis de ERO nas larvas de Zebrafish expostas ao H2O2, no entanto uma redução mais significativa foi verificada para HF, IF e HC que foram iguais estatisticamente ao controle negativo. Ambas as amostras também reduziram os níveis de ERO no modelo de estresse induzido por CuSO4 e ascorbato em Zebrafish, de forma elevada. Em conjunto, esses dados demonstram que T. esculenta é uma fonte de compostos com potentes efeitos antioxidantes e potencial anti-inflamatório que deve ser mais profundamente estudado para futuras aplicações biotecnológicas.Tese Caracterização do dietilditiocarbamato de sódio como um potencial fármaco na terapêutica da doença de Chagas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-10-19) Oliveira, Johny Wysllas de Freitas; Silva, Marcelo de Sousa da; https://orcid.org/0000-0002-1000-0149; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; https://orcid.org/0000-0002-3100-0420; http://lattes.cnpq.br/9853996761260708; Ribeiro, Aline Rimoldi; Silva Júnior, Arnóbio Antônio da; https://orcid.org/0000-0002-7516-1787; http://lattes.cnpq.br/2593509584288129; Moreno, Claudia Jassica Gonçalves; Rocha, Hugo Alexandre de OliveiraA doença de Chagas é uma zoonose endêmica na América Latina e afetam principalmente as populações mais pobres. Os medicamentos disponíveis para tratar ambas as doenças apresentam baixa efetividade frente as formas intracelulares, elevada toxicidade, baixa biodisponibilidade e acabam por não serem seguras a saúde dos pacientes. Portanto, a várias décadas busca-se avaliar a possibilidade na utilização de outros medicamentos frente a esta doença. Um promissor candidato é o dietilditiocarbamato de sódio (DETC) já descrito como sendo um composto de alta eficácia frente Leishmania sp. e ao Trypanosoma cruzi em modelos in vitro e in vivo, todavia, buscando melhorar sua biodisponibilidade e reduzir toxicidade foi avaliado neste trabalho emprego de um nanosistema e da molécula livre em uma abordagem in vitro, in silico e in vivo frente ao Trypanosoma cruzi. A nanopartícula foi nanoformulada por nanoprecipitação utilizando PLA como polímero e caracterizada nos parâmetros: físicoquímica, citotoxicidade, penetração celular e atividade antiparasitária, ao qual observou-se que o nanosistema após a nanoformulação PLA-DETC com base nas características físico-químicas mostrou-se estável, com tamanho médio < 200nm e com IPD <0,3 e potencial Zeta de -20 mV. Além disso, na avaliação da citotoxicidade demonstrou baixa toxicidade celular não provocando redução maiores do 20% da viabilidade celular, ademais destacou-se a capacidade de penetrar as células em um teste com as linhagens as células 3T3 e RAW em 24 horas e também chegou a inibir quase 70% da cepa Dm28c de T. cruzi em 24 horas. Ademais, induziu o aumento de espécies reativas de oxigênio no interior dos parasitas em quase 70%, sendo este um importante fator que pode levar o parasita a morte. Além disso, a partir de uma abordagem in sílico foi observado que o DETC apresenta um perfil ADMET mais adequado com base nas propriedades físico-químicas e químicas medicinais quando comparados com os fármacos tradicionalmente utilizados frente a doença de Chagas, o que indica uma menor toxicidade. Além disso, verificou-se a toxicidade in vivo tanto da nanopartícula de PLA-DETC, bem como o fármaco livre nas concentrações 300mg/kg e 1000mg/kg, ao qual avaliaram-se os perfis hematológicos, bioquímicos, histopatológicos e parâmetros físicos frente a caracterização da toxicidade aguda preconizada pela OECD no teste 423. A partir dos resultados foi observada pouquíssimas alterações em comparação com o grupo controle, primeiramente foi observada uma redução de 10% nos níveis de plaquetas, um aumento nos níveis de AST, com uma redução dos níveis de creatina, além disso, não houve alteração significativa no peso dos animais que seguiram o mesmo padrão que o grupo controle, bem como não foi observada mudança nos comportamentos dos animais. Por fim, foram avaliados protocolos de infecção e tratamento utilizando o DETC (300 mg/kg, 100 mg/kg, 0,36mg e 0,18 mg) e da nanopartícula de PLADETC (0,36mg e 0,18mg), ao qual observou-se redução significativamente estatística para o DETC que apresentou perfil similar ao benzonidazol na concentração de 100 mg/kg. Além disso, notou-se que durante o tratamento de 7 dias poucas alterações foram promovidas, resultando em uma baixa toxicidade do composto. Portanto, o DETC mostrou-se um potencial fármaco na terapêutica da doença de Chagas, todavia, ainda são necessárias mais validações, a seguir, frente a fase crônica da doença afim de fornecer mais dados deste composto promissor.Tese Atividade in vitro e in vivo de peptídeos antimicrobianos análogos incorporados à nanopartículas de PLGA contra Staphylococcus aureus(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-12-07) Carmo, Bruno Amorim do; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; https://orcid.org/0000-0003-0417-8677; http://lattes.cnpq.br/5109295884451757; Silva, Marcelo de Sousa da; https://orcid.org/0000-0002-1000-0149; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; Silva Júnior, Arnóbio Antônio da; Carvalho, Eneas de; Castro, Mariana de SouzaO surgimento de microrganismos multirresistentes consiste em um grave problema de saúde pública mundial que limita as alternativas terapêuticas e revela a necessidade da busca urgente por novos agentes antimicrobianos. A peçonha do escorpião Tityus stigmurus é uma rica fonte de componentes biologicamente ativos, incluindo peptídeos antimicrobianos com elevado potencial terapêutico, como é o caso da Stigmurina. A estrutura da Stigmurina foi utilizada como protótipo para obtenção de moléculas mais potentes, sendo realizadas modificações na sua estrutura, gerando 31 análogos (patente BR102015029044-6). Neste estudo, foi caracterizado por ressonância magnética nuclear (RMN), investigada a estabilidade e avaliada a ação antibacteriana in vitro e in vivo de dois peptídeos análogos denominados de StigA25 e StigA31. Além da notável atividade antimicrobiana já descrita em estudo anterior, os peptídeos StigA25 e StigA31 apresentaram ação hemolítica dependente de concentração em relação ao peptídeo protótipo. A fim de reduzir a citotoxicidade, aumentar a estabilidade e potencializar a eficiência terapêutica desses peptídeos, foi investigado o efeito da associação desses componentes bioativos à nanopartículas de poli(ácido lático-co-ácido glicólico) (PLGA). StigA25 e StigA31 revelaram uma conformação predominante em α-hélice por RMN, com elevada estabilidade estrutural em diferentes condições de temperatura, pH e na presença de sais por dicroísmo circular. A associação destes peptídeos às nanopartículas de PLGA possibilitou um nanosistema estável com alto índice de incorporação dos peptídeos, atividade antimicrobiana equivalente aos dos peptídeos livres e relevante redução da toxicidade. A microscopia eletrônica de varredura e transmissão demonstrou que tanto os peptídeos livres quanto nanoparticulados atuam rompendo a membrana celular bacteriana. Tanto no modelo de sepse em camundongos, quanto em modelo de infecção por S. aureus em Galleria mellonella, os peptídeos livres e nanoparticulados foram eficazes em controlar o processo infeccioso. Portanto, este estudo revela o elevado potencial terapêutico do StigA25 e StigA31 associados a nanosistema de PLGA, indicando o uso deste nanocarreador como uma ferramenta promissora para a aplicação terapêutica destas moléculas no desenvolvimento de novos agentes anti-infecciosos.Tese Bioquímica quântica de interações ligante-proteína entre entre potenciais agentes anti maláricos e as enzimas DHODH e TyrRS do Plasmodium falciparum(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-11-10) Costa, Aranthya Hevelly de Lima; Fulco, Umberto Laino; Oliveira, Jonas Ivan Nobre; https://orcid.org/0000-0003-1646-921X; http://lattes.cnpq.br/2461374517882321; https://orcid.org/0000-0002-4528-9878; http://lattes.cnpq.br/9579151361576173; https://orcid.org/0000-0003-0867-677X; http://lattes.cnpq.br/7800733727878164; Albuquerque, Eudenilson Lins de; Rachetti, Vanessa de Paula Soares; Bezerra, Eveline Matias; Costa, Roner Ferreira daA malária é uma doença parasitária, originada de protozoários unicelulares que compõem o gênero Plasmodium, abrangendo mais de 90 países, sendo predominante nos continentes africano e asiático. O uso de medicamentos antimaláricos é crucial tanto para o tratamento quanto para a prevenção da doença. No entanto, os parasitos começaram a desenvolver resistência aos medicamentos antimaláricos, tornando mais difícil o combate do parasito. Como resultado, novas abordagens terapêuticas são necessárias para superar a resistência aos medicamentos nos parasitos e aumentar a eficácia da terapia medicamentosa contra a doença. O objetivo desta pesquisa é fornecer uma caracterização das inter-relações que interferem no comportamento dos complexos proteína-ligante de enzimas provenientes do Plasmodium falciparum. O primeiro estudo visa caracterizar a diidroorotato desidrogenase (DHODH), apresentando os valores energéticos da enzima nos complexos com a PfDHODH de tipo selvagem, com os ligantes DSM483, DSM557 e DSM1, e com PfDHODH com a mutação C276F, em conjunto com o DMS1. No segundo estudo, a pesquisa é realizada com a tirosina RNAt sintetase (TyrRS), sendo também estudada tanto na sua forma selvagem PfTyrRS, ligada ao ML901-Tyr e AMS-Tyr, quanto com a mutação S234C, novamente em complexo com o ML901-Tyr. Utilizando o método de fracionamento molecular com capas conjugadas (MFCC), os resíduos de aminoácidos foram particionados para calcular interações individuais com o formalismo DFT (Teoria da Densidade Funcional). O estudo com a enzima PfDHODH revelou que os resíduos de aminoácidos Arg265, Cys184 e Phe188 foram cruciais nas interações, e apresentaram energias de interação significativas com os quatro complexos estudados. Além disso, o valor energético do inibidor DSM1 não foi afetado pelas alterações estruturais causadas pela mutação C276F, demonstrando a sua capacidade de ligação à enzima. Já se tratando do trabalho envolvendo PfTyrRS, foram encontrados seis resíduos significativos compartilhados entre os três complexos. Esses resíduos incluem Asp61, Gln73, Gln192, Gln210, Met237 e Phe63, com a maioria deles desempenhando um papel essencial na ligação do ATP. Esta descoberta permite uma compreensão abrangente da interação entre as enzimas PfDHODH e PfTyrRS, juntamente com os seus inibidores. As informações coletadas neste estudo despontam como relevantes para o desenvolvimento de novas terapias medicamentosas, podendo vir a tornar-se um auxílio na exploração de design de novas drogas antimaláricas mais elaboradas e eficazes.Tese Encapsulação de proteínas e peptídeos com propriedades antiobesidade: estudo do efeito do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo sobre o peso e saciedade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-05-30) Costa, Rafael Oliveira de Araújo; Morais, Ana Heloneida de Araújo; Passos, Thais Souza; https://orcid.org/0000-0003-2054-1544; http://lattes.cnpq.br/9685790797554876; https://orcid.org/0000-0002-6460-911X; http://lattes.cnpq.br/1233944493334651; https://orcid.org/0000-0001-6118-0680; http://lattes.cnpq.br/9512494982702459; Silva Júnior, Arnobio Antônio da; Gonçalves, Catarina; Finotelli, Priscilla Vanessa; Lima, Severina Carla Vieira CunhaA obesidade impulsionaa busca por novas estratégias para combatê-la. Nesse sentido, vários peptídeos e proteínas com atividade sacietogênica têm sido alvos de estudos por agirem na regulação do consumo dietético e peso corporal. Dessa forma, esta tese divide-se em dois capítulos. No primeiro, buscou-se entender como peptídeos e proteínas, quando encapsuladas, atuavam sobre a saciedade, impactando no ganho de peso e no estado de obesidade. Para isso, foi realizada uma revisão integrativa por meio de busca em bases de dados, utilizando as palavras-chaves: peptídeo, proteína, obesidade, encapsulamento e agentes anti-obesidade e selecionando estudos pré-clínicos que comparavam o efeito de peptídeos ou proteínas, encapsulados ou não, sobre a saciedade. Foram selecionados 836 estudos, desses apenas quatro artigos atenderam os critérios de seleção. Embora tenha sido um número limitado de estudos, entre os efeitos observados com o encapsulamento dessas moléculas, destacaram-se a maior eficiência na redução do ganho de peso, alterações na função do tecido adiposo, além da redução dos níveis hormonais que modulam o apetite e o peso corporal, promovendo a potencialização dos efeitos desses peptídeos e proteínas quando encapsulados. No segundo capítulo, foi investigado o efeito do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo (ITT) comparado ao mesmo nanoencapsulado em quitosana e proteína isolada do soro do leite (EQPI). Dessa forma, o EQPI foi exposto a diferentes condições de pH (7.0; 3.0 e 7.0) e temperatura (37°C; 7°C e -18°C) visando avaliar a interação entre o ITT e os seus agentes encapsulantes monitorada pela atividade antitríptica. Posteriormente foi realizado o estudo pré-clínico, no qual ratos Wistar (n = 25), com obesidade induzida por dieta de alto índice glicêmico e alta carga glicêmica (HGLI) por 17 semanas, foram divididos em cinco grupos e avaliados por 10 dias, sendo eles: sem tratamento (HGLI + água), tratamento 1 (dieta nutricionalmente adequada), tratamento 2 (com dieta nutricionalmente adequada e EQPI/12,5 mg/kg), tratamento 3 (dieta HGLI e EQPI/12,5 mg/kg) e tratamento 4 (dieta HGLI e ITT/25 mg/kg). Esses grupos foram avaliados quanto ao consumo dietético, parâmetros zoométricos, bioquímicos e inflamatórios. O EQPI foi capaz de preservar eficientemente o ITT, não apresentando inibição para a tripsina, e quando submetido a condição ótima (agitação constante de 300 rpm, por aproximadamente 12 h, a 20°C) de liberação do ITT apresentou 100% de atividade antitríptica. Contudo, expondo EQPI aos diferentes pHs, apenas no pH gástrico durante 2 h observou-se expressiva atividade antitrípica. E quanto a exposição as temperaturas, EQPI apresentou alta atividade antitríptica, semelhante ao ITT (37°C por 4 h, 7°C por 3 dias e 7°C por 7 dias), demonstrando a liberação completa do ITT contido em EQPI. No estudo pré-clínico, ratos Wistar com obesidade tratados com EQPI reduziram significativamente a variação do peso corporal (p < 0,05) quando comparado ao tratamento com ITT. Observou-se que apenas o tratamento com ITT levou a mudanças significativas nos parâmetros inflamatórios (p < 0,05). O efeito do EQPI sobre o peso indica que a encapsulação promoveu aumento do efeito de ITT, com liberação sustentada. Portanto, a encapsulação de peptídeos e proteínas se mostra como uma estratégia promissora para aplicabilidade dessas moléculas no tratamento de doenças, como a obesidade.Tese Extratos e fases de partição de coccoloba alnifolia: potencial antioxidante, imunomodulador e cicatrizante in vitro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-03-29) Melo, Luciana Fentanes Moura de; Scortecci, Katia Castanho; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; https://orcid.org/0000-0001-9408-2470; http://lattes.cnpq.br/5242815540282484; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Oliveira, Riva de Paula; Meneses, Carlos Henrique Salvino Gadelha; Santos, Deborah Yara Alves Cursino dosO estresse oxidativo é um desequilíbrio entre a produção das espécies reativas e os antioxidantes. O acúmulo de espécies reativas no organismo pode resultar em danos aos tecidos e órgãos, potencialmente induzindo a uma variedade de alterações fisiológicas que comprometem a homeostase e podem ser associadas a doenças cardíacas, neurológicas e câncer, por exemplo. Tem sido observado que compostos fenólicos derivados de plantas apresentam a capacidade de sequestrar, neutralizar e prevenir os radicais livres. A espécie C. alnifolia, uma árvore da mata atlântica, apresenta poucos estudos etnobotânicos. Estudos anteriores do grupo mostraram que os extratos obtidos de suas folhas apresentaram um potencial antioxidante. Assim, neste trabalho, o objetivo foi avaliar o potencial antioxidante, imunomodulatório e cicatrizante dos extratos etanólico (EE) e aquoso (EA) e de duas fases de partição obtidas a partir do extrato aquoso, fases de partição do acetato de etila (FA) e butanólica (FB). Estas duas fases de partição foram escolhidas a partir do perfil obtido após a análise em cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada ao detector de diodo (CLAE-DAD). Estas duas fases de partição foram caracterizadas por meio de ensaios in vitro quanto ao potencial antioxidante. Foi observado que ambas o possuem, entretanto, a FB, apresentou maior potencial antioxidante em relação à FA. Entre os resultados da atividade antioxidante obtidos, o que mais chamou a atenção foi a quelação de cobre, que não havia sido observada anteriormente no extrato bruto (EA). A partir destes resultados, foi avaliado o potencial imunomodulatório por meio de ensaios com a célula RAW 267.4. Primeiramente, foi verificado que tanto os extratos quanto as duas fases de partição não foram citotóxicas. Em seguida, considerando a complexidade do processo inflamatório, foi analisado então o efeito de EE e de EA na produção de ROS após o tratamento com lipopolissacarídeo (LPS). Para isso, foram utilizadas três concentrações de extratos (100, 250 e 500 µg/mL). Verificou-se que ambos os extratos foram capazes de reduzir a produção de ROS quando comparados ao controle positivo (tratado com LPS). Além disso, a redução de ROS obtida com o EE foi semelhante ao controle negativo (sem o tratamento com LPS). Posteriormente, foi verificada a capacidade dos extratos e das fases de partição em inibir a produção de óxido nítrico (NO). Tanto os extratos como as fases de partição foram capazes de inibir a produção e a liberação de NO nas três concentrações testadas, de forma dose-dependente, com redução maior que 50%. Ainda em relação aos extratos, foi avaliada a atividade fagocítica, uma vez que essa é importante para a avaliação da atividade imunomoduladora. Essa análise foi realizada apenas com a concentração de 500 μg/mL, e verificou-se uma redução de 30% para EE e de 50% para EA. Considerando que as citocinas são importantes mediadores para a resposta imune e inflamatória, estas foram avaliadas utilizando duas metodologias, como a medição de citocinas por citometria de fluxo, em que houve aumento de IL-17 e por qRT-PCR, em que houve redução de iNOS e de IL-10, pelo EE. Com base nesses resultados, foi avaliado também o potencial dos extratos e das fases de partição na migração celular utilizando a linhagem celular NHI/3T3 (fibroblastos) em culturas submetidas ao ensaio da ferida. Os resultados obtidos mostraram que ambos os extratos e fases de partição, em 24 h, promoveram uma migração celular, tendo um fechamento em torno de 60% da ferida para os extratos, e em 75% para a fase de partição FB, enquanto no controle (sem extrato), a porcentagem de migração celular foi em torno de 40%. Desse modo, os dados aqui apresentados demonstraram que os EE e EA e as fases de partição FA e FB de C. alnifolia, possuem potencial antioxidante, imunomodulador, assim como apresentam a capacidade de induzir a migração celular envolvida no processo de cicatrização de feridas in vitro, propriedades importantes para extratos e fases de partição com potencial para atuar na dinâmica do processo inflamatório e de recuperação de dano tecidual. Com isso, conclui-se que tanto os extratos quanto as fases de partição possuem potenciais aplicações futuras para biotecnologia em saúde.Tese Os efeitos indiscriminados dos esteroides anabolizantes androgênicos no sistema cardiovascular e sua análise por bioquímica quântica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-05-25) Nunes, Ana Camila Campelo de Albuquerque; Fulco, Umberto Laino; Oliveira, Jonas Ivan Nobre; https://orcid.org/0000-0003-1646-921X; http://lattes.cnpq.br/2461374517882321; https://orcid.org/0000-0002-4528-9878; http://lattes.cnpq.br/9579151361576173; http://lattes.cnpq.br/6105729519636277; Silva Júnior, Edilson Dantas da; Albuquerque, Eudenilson Lins de; Ribeiro Júnior, Luiz Antônio; Freire, Valder NogueiraOs esteroides androgênicos anabolizantes (AAA), derivados naturais e sintéticos da testosterona, são substâncias com características tanto androgênica como anabólica, que são utilizados tanto de forma clínica como também por atletas por suas propriedades anabólicas. No entanto, se questiona os efeitos anabólicos da testosterona e seus derivados, pois o que se sabe é que eles são eficazes para aumentar o desempenho e melhorar a aparência física, mesmo tendo efeitos colaterais que podem impactar sobre a saúde e o bem-estar. Esta tese apresenta duas pesquisas realizadas, uma relacionada a uma revisão narrativa e a segunda no campo da simulação ab initio, baseadas em princípios da Mecânica Quântica. O primeiro estudo expõe uma revisão narrativa através de estudos experimentais apontando os principais efeitos dos esteroides anabólicos androgênicos no sistema cardiovascular. Os artigos utilizados para esta revisão foram publicados no período de 2010 a 2019 nas bases de dados Pubmed, Scielo e em periódicos independentes, após a triagem por título e resumo, 26 artigos foram selecionados. Os resultados desta revisão permitiram ratificar que o uso de esteroides anabolizantes pode causar alterações estruturais e funcionais da musculatura cardíaca decorrente ao seu uso, por efeitos diretos e/ou indiretos, podendo provocar e perpetuar doenças cardiovasculares. O segundo estudo caracteriza o sítio de ligação dos AAA Testosterona, DHT (Di-hidrotestosterona) e THG (Tetrahydrogestrinone) em complexo com o receptor androgênico identificando as interações químicas responsáveis pela manutenção da complementariedade fármaco-receptor e avalia as mudanças que ocorrem nessas interações, utilizando a estratégia MFCC à luz do DFT e parametrizações de constantes dielétricas. Nossos resultados confirmam a importância dos resíduos de aminoácidos Asn 705, Leu707, Leu704, Leu701, Leu873, Met742, Met780, Phe764, Met745 e Thr877 para o esteroide DHT. Quando analisamos o THG, os resíduos importantes foram Arg752, Asn705, Leu873, Leu707, Leu704, Met745, Met742 e Phe764. Já para o esteroide Testosterona os resultados confirmam a importância dos resíduos de aminoácidos Asn705, Gly708, Leu704, Leu701, Leu873, Met745, Met742 Met895, Met780, Phe764, Phe876, Thr877. O método computacional utilizado no segundo estudo emerge como uma alternativa eficiente para o desenvolvimento de medicamentos e podem auxiliar na descoberta e design de ligantes antiandrogênicos aprimorados.