PPGCF - Doutorado em Ciências Farmacêuticas
URI Permanente para esta coleçãohttps://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/11922
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Tese Distribuição espacial e temporal dos acidentes causados por escorpião no município de Natal, estado do Rio Grande do Norte (2007-2018)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-02-24) Araújo, Kaliany Adja Medeiros de; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; Chaves, Guilherme Maranhão; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; https://orcid.org/0000-0002-8791-2584; http://lattes.cnpq.br/6563267243088431; Oliveira, Antonio Manuel Gouveia de; Silva, Diana Pontes da; Lima, Maira Conceição Jerônimo de Souza; Martins, Rand RandallAcidentes causados por animais peçonhentos são considerados um problema de saúde pública nos países tropicais e subtropicais no mundo. A alta incidência desses casos revela a necessidade de estudos para determinar a diversidade de sinais e sintomas dessa distribuição espacial, principalmente na cidade de Natal, uma região quente e úmida, com muitos casos de escorpionismo. O objetivo desse estudo foi investigar a distribuição espacial e temporal, além dos aspectos clínicos e ambientais envolvidos nos acidentes por escorpião no município de Natal-RN. Para isso, os dados foram obtidos a partir do banco de informações de doenças notificáveis da Secretaria de Estado da Saúde Pública do Rio Grande do Norte (SESAP-RN) e do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), entre os anos de 2007 e 2018. Na região, foram registrados 31.368 casos de pessoas afetadas por escorpiões, com maior concentração em áreas de maior urbanização e Índice de Desenvolvimento Humano (IDH) mais baixo, taxa de esgotamento e coleta de lixo. Os acidentes ocorreram em regiões predominantemente quentes e úmidas, afetando, principalmente, mulheres em idades economicamente ativas. Além disso, observou-se que as primeiras três horas após a picada são cruciais para o prognóstico dos casos. Os quadros clínicos apresentam em maioria o sintoma dor, seguido de edema e dormência. Considerando tratar-se de um problema negligenciado, e levando em conta a localização do município, é possível perceber como as questões ambientais influenciam a distribuição espacial e a manutenção de um ecossistema favorável ao escorpionismo.Combase nos dados coletadossobre a caracterização da distribuição espacial e seus riscos, esta pesquisa pode contribuir significativamente para a mitigação de estratégias para prevenção de novos acidentes.Tese Proposição de instrumentos de avaliação e critérios para triagem de fatores de risco cardiometabólico em adultos com excesso de peso(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-03-12) Masset, Kalina Veruska da Silva Bezerra; Luchessi, André Ducati; Costa, Roberto Fernandes da; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; http://lattes.cnpq.br/1482077598229936; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; Cabral, Breno Guilherme de Araújo Tinoco; Lima, Marcos Felipe Silva de; Santana, Frederico Santos de; Rocha Júnior, Valdinar de AraújoPessoas com sobrepeso ou obesidade apresentam mais fatores de risco para o desenvolvimento de doenças cardiometabólicas. Entretanto, esses fatores apresentam diferentes graus de risco cardiovascular em função do perfil metabólico. Considerando as limitações e a escassez de instrumentos e critérios de avaliação específicos nesse contexto, os objetivos do presente estudo são: 1) desenvolver e validar cruzadamente duas equações para estimar a Massa Livre de Gordura por análise de bioimpedância: uma para o grupo de pessoas com sobrepeso ou obesidade (GSO) e outra, para o grupo de pessoas com obesidade unicamente (GO). 2) determinar pontos de corte de índices com parâmetros antropométricos e bioquímicos (IPAB) para a triagem de fatores de risco cardiometabólico (RCM) para a mesma população; 2) Para o objetivo 1, 305 pessoas (134 mulheres) se dividiram em dois grupos: desenvolvimento (n=206) e validação cruzada (n=99); e para objetivo 2, a amostra foi composta por 330 sujeitos (192 mulheres). Para o estudo, foram usados a DEXA como técnica padrão de composição corporal, a Análise de Impedância Bioelétrica (BIA) de monofrequência tetrapolar como equipamento para uso das equações, e o índice de Adiposidade Visceral (IAV), o Índice Cardiometabólico (ICM) e o Índice Triglicerídeos-Glicose (ITG) como IPAB. Para desenvolver e validar as equações foram utilizados os Teste t pareado, regressão múltipla e plotagem de Bland-Altman. Para determinar pontos de corte, a curva ROC foi plotada a partir da sensibilidade e da especificidade, além da identificação da área sob a curva AUC. A concordância diagnóstica foi calculada pela análise de Kappa. A equação para GSO apresentou coeficiente de correlação de concordância (CCC)=0,971; r2=0,94; erro padrão da estimativa (EPE)=2,69kg; limites de concordância (LOA)=-4,4 a 4,3; e 2) e a equação para GO apresentou CCC=0,965; r2=0,93; EPE=2,27kg; LOA=-5,5 a 4,7. As mulheres apresentaram os seguintes pontos de corte: IAV >4,11 (AUC=0,894), ITG >3.64 (AUC=0.858) e ICM>1,02 (AUC=0,912) e os homens: IAV>2,75 (AUC= 0,918), ITG>3.8 (AUC=0.888) e ICM>1,66 (AUC=0,923). Ao comparar os novos modelos e a técnica padrão, não houve diferença no valor da MLG (p>0,05). As duas equações derivadas são opções válidas para estimar a MLG de pessoas com as características da amostra estudada, assim como todos os IPAB mostraram bons resultados para triagem de fatores de RCM.Tese Integração de dados moleculares e químicos para análise da biossíntese de metabólitos especializados em Erythrina velutina Willd(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-03-27) Chacon, Daisy Sotero; Giordani, Raquel Brandt; Fett Neto, Arthur Germano; http://lattes.cnpq.br/5032750980466610; https://orcid.org/0000-0003-1932-2301; http://lattes.cnpq.br/6025915331568147; Aragão, Cicero Flávio Soares; http://orcid.org/0000-0002-3434-2602; http://lattes.cnpq.br/9657118649043311; Fett, Janette Palma; Ferreira, Leandro de Santis; Araújo, Wagner LuizO estudo das plantas está sob crescente transformação devido á disponibilidade de ferramentas moleculares e de bioinformática para entender e apontar potenciais fontes de novas entidades químicas bioativas com interesse farmacêutico. Nesse cenário, Erythrina velutina se destaca como uma planta medicinal encontrada na região nordeste do Brasil, principalmente no bioma da Caatinga. Esta planta possui notável capacidade de produzir alcaloides e flavonoides, que são os principais metabólitos secundários do gênero e estão frequentemente associados a atividades farmacológicas, como moduladores do sistema nervoso central (com efeitos antidepressivos e ansiolíticos) e ação anti-inflamatória. Apesar de alguns produtos naturais (PN) terem sido eficazes como fonte de novos medicamentos, a indústria farmacêutica ainda enfrenta desafios na identificação e produção otimizada desses compostos e isso tem levado a uma redução no interesse por medicamentos baseados em PN. Com o objetivo de minimizar essas lacunas, este estudo visa integrar dados moleculares e químicos para investigar a biossíntese dos principais metabólitos presentes em E. velutina sob três aspectos: avaliar a produção metabólica em plantas coletadas em habitat natural (Caatinga) e em plantas cultivadas submetidas a diferentes elicitores (i); identificar genes de referência para normalizar ensaios RT-qPCR para a espécie (ii) e avaliar a expressão dos genes alvos responsáveis pela produção de alcaloides e flavonoides de potencial bioativo (iii). O estudo se concentra em dados de transcriptoma, proteoma e metaboloma obtidos de amostras coletadas em seu habitat natural, além de cultivo de plântulas submetidas a fatores de estresse ambientais (temperatura, UV, estresse hídrico, estresse salino e danos mecânicos) e fitormônios (metiljasmonato, ácido salicílico, óxido nítrico e ácido abscisico). Como resultado, os flavonoides predominantes observados foram flavonas, isoflavonas e flavonóis, juntamente com vários alcaloides isoquinolínicos tanto do dienoides quanto do alcenoides. A análise do transcriptoma revelou a presença de enzimas envolvidas nas vias de biossíntese de flavonoides e alcaloides, incluindo aquelas expressas diferencialmente, como EvCHI, EvIF7GT, EvCHS, EvCOR, EvNMT e EvODM. Entre os tratamentos testados, o acúmulo mais significativo de metabólitos ocorreu em resposta ao NO, MeJA, estresse hídrico e calor, enquanto o ABA provocou o efeito menos pronunciado. Para normalização dos ensaios de RT-qPCR, EvCSTF64, EvRAB7, EvNLE, EvUPF e EvARP4 foram identificados como os genes de referência mais estáveis, enquanto EvNADH e EvPBL27 exibiram menor estabilidade. Esses genes servem como pontos de referência confiáveis para garantir a normalização precisa dos dados de expressão gênica em análises subsequentes. Os resultados apontaram o NO como crucial no aumento da expressão de CHI e das quantidades de isoflavonas anotadas. O estresse hídrico afetou negativamente os primeiros precursores da via dos alcaloides de Erythrina, enquanto o MeJA teve o efeito oposto. A exposição ao calor aumentou as concentrações de alcaloides. Esse estudo poderá contribuir significativamente para a compreensão do metabolismo secundário de plantas nas condições ambientais semiáridas/xéricas, características da região da Caatinga. Além disso, contribui para aprimorar a produção de moléculas bioativas na espécie e valorizar uma planta da Caatinga do Rio Grande do Norte como fonte de compostos com potencial farmacêutico. Essa pesquisa representa o primeiro passo para guiar o manejo para produção sustentável de metabólitos bioativos-alvo em E. velutina.Tese Avaliação de formulações vacinais no contexto do modelo experimental da doença de Chagas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-06-27) Queiroz, Aline Maria Vasconcelos; Silva, Marcelo de Sousa da; Aguilar, Diego Marcelo Guérin; https://orcid.org/0000-0002-1000-0149; http://lattes.cnpq.br/1295430560645312; https://orcid.org/0000-0002-1811-7376; http://lattes.cnpq.br/0824061786277088; Ribeiro, Aline Rimoldi; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; Andrade, Micássio Fernandes de; Andrade Neto, Valter Ferreira deUma importante condição tropical negligenciada, a doença de Chagas, embora endêmica nas Américas tornou-se preocupação de saúde global. Os desafios na terapêutica recordam a urgência do desenvolvimento de vacinas para o controle desta enfermidade. Estudos pré-clínicos expandiram-se em uma gama de plataformas e formulações vacinais a serem testadas. A apresentação de novas formulações com a utilização de antígenos recombinantes quiméricos do agente etiológico oferece consequente melhora na imunogenicidade. Nesta conjuntura, este estudo teve como foco principal a aplicabilidade de formulações com proteínas recombinantes quiméricas do agente causador da doença de Chagas, o protozoário Trypanosoma cruzi, utilizadas como candidatos antigênicos de maneira isolada ou em associação com moléculas imunoadjuvantes e a caracterização da resposta imune humoral em diferentes protocolos de imunização. Para esse fim, apresentou-se e investigou-se a capacidade imunoadjuvante de três polipeptídeos estruturais do vírus Triatoma virus (VP1+VP2+VP3: VPs), bem como avaliouse as formulações vacinais de antígenos recombinantes com características quiméricas (IBMP8.1, IBMP-8.2, IBMP-8.3 e IBMP-8.4: IBMPs) em mistura antigênica (Mix) associados ou não com as VPs e adjuvantes conhecidos (Adjuvante incompleto de Freund - AIF e Hidróxido de alumínio - Alum) por meio da imunidade humoral murina em diferentes tempos durante os protocolos de imunização envolvendo duas doses (Protocolo 1) e três doses (Protocolo 2) em modelo animal. Com esse intuito, camundongos Balb/c (Mus musculus) fêmeas foram imunizados e no Protocolo 1 foram separados em cinco grupos: Mix, Mix+AIF, Mix+Alum, Mix+VPs e controle negativo, enquanto no Protocolo 2 os grupos foram: AIF, Alum, Mix, Mix+AIF, Mix+Alum e controle negativo. Juntamente foi apresentado um protocolo de infecção experimental com T. cruzi. Os animais de todos os protocolos tiveram os perfis de anticorpos murinos específicos do tipo IgG total e suas subclasses: IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3 determinados por teste imunoenzimático a partir das amostras de soros. Os dados demonstram que as VPs apresentam capacidade em induzir bons níveis de IgG total, IgG2a, IgG2b e IgG3 e não indução de IgG1, caracterizando, portanto, a propriedade imunoestimulatória humoral desses polipeptídeos na associação com os antígenos IBMPs em forma de Mix; juntamente sugerem que o Mix direciona para um perfil de baixa presença ou ausência total de IgG1, possibilidade interessante para respostas imunes contra agentes intracelulares. Adicionalmente, evidenciam o hidróxido de alumínio com desempenho semelhante em diferentes concentrações e por fim, oferecem o desenvolvimento de dois protocolos de imunização em modelo murino no contexto da doença de Chagas, bem como reforçam a importância da dose de reforço. Não obstante, animais imunizados reconhecem o parasito e os infectados reconhecem as proteínas IBMPs. Este trabalho pioneiro no panorama de antígenos recombinantes quiméricos de T. cruzi associados às VPs, ao AIF e com o adjuvante mais utilizado em vacinas (Alum), apresenta-se como promissor para o desenvolvimento de novos imunobiológicos. Os achados promoveram a otimização de protocolos de imunização com pequenas quantidades de antígenos capazes de induzir a produção de anticorpos do tipo IgG total e subclasses que persistem após doses de reforço e forneceram percepções valiosas para impulsionar o avanço de vacinas quiméricas para infecções humanas causadas por tripanosomatídeos, como a doença de Chagas.Tese Desenvolvimento e validação de um questionário clínico para avaliação da predisposição a adesão ao tratamento imunossupressor em pacientes do pré-transplante renal(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-05-27) Oliveira, Luana Cristina Lins de Medeiros; Oliveira, Antônio Manuel Gouveia de; Martins, Rand Randall; http://lattes.cnpq.br/8062199269259772; https://orcid.org/0000-0001-9103-6532; http://lattes.cnpq.br/0119633997550691; https://orcid.org/0000-0001-9595-1949; http://lattes.cnpq.br/8550362587549379; Galato, Dayani; Egito, Eryvaldo Sócrates Tabosa do; Pinheiro, Hélady Sanders; Almeida, José Bruno deIntrodução: A não adesão à terapia imunossupressora após o transplante renal é fator importante para rejeição e perda do enxerto. Identificar a não adesão relacionada ao uso de imunossupressores é essencial para o tratamento, contudo, não é incomum isto ocorrer já com danos irreparáveis ao enxerto. Logo, a identificação prévia de pacientes susceptíveis a esta não adesão possibilitaria a adoção de medidas preventivas. Porém, não foram ainda desenvolvidos instrumentos clínicos com essa finalidade. Objetivo: Desenvolver e validar uma escala psicométrica de predisposição para não adesão ao tratamento imunossupressor em pacientes do pré-transplante renal. Metodologia: Estudo multicêntrico, prospectivo, observacional, transversal, longitudinal e analítico em pacientes candidatos para transplante renal de ambos os sexos, com mais de 18 anos. Para o desenvolvimento da escala psicométrica foi compilado um conjunto de itens refletindo afirmações de pacientes, obtidos por revisão da literatura, grupo focal e um painel de peritos. O questionário piloto foi aplicado em 541 pacientes de 13 centros de saúde, dos quais 154 repetiram a aplicação do questionário cerca de 12 meses depois. O questionário final foi obtido por análise fatorial exploratória e a validação interna incluiu análise de confiabilidade de consistência interna, confiabilidade teste-reteste e validade convergente avaliada por diferenciação por grupos conhecidos. Para a validação externa, foram incluídos 381 pacientes com cirurgia agendada em seis centros de transplante renal, que foram observados no pré-transplante e nos meses 3, 6 e 12 pós-transplante para avaliação da validade de critério, por comparação com duas escalas de não adesão à terapia medicamentos, e validade preditiva de não adesão, avaliada pela combinação de 3 métodos (autorelato, nível sérico de imunossupressores e retirada de medicamentos da farmácia). Para a validação transcultural foram incluídos 163 pacientes maiores de 18 anos, de ambos os sexos, candidatos a transplante renal, recrutados em 2 centros de transplante renal e 2 centros de diálise na Catalunha, Espanha. A escala foi readministrada nos primeiros 79 pacientes incluídos após um intervalo de 2 a 4 semanas. A confiabilidade de consistência interna foi avaliada pelo alfa de Cronbach e a teste-reteste pelo coeficiente de correlação intraclasse (CCI); a validade de construto foi avaliada com análise fatorial confirmatória por modelação de equações estruturais. Resultados: O questionário final, denominado Kidney AlloTransplant Immunosuppressive Therapy Adherence (KATITA), composto por 25 itens e 3 dimensões não correlacionadas, apresentou boa confiabilidade de consistência interna (alfa de Cronbach 0,81). As 3 dimensões e respectivos alfa de Cronbach foram “Displicência” (14 itens, 0,81), “Ceticismo” (6 itens, 0,57) e “Receio” (5 itens, 0,62). A confiabilidade teste-reteste, apresentou coeficiente de correlação intraclasse de 0,62 (concordância moderada). A escala apresentou validade convergente. O estudo longitudinal confirmou a estrutura multidimensional da escala e validade de critério. A validade preditiva da escala foi confirmada por uma área sob a curva ROC de 0,68 e por sensibilidade de 59,8%, especificidade de 68,2% e valor preditivo positivo de 71,8%. O alfa de Cronbach da versão espanhola foi 0,83 e os alfas das 3 subescalas foram 0,82, 0,74 e 0,52. Na análise da confiabilidade teste-reteste, o CCI foi 0,86. A análise fatorial confirmatória mostrou ajustamento adequado do modelo estrutural. Na sua generalidade, os resultados analíticos foram semelhantes aos obtidos na validação da escala original. Conclusão: O questionário KATITA-25 é o primeiro questionário psicométrico validado para avaliação da predisposição à não adesão à terapia imunossupressora em pacientes candidatos ao transplante renal no cenário do pré-transplante renal.Tese Epidemiologia baseada no esgoto como ferramenta de avaliação do consumo de drogas ilícitas no Nordeste brasileiro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-11-21) Gomes, Cézar Silvino; Aragão, Cícero Flávio Soares; Ferreira, Leandro de Santis; https://orcid.org/0000-0002-8408-5886; http://lattes.cnpq.br/6622861873027635; http://lattes.cnpq.br/9657118649043311; http://lattes.cnpq.br/9657118649043311; https://orcid.org/0000-0001-6406-9662; http://lattes.cnpq.br/9315651796512424; Moura, Hadassa de Souza Ramos Pontes; Jordão, Alessandro Kappel; Assis, Alexandro Mangueira Lima de; Sodré, Fernando Fabriz; Nogueira, Fernando Henrique AndradeAs drogas ilícitas e outras substâncias consumidas pelo ser humano são metabolizadas e eliminadas pela urina e podem ser dosadas no esgoto por SPE e LC-MS/MS. Conhecendo-se o tamanho da população, o volume de esgoto amostrado e as taxas de excreção dos metabólitos é possível calcular a quantidade consumida de droga a partir da dosagem desses metabólitos. Esse método, conhecido como Epidemiologia Baseada no Esgoto - EBE, foi usado com o objetivo de diagnosticar o uso de cocaína e MDMA em Natal - RN e João Pessoa - PB. A pesquisa também evidenciou algumas das vantagens e desvantagens da ferramenta EBE. A EBE é capaz de trazer à luz informações úteis para saúde e segurança públicas e tem repercussão direta em campanhas públicas de prevenção e mitigação de danos associados à drogadição e poluição ambiental. As curvas de calibração foram construídas através de regressões lineares utilizando padrões internos deuterados. Foram utilizados testes estatísticos para eliminar valores aberrantes, avaliar a homocedasticidade (Cochran) e a adequação do modelo e da faixa de trabalho (lack-of-fit). Os resultados mostraram um consumo médio de 263 mg/1000 hab/dia para cocaína e de 18 mg/1000 hab/dia para MDMA no Carnatal (2019) e 3400 mg/1000 hab/dia de cocaína e 60 mg/1000 hab/dia de MDMA no Carnaval (2020). Nos eventos festivos o consumo aumentou em aproximadamente duas vezes em relação à semana anterior. O consumo de cocaína no Carnaval de Natal em 2020 oscilou entre 1,6 e 5,8 g/dia/1000hab e em uma semana típica de 2022 o consumo oscilou entre 1,3 e 4,6 g/dia/1000 hab. O consumo concomitante de álcool e cocaína também foi evidenciado pela presença do metabólico cocaetileno, substância com maior toxicidade que a cocaína e o etanol e que deve ser preocupação para a saúde pública. Nas festividades natalinas e na virada do ano de 2021-2022 foi detectado no esgoto a presença da mitraginina e do 25I-NBOH. No período de abril de 2022 o consumo de cocaína em João Pessoa - PB foi oscilou entre 2,1 e 2,7 g/1000hab./dia. O estudo proporcionou informações relevantes para os gestores de saúde e segurança pública, demonstrando a aplicabilidade quase em tempo real da técnica, bem como evidenciou limitações associadas ao preparo das amostras. A pesquisa demonstrou, sobretudo, a validade do uso complementar da ferramenta EBE no monitoramento do consumo de substâncias ilícitas.Tese Desenvolvimento e avaliação biológica de novo curativo à base de quitosana e papaína como alternativa para o tratamento de úlceras em diabéticos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-11-23) Melo, Anne Emmanuelle Câmara da Silva; Silva Júnior, Arnóbio Antônio da; Medeiros, Caroline Addison Carvalho Xavier de; https://orcid.org/0000-0001-9224-2434; http://lattes.cnpq.br/2982271986555450; https://orcid.org/0000-0002-7516-1787; http://lattes.cnpq.br/2593509584288129; http://lattes.cnpq.br/8794027469572778; Resende, Adriana Augusto de; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; Leitão, Renata Carvalho LeitãoA cicatrização é um evento complexo e dinâmico que visa restaurar a integridade tecidual, mas uma possível intensa resposta inflamatória pode atrasar e dificultar o sucesso de seu tratamento. As feridas crônicas constituem um problema de saúde pública, principalmente quando associado a um grupo de risco como diabéticos, se tornando um grande desafio clínico. A papaína é uma enzima extraída do mamão (Carica papaya) com propriedades cicatrizantes, e é largamente utilizada no desbridamento químico de feridas cônicas, mas o seu uso em altas quantidades ou doses traz limitações tanto na sua aplicação. A quitosana é um copolímero obtido de fontes naturais e serve de suporte para a imobilização de enzimas para o aumento de sua atividade. O presente estudo aborda como hipótese a possibilidade de obtenção de membranas de quitosana contendo a papaína em diferentes proporções pela primeira vez e esse dispositivo biológico melhorar a atividade da enzima potencializando o processo de cicatrização. Como objetivo geral desenvolver e avaliar a eficácia dos curativos biológicos a base de quitosana e papaína em feridas cutâneas diabéticas, podendo contribuir com nova opção terapêutica para o tratamento de feridas crônicas. Para isto, membranas de quitosana contendo diferentes concentrações de papaína (Ch / Ch Pap 2,5%/ Ch Pap 5%) foram obtidas pelo método de evaporação do solvente, os dispositivos foram caracterizados por microscopia de força atômica (MFA), microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raio-X (DRX), espectroscopia de absorção na região de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e análise térmica (DSC e ATG/DTG). Outros estudos incluíram determinação do pH, estudo do intumescimento, molhabilidade, ensaio de tração, análise quantitativa, a atividade enzimática, liberação enzimática in vitro e perfil de citocompatibilidade e biocompatibilidade. O efeito cicatrizante foi avaliado no modelo in vivo em camundongos swiss e as lesões foram observadas em grupos de 7 e 14 dias. As membranas apresentaram características adequadas para o seu uso como aspecto transparente e rugoso e propriedades mecânicas. A papaína foi incorporada com sucesso, as propriedades físico-químicas demontraram interações eletrostáticas entre a papaína e o copolímero, com pH entre 7,1 a 7,5 O biocurativo apresentou citocompatibilidade e biocompatibilidade, o qual aumentou a atividade enzimática da papaína livre em 250 vezes. A liberação in vitro, indicou que a membrana modulou a liberação da papaína de forma controlada, ajustada pelo modelo cinético de Higuchi. As análises in vivo realizadas demonstraram reepitelização, fibroblastos e espessamento de epitélio que auxiliam no processo de cicatrização em proporção significativa nos grupos tratados com a membrana papaína 2,5% e 5% comparado aos grupos sem tratamento. A Ch Pap 5% reduziu o tamanho da ferida e infiltrado inflamatório em relação aos animais controles ou quitosana isolada. Bem como, a papaína 5% aumentou o número de fibroblastos no 7 dia e a espessura do epitélio, no 14 dia do modelo experimental. Os parâmetros avaliados mostraram que a membrana de quitosana com papaína a 5% melhorou a cicatrização em camundongos diabéticos. Os resultados experimentais corroboram com a hipótese do trabalho, os sistemas de membranas com papaína possuem potencial de bioatividade efetiva, sendo uma alternativa promissora para o uso de fechamento de feridas e, devido a sua liberação prolongada, revelando potencial efeito benéfico no tratamento de feridas crônicas.Tese Infecção natural e análise molecular de tripanosomatídeos em diferentes espécies animais no estado do Rio Grande do Norte(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-03-17) Araújo Neto, Vicente Toscano de; Câmara, Antônia Cláudia Jácome da; Galvão, Lucia Maria da Cunha; https://orcid.org/0000-0002-6207-4502; http://lattes.cnpq.br/6437957961133013; https://orcid.org/0000-0001-7337-9320; http://lattes.cnpq.br/5445255186647578; https://orcid.org/0000-0002-0155-5230; http://lattes.cnpq.br/6780469943240040; Alves, Carlos Roberto; Salha, Daniella Regina Arantes Martins; Barbosa, David Soeiro; Mendonça, Vagner JoséO estudo analisou a ocorrência da infecção natural por Trypanosoma cruzi e Leishmania spp. usando marcadores moleculares e análise filogenética em coágulos de sangue em animais domesticados no estado do Rio Grande do Norte. As amostras de coágulo de sangue foram coletadas em 163 amostras de sangue de ovinos, caprinos, equinos, bovinos e cães e 64 aspirados de linfonodos de poplíteo de cães em nove municípios no estado do Rio Grande do Norte (RN). Inicialmente a infecção natural por T. cruzi usando o 18S e kDNA foi observada em amostras de coágulos sanguíneos de ovinos, caprinos e equinos e identificaram o parasito em 28,3% (17/60), 22,7% (5/22) e 15,4% (2/14) das amostras, respectivamente. Esses animais estavam distribuídos nas três mesorregiões estudadas em todo o estado do RN. Neste momento, a infecção em equinos foi descrita pela primeira vez no Brasil. Em seguida, o relato de um cão na fase aguda da infecção pelo T. cruzi foi relacionado a aspectos clínicos, hematológicos, bioquímicos, parasitológicos e caracterização do isolado por métodos biológicos, molecular e filogenético. Um cão jovem aparentemente assintomático apresentou prolongado período de parasitemia patente, anemia normocítica e hipocrômica. Associado a isto o dano cardíaco deste animal foi observado pela elevada concentração dos biomarcadores como troponina I, NTProBNP e a hipocinesia segmentar qualitativa. Outras amostras de coágulos de sangue de cães também foram submetidas à amplificação do kDNA do T. cruzi e apresentaram 10,9% (7/64) de positividade. A análise filogenética de amostra de coágulo sanguíneo de ovino revelou sequência de DNA com grande correlação com amostras de DTU II. Enquanto que o parasito isolado de cão em fase aguda foi caracterizado geneticamente por três marcadores e análise filogenética como sendo TcIII. A DTU III inicialmente descrita em ambiente silvestre, está cada vez mais presente no ciclo domiciliar no semiárido brasileiro. Os dados com amostras de cães revelaram que as culturas do poplíteo em meio bifásico foram 12,5% (8/64) das amostras positivas com formas flageladas semelhantes a promastigotas. O sequenciamento e análise filogenética de oito amostras da cultura apresentaram semelhança acima de 99% com as sequências de Leishmania infantum. A ampla distribuição da infecção por T. cruzi e Leishmania infantum em animais domesticados contribui para a expansão do cenário epidemiológico e da necessidade de melhor entender o papel desses animais no ciclo de transmissão como reservatórios e/ou sentinela de infecções em humanos.Tese Desenvolvimento e validação de instrumento para predição de reações adversas a medicamentos em neonatos internados em unidade de terapia intensiva(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-07-12) Leopoldino, Ramon Weyler Duarte; Martins, Rand Randall; Oliveira, Antônio Manuel Gouveia de; https://orcid.org/0000-0001-9103-6532; http://lattes.cnpq.br/0119633997550691; http://lattes.cnpq.br/8062199269259772; http://lattes.cnpq.br/8542896232446177; Egito, Eryvaldo Sócrates Tabosa do; Silva, Hilris Rocha e; Santos, Pablo de Moura; Cobucci, Ricardo Ney OliveiraIntrodução: As Reações Adversas a Medicamentos são comuns em neonatos hospitalizados, porém sua detecção é dificultada nestes indivíduos pela gravidade do estado de saúde e rápida mudanças fisiológicas relacionada a maturação dos órgãos. Os instrumentos preditivos de RAM são as melhores estratégias de cuidados. Entretanto, estes instrumentos ainda não estão disponíveis a população neonatal. Objetivo: Desenvolver e validar instrumento para predição de RAM em neonatos internados em Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN). Métodos: Este é um estudo caso-controle aninhado numa coorte aberta conduzido de janeiro de 2019 a janeiro de 2022 com neonatos internados na UTIN de uma maternidade pública de Natal/Brasil. Todos os neonatos com mais de 24 horas de internação na UTIN foram incluídos no estudo. As RAM foram detectadas por busca ativa em prontuários eletrônicos e análise de notificações espontâneas. Para a coorte, as RAM foram caracterizadas quanto a incidência, prevalência e fatores de risco via modelo multivariado. Posteriormente, os pacientes com RAM foram pareados aleatoriamente com dois controles, permitindo o desenvolvimento de modelo preditivo de RAM por regressão logística multivariada. A capacidade discriminativa do modelo foi avaliada pela área sob curva ROC por estatística-c ajustada com bootstrap. A partir de uma amostra de casos de RAM, o desempenho dos algoritmos de Du e Naranjo foi analisado por três avaliadoras independentes. Para estas ferramentas, foram calculadas a concordância intravaliadoras, interavaliadoras e entre ferramentas (coeficiente kappa). Resultados: Com uma coorte de 600 neonatos, a prevalência de RAM foi 19,7% (IC95% 16,7 - 23,0%) e incidência de 310 casos por 1.000 neonatos (IC95% 267,8 – 357,0). As reações mais frequentes foram taquicardia (30,6%), poliúria (9,1%) e hipocalemia (8,6%). O tempo de hospitalização longo (OR 1,025 IC95% 1,011 – 1,038; p < 0,01) e polifarmácia (OR 1,121 IC95% 1,057 – 1,189; p < 0,01) foram fatores associados a RAM. Para o desenvolvimento do instrumento preditivo, 450 neonatos (150 casos e 300 controles) foram incluídos na análise. O instrumento inseriu quatro condições do neonato (ventilação mecânica, frequência cardíaca ≥ 178 bpm, medicamentos intravenosos, 5 ou mais medicamentos) e um da mãe (hipertensão gestacional) para predição de RAM e obteve área sob a curva ROC de 0,74 (IC95% 0,68 - 0,80). No desempenho dos algoritmos Du e Naranjo, o primeiro mostrou boa capacidade para identificar RAM definidas (≈60%), mas teve baixa reprodutibilidade (k global = -0,031; IC95% -0,049 – 0,065). Os resultados dos algoritmos não foram equivalentes (k global = -0,031; IC95% -0,049 – 0,065). Conclusão: As RAM frequentemente observadas na UTIN foram a taquicardia, hipertermia, poliúria e hipocalemia. Com base em cinco variáveis comumente monitoradas na UTIN, foi construído um instrumento preditivo simples, bem calibrado e com capacidade discriminativa adequada. Em relação ao desempenho dos algoritmos de causalidade, o algoritmo de Du mostrou-se promissor para identificação de RAM em UTIN devido a boa capacidade de classificar as reações como definidas.Tese Estudo de associação de SNPs com a predisposição, proteção e prognóstico do câncer de tireoide na população do Estado do Rio Grande do Norte(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-06-16) Santos, Isabelle Cristina Clemente dos; Silbiger, Vivian Nogueira; Genre, Julieta; https://orcid.org/0000-0002-9252-0278; http://lattes.cnpq.br/6121935907512568; https://orcid.org/0000-0002-7766-7802; http://lattes.cnpq.br/7033996851814491; Santos, Carina Carvalho dos; Bastos, Gisele Medeiros; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; https://orcid.org/0000-0003-0229-9416; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Baracho, Maria de Fátima PaivaO câncer de tireoide (CT) é o tumor endócrino mais comum e representa 1% de todas as neoplasias malignas. Os estudos de genotipagem buscam identificar polimorfismos de único nucleotídeo (SNPs) que podem estar relacionados ao aumento do risco de CT e prognóstico. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar se um painel de SNPs estaria associado à predisposição e prognóstico de CT em uma população heterogênea, proveniente do Estado do Rio Grande do Norte/Brasil. Biópsias de tireoide foram selecionadas de 279 pacientes com CT e amostras de sangue periférico foram coletadas de 301 doadores de sangue saudáveis. A genotipagem de um painel de 84 SNPs foi realizada em ambos os grupos usando o sistema MassARRAY SNP. Os SNPs rs10759944, rs7850258, rs116909374 e rs34566348 foram associados ao risco de desenvolver CT. Em relação aos fatores associados ao prognóstico de CT, observou-se que o rs2236487 foi associado ao risco de carcinoma papilífero e o rs1571443 foi associado ao risco de carcinoma folicular. O rs31872 foi associado à proteção contra o desenvolvimento de tumores ≤ 2 cm. Ao avaliar a associação dos SNPs com o estadiamento do tumor, o rs10238549 foi associado ao risco de desenvolvimento dos estágios I e II. Por outro lado, o rs7800391 foi associado à proteção contra o desenvolvimento dos estágios I e II. Além disso, o rs949908 foi associado ao risco de CT persistente e o rs487880 foi associado ao risco de desenvolvimento de carcinoma metastático. O presente estudo, pioneiro em população mista do nordeste brasileiro, sugere um painel de SNPs como marcadores de predisposição e prognóstico de CT nessa população, que pode ser potencialmente útil para prever o risco de desenvolvimento da doença e permitir o aconselhamento genético na prática clínica, evitando assim métodos invasivos de análise e, muitas vezes, diagnósticos pouco conclusivos.Tese Uso do resíduo industrial do sisal (Agave sisalana Perrine) em produtos cosméticos sustentáveis com atividades antioxidante e fotoprotetora(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-22) Daher, Cláudia Cecílio; Ferrari, Márcio; Giordani, Raquel Brandt; http://lattes.cnpq.br/5032750980466610; https://orcid.org/0000-0002-2425-7586; http://lattes.cnpq.br/5782539548696465; http://lattes.cnpq.br/5337129241199109; Assis, Cristiane Fernandes de; Verissimo, Lourena Mafra; Damasceno, Gabriel Azevedo de Brito; Rocha Filho, Pedro Alves daO sisal é a principal fibra dura produzida no mundo. Na composição química do resíduo de Agave sisalana, são encontrados carboidratos, saponinas e compostos fenólicos, os quais são utilizados na indústria cosmética com atividades antioxidante e fotoprotetora. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma formulação multifuncional com atividades antioxidante e fotoprotetora a partir do resíduo industrial de A. sisalana. Foi realizado uma extração por ultrasonicação do material vegetal sólido, variando as concentrações do agente extrator (50% etanol/água (v/v), 80% etanol/água (v/v) e 100% etanol). O extrato com maior rendimento foi caracterizado quimicamente e avaliado quanto a atividade antioxidande in vitro. Foram preparadas dez formulações fotoprotetoras variando as concentrações dos componentes e o tempo de cisalhamento. O extrato de A. sisalana na concentração de 1,0% foi incorporado às formulações mais estáveis e a estabilidade preliminar e acelerada dessas foi avaliada e as emulsões foram investigadas quanto a segurança. As formulações fotoprotetoras contendo ou não o extrato que se apresentaram estáveis após 90 dias, tiveram realizadas a determinação do Fator de Proteção Solar in vivo, Fator de Proteção UVA, comprimento de onda crítico, e proteção contra a luz visível e azul. A extração por ultrassom utilizando etanol/água 50% (EH 50), como veículo extrator foi a que apresentou melhor rendimento. O extrato exibiu boa concentração de compostos fenólicos e apresentou atividade antioxidante in vitro nas diferentes etapas da cascata oxidativa. Emulsões sem e com o extrato de A. sisalana 1,0% mantiveram-se estáveis durante 90 dias, apresentando comportamento reológico desejável para um cosmético de uso tópico: pseudoplastico e tixotrópico. A emulsão contendo o extrato de A. sisalana apresentou-se segura após os estudos clínicos. Verificou-se que a adição do extrato a formulação fotoprotetora aumentou estatisticamente o FPS quando comparada a formulação sem o extrato com proteção contra radiação UVA, comprimento de onda crítico, absorção da luz visível e azul e enquadram-se quanto as exigências da legislação atual para protetores solares. Diante dos resultados apresentados o resíduo sólido de A. sisalana pode ser indicado como componente de formulações cosméticas fotoprotetoras e antioxidantes.Tese Eficácia não-clínica do gel contendo o extrato vegetal de Ipomoea pes-caprae na inibição da toxicidade local produzida pela peçonha da serpente Bothrops erythromelas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-06-27) Santos, Jacinthia Beatriz Xavier dos; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; Silva, Juliana Felix da; https://orcid.org/0000-0003-3131-9025; http://lattes.cnpq.br/7927574480239375; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; http://lattes.cnpq.br/6869944472436493; Martins, Alice Maria Costa; Damasceno, Bolivar Ponciano Goulart De Lima; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; https://orcid.org/0000-0003-0229-9416; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Barbosa, Raquel de MeloO ofidismo é um relevante problema de saúde pública, incluso pela Organização Mundial de Saúde na lista de Doenças Tropicais Negligenciadas. O gênero de maior relevância clínica é o Bothrops. Eventos como edema local, miotoxicidade, hemorragia e dermonecrose caracterizam os acidentes e podem levar a danos severos aos pacientes. A baixa eficácia da soroterapia antiveneno frente a estes eventos instiga a busca por terapias complementares. Plantas medicinais são utilizadas há anos na medicina tradicional em acidentes ofídicos. A espécie vegetal Ipomoea pes-caprae (Ipc), conhecida como “salsa-dapraia”, é usada na medicina tradicional no tratamento de inflamações, dores e picadas de serpentes. Dessa forma, este estudo focou no desenvolvimento e avaliação de um gel tópico contendo extrato da Ipc quanto ao seu potencial antiofídico. O extrato hidroetanólico de Ipc foi obtido por maceração. Através de Cromatografia em Camada Delgada e análise por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, identificou-se a presença majoritária de compostos fenólicos no extrato. Através do fracionamento do extrato por XAD-4, obteve-se a fração enriquecida (FrEtOH), concentrando os compostos fenólicos presentes no extrato de Ipc. O extrato Ipc e FrEtOH não apresentaram citotoxicidade in vitro significativa frente às células de macrófagos murinos (RAW 267.3) e de fibroblastos embrionários de camundongo (NIH/3T3). As atividades enzimáticas in vitro frente a toxinas da peçonha de Bothrops erythromelas (Ber) (fosfolipásica, proteolitica e hialuronidase) foram inibidas de maneira semelhante pelo extrato bruto e a fração de Ipc. O extrato e a FrEtOH nas concentrações de 5% e 1%, respectivamente, foram incorporados a um gel de Poloxamer e HPMC previamente desenvolvido pelo grupo de pesquisa. Após 180 dias do estudo da estabilidade, as formulações com o extrato apresentaram-se estáveis quanto às propriedades organolépticas e físico-químicas, assim como o teor de fenólicos variando menos de 10%, o que se encontra dentro das especificações de acordo com a legislação brasileira. As atividades in vivo frente os efeitos locais produzidos pela peçonha de Ber (edematogênica, hemorrágica e dermonecrose) foram reduzidas pelo tratamento com o gel Ipc, assim como foi visualizado um melhor efeito quando utilizou o gel Ipc associado ao soro antiofídico. O tratamento com o gel FrEtOH inibiu a atividade edematogênica. As inibições observadas foram promissoras, apresentando uma ação direta do extrato inibindo toxinas da peçonha quanto indireta através da inibição de mediadores endógenos envolvidos no envenenamento. Além disso, é possível propor a participação ativa na ação farmacológica dos compostos presentes no extrato, com destaque para os fenólicos que atuam fortemente como antiinflamatórios, antioxidantes e quelante de metais. Em conclusão, os resultados obtidos apontam o potencial antiofídico do extrato de Ipc, o que pode justificar seu uso medicinal em picadas de serpente, como também contribuir na sua utilização como matéria-prima no desenvolvimento de novos produtos fitoterápicos no mercado para o tratamento dos efeitos locais do envenenamento botrópico.Tese Resíduo agroindustrial de Agave sisalana como um inovador insumo cosmético antioxidante: avaliação in vitro e in vivo(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-12-20) Barreto, Stella Maria Andrade Gomes; Ferrari, Márcio; Giordani, Raquel Brandt; http://lattes.cnpq.br/5032750980466610; https://orcid.org/0000-0002-2425-7586; http://lattes.cnpq.br/5782539548696465; https://orcid.org/0000-0001-7830-626X; http://lattes.cnpq.br/2234955265649411; Lima, Adley Antonini Neves de; https://orcid.org/0000-0002-3798-3915; http://lattes.cnpq.br/4061809277935577; Damasceno, Gabriel Azevedo de Brito; Tavares, Josean Fechine; Isaac, Vera Lucia BorgesAgave sisalana (sisal) é uma planta extensamente cultivada na região nordeste com o intuito de se obter uma fibra dura utilizada para produção de fios e cordas. No entanto, apenas uma pequena porção do peso bruto das folhas do sisal é aproveitada, sendo o restante descartado como resíduo. Esse subproduto apresenta em sua constituição química metabólitos com potencial atividade antioxidante. Diante disto, o objetivo desse trabalho foi, a partir do resíduo de A. sisalana, obter e caracterizar uma fração hidroetanólica e outra purificada, avaliar o potencial antioxidante in vitro e in vivo e desenvolver uma nanoemulsão para veicularas frações para aplicação como um produto cosmético antioxidante. A partir do resíduo, foi obtida uma fração rica em polissacarídeos (FRE) e, a partir da FRE, outra fração foi por meio de diálise por ultrafiltração (FREP). A composição qualitativa foi avaliada por meio de cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Ambas as frações foram avaliadas quanto à sua atividade antioxidante in vitro, utilizando diferentes técnicas espectrofotométricas, meio de cultura e, ainda, in vivo, utilizando o modelo Caenorhabditis elegans. Além disso, um planejamento experimental fatorial (2³+3PC) foi delineado para se obter um sistema nanoemulsionado e sua estabilidade avaliada. FRE e FREP são constituídos majoritariamente por terpenóides e metabólitos Oglicosilados. FRE apresentou maior capacidade de inibir diretamente os radicais DPPH e ABTS, enquanto FREP demonstrou maior atividade quelante de metais (Cu2+ e Fe2+). As duas frações promoveram efeito protetor contra estresse oxidativo em células de linhagem 3T3. Em modelos C. elegans, FRE e FREP promoveram redução intracelular de EROs e aumentaram a fração de sobrevivência. A expressão de gst4:GFP foi positiva para FRE enquanto que, para FREP, uma redução na expressão foi observada. A nanoemulsão constituida de 20% de fase oleosa, 5% de tensoativos e 75% de fase aquosa foi considerada estável por 90 dias, em diferentes temperaturas. A utilização do resíduo do sisal como um novo insumo antioxidante para indústria cosmética pode trazer benefícios ambientais e contribuir com o desenvolvimento socioeconômico da região.Tese Predição de pontos de corte de índices antropométricos e distribuição de gordura corporal para predição de fatores de risco cardiometabólico e síndrome metabólica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-12-06) Sousa, Elys Costa de; Lemos, Telma Maria Araújo Moura; Costa, Roberto Fernandes da; https://orcid.org/0000-0002-8789-1744; http://lattes.cnpq.br/2091065807780957; https://orcid.org/0000-0002-4823-2367; http://lattes.cnpq.br/4919914818714189; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; https://orcid.org/0000-0003-0229-9416; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Borges, Michelle Vasconcelos de Oliveira; Medeiros, Radames Maciel Vitor; Medeiros, Rafaela Catherine da Silva Cunha deA morbimortalidade vem se tornando cada vez mais frequente causada principalmente pelas doenças crônicas não-transmissíveis. Ter uma ferramenta de triagem para auxiliar no diagnóstico da síndrome metabólica e risco cardiometabólico, que seja rápida, fácil aplicação e baixo custo, é uma necessidade para a realidade da saúde pública brasileira que não consegue proporcionar o acesso aos exames de rotina para toda a população. Assim, o objetivo do estudo foi propor pontos de corte para índices antropométricos a fim de identificar o risco cardiometabólico e síndrome metabólica, bem como comparar a sua capacidade preditiva. Trata-se um estudo descritivo com delineamento transversal. A amostra foi composta por 330 sujeitos, sendo 192 do sexo feminino e 138 do sexo masculino, estudantes universitários com idades entre 18 e 59 anos. Como critérios de inclusão, os participantes poderiam ou não apresentar algum critério válido para diagnóstico de síndrome metabólica, NCEP/ATP III. A body shape index, Body Roundess index, Circunferência da cintura e Razão cintura/ estatura (ABSI, BRI, CC, RCE). O percentual de gordura foi verificado por meio de DXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry), além de determinadas a partir da amostra sanguínea, as concentrações séricas de glicose de jejum, colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol e triglicerídeos. Também foi medida a pressão arterial. Como resultados, os pontos de corte dos índices antropométricos para o sexo feminino foram propostos: ABSI >0.073; BRI >1.81; CC >87.8 e RCE >0.52; além dos pontos de corte para a distribuição de gordura corporal: 49,5% para gordura total, para gordura ginoide 42,9% e para gordura androide 44,2%. Já para o sexo masculino foram propostos os seguintes resultados: ABSI >0.079; BRI >3.42; CC >90 e RCE >0.5 como pontos de corte de índices antropométricos; e 26,3% para gordura corporal total, para gordura ginoide 28,7% e gordura androide 34,5%. Com base na sensibilidade e especificidade dos dados, pudemos observar que a CC obteve resultados excelentes para ambos os sexos, podendo ser amplamente aplicada na população brasileira, além do BRI que obteve melhores resultados para o sexo feminino e o RCE para o sexo masculino, obtendo pontos de corte ótimos para triagem do risco cardiometabólico e da síndrome metabólica. Além disso, ficou evidenciado que o ABSI não possui um bom poder preditivo para os fatores de risco analisados. Quanto à adiposidade, a gordura androide apontou ser a melhor preditora de risco cardiometabólico e síndrome metabólica.Tese Avaliação de novas abordagens para controle e diagnóstico da leishmaniose visceral no Brasil(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-10-19) Queiroga, Tamyres Bernadete Dantas; Guedes, Paulo Marcos da Matta; Gama, Renata Antonaci; https://orcid.org/0000-0002-8026-6022; http://lattes.cnpq.br/0179756405650744; http://lattes.cnpq.br/5445410844075357; https://orcid.org/0000-0001-8538-6982; http://lattes.cnpq.br/7738632022656870; Brito, Carlos Ramon do Nascimento; Galvão, Joanna Gardel Valverde; Lima, Leomir Aires Silva de; Andrade Neto, Valter Ferreira de; Barros, Veruska CavalcantiA leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica grave em crescente expansão geográfica no Brasil, frente a tratamentos que não eliminam o parasito, medidas profiláticas ineficazes e métodos diagnósticos com baixa acurácia. Pensando nesta problemática, este trabalho objetivou avaliar i) a atividade inseticida sistêmica de dose oral única do composto fluralaner contra Lutzomyia longipalpis, bem como ii) avaliar o infravermelho médio como alternativa para detecção de Leishmania infantum em amostras de soro de cães. Para isso, cães sem raça definida foram recrutados e randomizados em dois grupos, tratados com fluralaner (n = 4) e controle não tratado (n = 4), e submetidos ao repasto sanguíneo com fêmeas de Lu. longipalpis antes do tratamento, no dia 1 pós-tratamento e, então mensalmente até completar um ano. Além disso, a espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier e reflexão total atenuada (ATR-FTIR) combinada com análise multivariada foi empregada para distinguir amostras de cães infectados com L. infantum (n = 29), em diferentes formas clínicas, de animais saudáveis não infectados (n = 30). Após a análise dos dados, observou-se 100% de mortalidade de Lu. longipalpis por até cinco meses após o início do tratamento. O composto fluralaner apresentou eficácia inseticida de 100% até 5 meses pós-tratamento dos cães, 68% em seis meses, com redução para 1,4% um ano pós-tratamento. O ATR-FTIR foi eficiente em diferenciar amostras de cães infectados e não infectados com 100% de sensibilidade e especificidade, utilizando o algoritmo de projeções sucessivas com análise de discriminante linear (SPA-LDA), SPA com máquina de vetores de suporte (SPA-SVM) e algoritmo genético com LDA (GA-LDA). Esses bons resultados sugerem que o composto fluralaner pode ser usado como possível estratégia de controle para LV em áreas endêmicas, bem como a espectroscopia associada a análise multivariada demonstra seu potencial como ferramenta alternativa para o diagnóstico de LV em cães.Tese Propriedades antioxidantes da coenzima Q10 e do zinco no estado nutricional de indivíduos com Síndrome de Down(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-05-12) Silva, Saulo Victor e; Thornton, Maria das Graças Almeida; https://orcid.org/0000-0002-5587-0922; http://lattes.cnpq.br/0321740024191482; https://orcid.org/0000-0003-0793-2647; http://lattes.cnpq.br/8278651522984535; Souza, Karla Simone Costa de; https://orcid.org/0000-0002-8541-1444; http://lattes.cnpq.br/2262063068881600; Silva, Marcelo de Sousa da; Neves, Juliana Padilha Ramos; Silva, Gabriel Araújo daA Síndrome de Down (SD) é conhecida pela trissomia do cromossomo 21, caracterizada pelas diversas alterações fisiológicas e metabólicas, dentre elas, a presença de estresse oxidativo, por consequência do desequilíbrio entre a quantidade de espécies reativas de oxigênio (ERO’s) e enzimas antioxidantes. Compostos com propriedades antioxidantes como a coenzima Q10 (CoQ10) e o zinco (Zn) podem reduzir os desequilíbrios celulares ocasionados pelo aumento de ERO’s. Com isso, o presente estudo objetivou avaliar o potencial antioxidante da CoQ10 combinada com o Zn in vitro e em indivíduos com SD. Inicialmente foi realizado um estudo in vitro que avaliou o potencial antioxidante da CoQ10, Zn e a combinação entre eles em um modelo de estresse oxidativo em células CHO-K1 induzidas por Arsênico (As). A determinação da viabilidade celular para cada tratamento foi feita pelos ensaios colorimétricos de cristal violeta, MTT e Alamar Blue®. A atividade antioxidante foi avaliada pelos ensaios de redução do radical DPPH, poder de redução férrico (FRAP), formação de hidroperóxido aquoso e determinação de ERO’s. Em paralelo, realizou-se um estudo clínico, duplo-cego e randomizado em crianças com SD de 2 a 9 anos para avaliar o efeito da suplementação de CoQ10 a 4 mg/kg/dia, Zn a 11 mg/dia e CoQ10+Zn (CoQ10 a 4 mg/kg/dia e Zn a 11 mg/dia). Foram avaliados os parâmetros bioquímicos como: controle glicêmico, o perfil lipídico e função renal, consumo alimentar, parâmetros antropométricos, peroxidação lipídica, potencial antioxidante pela atividade enzimática da superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx), e não-enzimática pela glutationa redutase (GSH), e o perfil sérico do Zn. No estudo in vitro os ensaios de viabilidade celular mostraram que tanto a CoQ10, quanto a sua combinação com Zn, apresentaram efeito citoprotetor independente das concentrações analisadas, ao contrário das células tratadas somente com Zn quando expostas a situações de estresse celular. A CoQ10 apresentou atividade antioxidante, independente da concentração utilizada, mas quando combinada com o Zn não apresentou nenhum aumento de sua atividade a nível celular. No entanto, o Zn em altas concentrações apresentou efeito pró-oxidante ocasionando dano celular. No estudo clínico, os indivíduos apresentaram concentração de Zn sérico abaixo da recomendação preconizada, com isso, a suplementação de Zn em combinação com a CoQ10 pôde agregar valor nutricional a atividade antioxidante da CoQ10, apresentando resultados satisfatórios a suplementação desses micronutrientes. Com isso, o estudo in vitro observou uma maior deficiência de Zn em crianças com SD e que a suplementação com CoQ10, quando combinada com o Zn, diferente do que foi observado do estudo in vitro demonstrou que a suplementação com a CoQ10, Zn e a combinação CoQ10+Zn possibilita o aumento da atividade antioxidante, além de reduzir a peroxidação lipídica e garantir a preservação das enzimas antioxidantes. Em relação ao estudo in vivo, observou uma maior deficiência de Zn em crianças com SD e a suplementação com CoQ10, quando combinada com o Zn. Com isso, o estudo conluiu que pode apresentar um aumento da atividade antioxidante, agregando valor nutricional ao potencial antioxidante da CoQ10, além de reduzir a peroxidação lipídica e garantir a preservação das enzimas antioxidantes.Tese Efeito do extrato de Eugenia uniflora sobre fatores de virulência e caracterização da ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-06-10) Souza, Luanda Bárbara Ferreira Canário de; Chaves, Guilherme Maranhão; http://lattes.cnpq.br/1463249528959656; http://lattes.cnpq.br/0567484662111463; Padovan, Ana Carolina Barbosa; http://lattes.cnpq.br/7106567615656883; Santos, Elizabeth Cristina Gomes dos; http://lattes.cnpq.br/6990029952181366; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Langassner, Silvana Maria Zucolotto; http://lattes.cnpq.br/7390416147619446A candidíase oral é uma importante manifestação clínica em receptores de transplante renal. Candida spp. possuem fatores de virulência que contribuem para o processo infeccioso, incluindo a capacidade de aderir a células epiteliais e de formar de biofilme em superfícies bióticas e abióticas. Devido ao limitado arsenal de antifúngicos disponíveis no mercado, as reações adversas e o surgimento de espécies resistentes, torna-se necessário encontrar novos antifúngicos que atuem em alvos alternativos, ou de forma sinérgica aos atuais antifúngicos e que possuam menor toxicidade. Nesse contexto, os produtos naturais têm ganhado importância. O extrato obtido a partir das folhas de Eugenia uniflora [acetona: água (7:3, v/v)] tem demonstrado atividade antifúngica contra Candida spp.. Portanto, este estudo objetivou avaliar o efeito do extrato de E. uniflora sobre fatores de virulência in vitro e caracterizar a ação antifúngica em isolados de Candida spp. oriundos da cavidade oral de receptores de transplante renal. O extrato de E. uniflora foi caracterizado por cromatografia líquida de alta eficiência e as cepas de Candida spp. pertencentes a um banco de microrganimos foram reativadas e utilizadas nas análises. A determinação da concentração inibitória mínima do extrato foi realizada pelo método de microdiluição em caldo, assim como ensaios de toxicidade frente a eritrócitos e células epiteliais bucais humanas (CEBH) foram realizados a partir da determinação do índice de hemólise e da contagem de 150 CEBH em microscópio óptico, respectivamente. Para os ensaios de virulência in vitro, as leveduras foram cultivadas na presença e ausência de 1000 µg/mL do extrato. A adesão foi quantificada usando o número de células de Candida spp. aderidas a 150 CEBH determinadas por microscópio óptico. A formação de biofilme foi avaliada usando duas metodologias: XTT (2,3-bis (2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil) -2H-tetrazólio-5-carboxanilida) e o ensaio do cristal violeta, sendo analisado posteriormente por microscopia eletrônica de varredura. A hidrofobicidade da superfície celular (HSC) foi quantificada com o teste de adesão microbiana a hidrocarbonetos. Realizaou-se análise in silico para predição de atividade antifúngica dos compostos majortitarios determinados no extrato. Determinou-se a CIM quando na presença de ergosterol exógeno, bem como em ambiente osmoprotegido por sorbitol (0,8 M). A ação do extrato na parede celular foi avaliada a partir do crescimento das células tratadas com extratdo de E. uniflora em Ágar Sabouraud Dextrose (ASD) acrescido de calcofluor, vermelho congo e dodecil sulfato de sódio (SDS). Avaliou-se a perda de integridade da membrana utilizandose a marcação com o iodeto de propídio (IP). A ação combinada do extrato de E. uniflora com o Fluconazol, a Micafungina e o Ácido gálico foi determinada pelo método checkerboard e por fim foi determinada a curva de morte de Candida spp. tratadas com o extrato de E. uniflora e em combinação em função do tempo. O extrato de E. uniflora foi capaz de inibir em 50% o crescimento das células de Candida spp. e possui dois compostos majoritários: miricitrina e ácido gálico. Além disso, mostrou-se não citotóxico aos eritrócitos e CEBH. Reduziu a adesão as CEBH e HSC para as espécies de Candida analisadas, e observou-se uma capacidade reduzida estatisticamente significativa para formar biofilmes usando os dois métodos de quantificação. A análise in silico demonstrou que não há alvos moleculares que correlacionem a miricitrina à ação antifúngica do extrato de E. uniflora, já o ácido gálico demonstrou ligação a enzima CPY51 presente na célula fúngica. O extrato aumentou discretamente as CIM quando realizado o ensaio de ligação ao ergosterol. Porém, no ensaio na presença do sorbitol, os valores de CIM para o extrato foram aumentados, sugerindo-se que um dos possíveis mecanismos de ação seja atuar na parede celular fúngica. O tratamento das células de Candida com o extrato conferiu resistência frente aos perturbadores de parede celular, e houve perda de integridade da membrana celular fúngica quando as células tratadas com o extrato foram coradas com IP. O extrato de E. uniflora apresentou ação sinérgica aditiva quando combinado com o Fluconazol e a Micafungina. Entretanto, a combinação com o ácido gálico apresentou um efeito indeterminado (sem interação). A curva de morte das células tratadas com o extrato demonstrou uma diminuição na contagem do número de UFC em 48 horas e a combinação do extrato de E. uniflora com o fluconazol resultou em uma queda significativa na contagem de UFC. O extrato de E. uniflora pode de alguma forma estar perturbando a membrana celular, tendo visto a perda de integridade da membrana verificada no ensaio com marcação com IP. Entretanto, aparentemente esse processo não se dá, exclusivamente, através da ligação direta ao ergosterol, ou somente pela inibição da enzima CYP51 (14 α-demetilase), ação atribuída ao ácido gálico nas análises in silico. O extrato interage em nível de parede celular fúngica, haja visto o aumento da CIM no ensaio com o sorbitol e a discreta diminuição de crescimento para algumas cepas no ensaio com os perturbadores de parede celular. O extrato de E. uniflora mostrou-se promissor como uma plausível alternativa de terapia combinada com o fluconazol para o tratamento de candidíase oral. Entretanto, mais análises devem ser realizadas para confirmação das evidências apresentadas pelos ensaios realizados quanto ao mecanismo de ação do extrato de E. uniflora.Tese Análise fitoquímica e avaliação da atividade antiescorpiônica e antiofídica do suco dos frutos de Hancornia speciosa Gomes (Apocynacea)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2019-08-30) Yamashita, Fabiana de Oliveira; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; Langassner, Silvana Maria Zucolotto; 81995725072; http://lattes.cnpq.br/7390416147619446; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; http://lattes.cnpq.br/1583697337809267; Queiroz, Giselle Pidde; Ferreira, Leandro de Santis; http://lattes.cnpq.br/6622861873027635; Ururahy, Marcela Abbott Galvão; http://lattes.cnpq.br/8016222352823817; Araújo, Nathalia Kelly de; http://lattes.cnpq.br/3502393944021960Acidentes com animais peçonhentos, principalmente serpentes e escorpiões, são considerados um sério problema de saúde pública. No Brasil, os acidentes ofídicos ocorrem principalmente por serpentes do gênero Bothrops, e os escorpiônicos pela espécie Tityus serrulatus. O tratamento convencional é o uso da soroterapia antipeçonha, que além de apresentar algumas limitações, como difícil acesso em algumas regiões e custo elevado, é capaz de neutralizar apenas as toxinas da peçonha, sendo ineficiente em inibir as reações inflamatórias endógenas. Dentro deste contexto, o estudo tem como objetivo realizar uma análise fitoquímica do suco dos frutos de Hancornia speciosa, bem como avaliar a capacidade do suco de neutralizar os efeitos inflamatórios da peçonha do escorpião Tityus serrulatus e os locais induzidos pela peçonha de Bothrops jararaca. A análise fitoquímica foi realizada através da técnica de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE-DAD-EM/EM). A atividade antiescorpiônica do suco foi avaliada utilizando-se do modelo animal de edema pulmonar agudo induzido pela peçonha do escorpião T serrulatus. Os animais receberam a peçonha por via subcutânea e foram tratados via oral com o suco nas doses de 100 e 200 mg/kg, utilizando-se de protocolos de pré e pós-tratamento. Após 2 horas da administração da peçonha, os animais foram eutanasiados para a coleta dos pulmões, rins e sangue. Com os tecidos dos pulmões tratados foram realizadas as seguintes análises: quantificação de citocinas, concentração de azul de Evans, dosagem da enzima mieloperoxidase (MPO) e porcentagem do peso relativo pulmonar; com os rins, dosagem de nitrito e peroxidação lipídica; e, com o sangue, avaliados parâmetros hematológicos e bioquímicos. Em relação a peçonha botrópica, a capacidade do suco em inibir seus efeitos locais foi avaliada nos modelos de edema de pata, hemorragia, miotoxicidade e dermonecrose. Para tanto, os animais receberam o suco por via oral nas doses de 100 e 200 mg/kg, sendo administrado logo após a peçonha botrópica (pós-tratamento). Através das análises por CLAE-DAD-EM/EM foram identificados 13 compostos, sendo os majoritários identificados como L-bornesitol, ácido quínico, ácido clorogênico e rutina. As observações referentes à inibição dos efeitos antiescorpiônicos demonstraram que o suco de Hancornia speciosa foi capaz de diminuir significativamente alguns importantes parâmetros como a produção das citocinas, a atividade mieloperoxidase, a concentração de azul de Evans no tecido pulmonar, a peroxidação lipídica e a dosagem de nitrito. Em relação aos efeitos botrópicos, o suco foi capaz de diminuir de forma significativa a lesão dermonecrótica, edema, hemorragia e as concentrações das enzimas creatina quinase e lactato desidrogenase. Portanto, é possível concluir que o suco de Hancornia speciosa Gomes apresenta potencial para ser utilizado como adjuvante no tratamento de envenenamentos escorpiônicos e botrópicos.Tese Avaliação da atividade quelante, antioxidante, anticoagulante, imunomoduladora e cicatrizante do peptídeo aniônico (TanP) da peçonha do escorpião Tityus stigmurus(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-06-30) Melo, Menilla Maria Alves de; Pedrosa, Matheus de Freitas Fernandes; http://lattes.cnpq.br/2929963416385218; http://lattes.cnpq.br/8674610000531012; Assis, Cristiane Fernandes de; http://lattes.cnpq.br/0034694007210837; Pontes, Daniel de Lima; http://lattes.cnpq.br/1903229358912987; Carvalho, Eneas de; http://lattes.cnpq.br/8416275144930466; Monteiro, Norberto de Kassio Vieira; http://lattes.cnpq.br/8804303821523487Peptídeos aniônicos, ou ácidos, de escorpiões correspondem a classe de peptídeos sem ligações dissulfeto, ricos em resíduos de ácido aspártico e/ou glutâmico em sua sequência primária. TanP é um peptídeo aniônico, linear, com 50 resíduos de aminoácidos e carga líquida -20, identificado na peçonha do escorpião Tityus stigmurus através de uma análise transcriptômica e com posterior confirmação por espectrometria de massas. Um estudo anterior indicou que TanP possui potencial quelante para o íon Cu2+, além de potencial imunomodulador. A aplicação terapêutica de moléculas quelantes está relacionada a casos de intoxicações agudas ou crônicas por metais, doenças neurodegenerativas, doenças hematológicas, cicatrização de feridas cutâneas, doenças cardiovasculares e câncer. Neste estudo foi realizada a avaliação da atividade quelante de TanP com relação a novos metais de importância biológica (Fe2+, Ca2+, Zn2+), através da espectroscopia UV-visível, métodos computacionais e espectroscopia de fluorescência, bem como ampliado a investigação do potencial biológico do peptídeo, como molécula antioxidante, hemostática, imunomoduladora e cicatrizante de feridas, através de ensaios in vitro. TanP (25 µM) foi capaz de formar complexos estáveis com Fe2+ numa proporção de 1:5 (TanP:Fe2+). As geometrias obtidas para os complexos Zn2+ e Fe2+ apresentaram formas tetraédricas e octaédricas, respectivamente. Resultados teóricos sugerem que TanP pode funcionar como um sensor para identificar e quantificar íons Fe2+ . A intensidade de fluorescência de TanP (1,12 µM) diminuiu significativamente após adição de Fe2+, obtendo-se que a maior relação 1:7,4 (TanP:Fe2+) levou à menor intensidade de fluorescência. TanP apresentou o máximo de 3% de atividade hemolítica quando avaliado na maior concentração (50 µM). TanP exibiu capacidade de sequestro dos radicais DPPH acima de 70% em todas as concentrações testadas (1 a 25 μM), 89,7% de atividade quelante de ferro em 25 μM e 96% de atividade de sequestro do radical hidroxila em 73,6 μM. TanP apresentou também atividade anticoagulante significativa nas concentrações de 12,5 µM e 25 µM para os ensaios de tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativado (TTPa). Nenhum efeito fibrinogenolítico foi observado. TanP (12,5 e 25 µM) induziu liberação de TNF-α por macrófagos murinos, na ausência de lipopolissacarídeo (LPS), sendo esse aumento dose-dependente. A migração de células 3T3 foi estimulada por TanP (2 µM, 12,5 µM e 50 µM) em ensaio de cicatrização in vitro. Dessa forma, sugere-se que a avaliação do potencial quelante associado a ação antioxidante, anticoagulante, imunomodulador e cicatrizante de TanP poderá fornecer subsídios para maiores estudos que viabilizem o desenvolvimento de uma molécula protótipo para aplicação terapêutica e biotecnológica.Tese Desenvolvimento de complexos de inclusão multicomponentes com ácido ferúlico e obtenção de membrana para avaliação da liberação em formulações semissólidas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020-10-30) Duarte, Fernanda Ílary Costa; Lima, Adley Antonini Neves de; Gomes, Ana Paula Barreto; ; http://lattes.cnpq.br/1689823596741892; ; http://lattes.cnpq.br/4061809277935577; ; http://lattes.cnpq.br/3035470083983748; Carvalho, André Luis Menezes; ; http://lattes.cnpq.br/6874869711888371; Converti, Attilio; ; http://lattes.cnpq.br/3423653074671287; Ferreira, Leandro de Santis; ; http://lattes.cnpq.br/6622861873027635; Marreto, Ricardo Neves; ; http://lattes.cnpq.br/6127043775208484O ácido ferúlico (AF) é um constituinte fitoquímico pertencente ao grupo dos polifenois encontrado principalmente no farelo de arroz e de milho, com destaque para sua atividade fotoprotetora e antioxidante. Assim, o AF vêm sendo amplamente estudado para aplicação em formulações fotoprotetoras e antienvelhecimento cutâneo. No desenvolvimento de formulações tópicas os ensaios de liberação in vitro apresentam-se como um ensaio rápido, de baixo custo e que possibilitam resultados preliminares. O uso do AF é limitado pela instabilidade da molécula frente à luz e/ou oxidação. Diante disto, sua estabilidade pode ser melhorada através da complexação com ciclodextrinas, dispersão em polímeros ou inclusão em ciclodextrinas seguido da associação de um polímero formando um sistema multicomponente. Assim, objetivou-se o desenvolvimento de sistemas multicomponentes com ciclodextrinas e polímeros hidrofílicos utilizando ácido ferúlico e a obtenção de um modelo de membrana que seja semelhante à composição da pele humana para ensaios de liberação in vitro. A membrana foi obtida pela impregnação de uma solução lipídica em membrana sintética e caracterizadas por Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Microscopia de Força Atômica (MFA) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Formulações gel e gelcreme contendo AF 0,5% (p/p) foram avaliadas quanto à estabilidade e liberação in vitro na membrana otimizada através da célula de difusão de Franz. No desenvolvimento dos complexos multicomponentes procedeu-se estudos de dinâmica molecular e solubilidade em fase aquosa. Após seleção da ciclodextrina e polímero para compor os sistemas, os mesmos foram obtidos pelos métodos de malaxagem e rotaevaporação, caracterizados por DSC e TG (termogravimetria), difração de raios-X (DR-X) e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Além disto, foram avaliados quanto à estabilidade oxidativa e atividade antioxidante. As técnicas utilizadas para a caracterização da membrana obtida, permitiram demonstrar a ocorrência de impregnação da solução lipídica. As formulações foram estáveis quando armazenadas a 4 ºC ± 2 °C. Os resultados da liberação in vitro utilizando a membrana otimizada sugerem que esta pode ser aplicada como uma membrana acessível e simples na liberação in vitro de substâncias ativas. Com relação ao desenvolvimento dos sistemas multicomponentes, através das técnicas de caracterização foi possível compreender as interações entre o AF, ciclodextrinas e polímeros. As técnicas de obtenção dos sistemas mostraram-se adequadas, com alto de teor de incorporação do ativo. Destacando-se o método de obtenção por malaxagem, que apresentou rendimento consideravelmente maior quando comparado ao método por rotaevaporação. As ciclodextrinas e os polímeros selecionados possuíram potencial para serem empregados em sistemas multicomponentes. Uma vez que aumentaram a estabilidade do AF frente a altas temperaturas, como também auxiliaram na transição do estado cristalino para amorfo do fármaco, devido à inserção do ativo dentro da cavidade e interação com o polímero. Para a estabilidade oxidativa verificou-se, que os componentes do sistema conferiram significativa estabilidade para o AF. Na atividade antioxidante, em geral, os complexos multicomponentes potencializaram a atividade do AF. Os resultados sugerem a formação de sistemas multicomponentes estáveis, viabilizando otimização do ativo. Fornecendo subsídios para incorporação destes sistemas em formulações semissólidas.