CB - TCC - Biomedicina

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Atividade antimalárica in vivo e aspectos toxicológicos do composto 3,4 dihidroxibenzaldeído
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-06-26) Tavares, Juliete; Pereira, Valeska Santana de Sena; Lobo, Lis Tavares Coelho; Araújo, Josélio Maria Galvão de; Gomes, Dayanne Lopes
A malária é uma doença infecciosa ocasionada pelo protozoário do gênero Plasmodim, sendo as principais espécies o P. vivax e o P. falciparum, responsáveis por cerca de 198 milhões de casos e causando milhão de mortes anualmente. A resistência do parasito aos antimaláricos usuais e as limitações existentes no combate ao vetor são implicações que contribuem para a expansão dessa parasitose. O objetivo desse estudo foi testar a atividade antimalárica e toxicidade in vivo, viabilidade celular em células Hep-G2, atividade hemolítica e atividade antioxidante do composto 3,4-Dihidroxibenzaldeído. A atividade antimalárica in vivo não foi satisfatória nas doses testadas, porém o composto não apresentou toxidade na dose máxima de 2000 mg/kg in vivo, nem atividade hemolítica in vitro. A viabilidade celular in vitro contra linhagem de células Hep-G2 apresentou a IC50 de 440,5 ± 50,8 μg/mL e a atividade antioxidante foi de 95,6%. Embora sejam dados preliminares, este composto é um candidato promissor para o desenvolvimento de novas drogas, sendo indicado a realização de estudos mais detalhados sobre sua atividade antimalárica
Modelo murino - Plasmodium berghei para estudos em malária experimental
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016) Pereira, Karen Mylenna Lustosa; Souza, Maria de Fátima; Uchoa, Adriana Ferreira
A malária é uma doença que apresenta um caráter infeccioso agudo, com picos febris, e possui como agente etiológico protozoários do gênero Plasmodium. Segundo dados da OMS, em 2015 ocorreram 214 milhões de casos em todo o mundo, que acarretaram 438.000 mortes. Dessas mortes, 90% ocorreram na África Subsaariana, e setenta e oito por cento dos óbitos são de crianças com menos de cinco anos de idade. O modelo animal passou a ser utilizado nos estudos de malária grave devido a dificuldades no acompanhamento de casos de malária cerebral humana, assim como a limitação no que concerne na analise dos processos patológicos. O Plasmodium berghei ANKA é utilizado em grande parte dos estudos que tratam da malária cerebral, buscando entender a cadeia complexa de interação parasito-hospedeiro, e as formas de contornar a gravidade gerada nas complicações da doença. O LABMAT trabalha com as cepas NK65 e ANKA do Plasmodium berghei, e as manutenções de infecção são feitas semanalmente utilizando camundongos Swiss. É observado por meio de esfregaços as formas parasitarias, assim como é determinado a parasitemia e a mortalidade dos animais infectados com as duas cepas. Esses animais podem vir a ser utilizados em posteriores estudos envolvendo a doença. Com esse entendimento, é possível chegar à produção de formas de combate ao parasito, seja por meio de desenvolvimento de fármacos eficazes no tratamento de indivíduos contaminados, seja no desenvolvimento de vacinas que podem, não somente gerar uma imunidade duradora, mas também interromper o ciclo biológico do parasito.
Perfil de expressão dos genes APEX1, OGG1 e PARP1 em células do sangue periférico de pessoas com a Síndrome de Berardinelli-Seip do Nordeste do Brasil
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016) Sarmento, Aquiles Sales Craveiro; Agnez-Lima, Lucymara Fassarella; Lima, Josivan Gomes de; Ferreira, Leonardo Capistrano
A síndrome de Berardinelli-Seip (BSCL) é uma lipodistrofia autossômica recessiva rara caracterizada pela ausência quase completa do tecido adiposo, resultando em distúrbios no metabolismo de carboidratos e lipídios, resistência à insulina e deficiências cognitivas variáveis. Já foi visto que o Nordeste do Brasil tem a maior prevalência da BSCL no Brasil. Recentemente, alguns estudos sugeriram um papel das espécies reativas de oxigénio (ROS) na fisiopatologia da síndrome. Além disso, disfunção mitocondrial que conduz a danos oxidados no DNA também tem sido uma hipótese associada com as mutações encontradas em pacientes com BSCL. Uma vez que o Reparo por Excisão de Bases (BER) está envolvido na remoção de lesões oxidadas no DNA, o objetivo desse estudo foi avaliar o perfil de expressão de mRNA de importantes enzimas da via BER (APE-1, OGG1 e PARP-1), em células de sangue periférico de portadores da BSCL, bem como analisar a taxa de purinas com lesões oxidadas nesses genomas. As evidências apontaram um aumento médio de 305% na expressão de APEX1 e 335% na de OGG1, bem como uma diminuição média de 65% na expressão de PARP1 nas células do sangue periférico dos portadores da BSCL em relação aos controles. Também observamos que a comparação entre purinas danificadas entre os dois grupos apresentou médias muito próximas, indicando que, talvez, a taxa de lesões oxidadas entre os controles e os portadores seja muito parecida. Esses resultados sugerem que APE-1 e OGG1 poderiam estar sendo recrutadas não só para o reparo, como também para outras vias nessas células de sangue periférico. A necessidade de uma maior transcrição para suprir uma demanda de reparo nos portadores poderia explicar a equivalência entre os danos de DNA entre os dois grupos. Além disso, a diminuição de expressão de PARP-1 é um fenômeno esperado em distúrbios de tecido adiposo, por causa da relação direta entre as funções dessa enzima e a diferenciação de adipócitos.
Análise histopatológica do efeito da olmesartana em modelo animal de mucosite intestinal induzida por metotrexato
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016) Borba, Pedro Brito; Araújo, Aurigena Antunes; Oliveira, Ana Luíza Cabral de Sá Leitão
O metotrexato (MTX) é um composto análogo do ácido fólico e é comumente utilizado no tratamento de artrite reumatoide e psoríase, além de leucemias e de outros tumores malignos. Apesar de apresentar alta eficiência seus efeitos adversos acabam limitando seu uso, dentre esses efeitos destacam-se a supressão da medula óssea e a mucosite intestinal, que é uma das maiores causas de morbidade em adultos e crianças. A olmesartana (OLM), um antgonista do receptor da angiotensina II, utilizado no tratamento da hipertensão, vem sendo estudado por apresentar propriedades reguladoras do processo inflamatório. O objetivo do nosso estudo foi avaliar a atividade da olmesartana em um modelo animal de mucosite intestinal induzida por MTX. Os animais foram submetidos ao estresse através da administração oral de OLM (0,5, 1.0 e 5.0 mg/kg), e após 30 minutos da aplicação intraperitoneal (i.p) de MTX na dose de 7 mg/kg por 3 dias consecutivos. Em seguida amostras do intestino delgado do duodeno, jejuno e íleo foram retiradas para análises histopatológicas de parâmetros inflamatórios por Hematoxilina e eosina, assim como, por imunohistoquímica dos marcadores metaloproteinases (2 e 9), cicloxigenase 2 (COX-2), Rank, Rank-L e SOCS-1 . Em todos os grupos analisados foram observados uma redução no processo inflamatório, sendo o melhor resultado visto na região jejunal no grupo MTX-OLM 5 (p<0.001), além disso, nesse grupo foi observado uma redução nos marcadores pró inflamatórios MMP-2, MMP-9, COX-2, RANK e RANKL (p<0,05) como também um aumento de SOCS-1 (p<0,05) em comparação ao grupo MTX.
Atividade dos constituintes da saliva de flebotomíneos na infecção por Leishmania e sua possível utilização no controle da Leishmaniose: uma revisão
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016) Oliveira, Cibele Beatriz da Silva; Nascimento, Manuela Sales Lima; Queiroga, Tamyres Bernadete Dantas
As leishmanioses constituem um grupo de doenças tropicais negligenciadas constituindo um grande problema de saúde pública, sendo causadas por parasitos do gênero Leishmania e transmitidas aos seres humanos e outros hospedeiros vertebrados por meio da picada de flebotomíneos infectados. Os componentes salivares dos flebotomíneos possuem atividades antihemostáticas, anti-inflamatórias e imunomoduladoras importantes para o sucesso da alimentação do inseto e que favorecem a sobrevivência do parasito. A saliva dos flebotomíneos é capaz de estimular tanto a imunidade mediada por células como também a imunidade humoral dos hospedeiros. A resposta imune contra os componentes salivares dificulta o estabelecimento dos parasitos, contribuindo como fator protetor contra o desenvolvimento da doença. Uma vez que a maior parte dos componentes salivares desses insetos são proteínas, a produção de anticorpos anti-saliva constitui um dos eventos importantes para a neutralização dos efeitos imunomoduladores, sendo um dos fatores implicados na proteção contra o estabelecimento do parasito. Além disso, anticorpos podem ser detectados no soro de humanos e outros reservatórios em campo constituindo uma ferramenta para estimar a exposição ao inseto vetor, servindo como biomarcador para demarcar as áreas de risco para a leishmaniose, além de identificar os reservatórios presentes nessas regiões. A mensuração dos níveis de anticorpos contra a saliva do vetor também tem sido utilizada na avaliação de estratégias de controle como, por exemplo, o uso de coleiras e mosquiteiros impregnados com inseticida. A capacidade apresentada por determinados componentes salivares em estimular o desenvolvimento de resposta do tipo Th1, hipersensibilidade do tipo tardia e a produção de anticorpos, tem tornada atrativa a possibilidade de desenvolvimento de vacinas baseadas em antígenos salivares. Atualmente não existe um medicamento que gere cura parasitológica em pacientes infectados e medidas profiláticas alternativas têm sido perscrutadas. Nesse contexto, a pesquisa de componentes da saliva dos insetos vetores de Leishmania, os flebotomíneos, tem gerado resultados promissores.
Perfil fenotípico de virulência e resistência à sulfadiazina da cepa atípica Ck1, de Toxoplasma gondii, isoladas no RN: estudo do comportamento cognitivo em roedores
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-06-16) Andrade, Joelma Maria de Araújo; Meurer, Ywlliane da Silva Rodrigues; Meurer, Ywlliane da Silva Rodrigues; Nascimento, Manuela Sales Lima; Brandão, Luiz Eduardo Mateus
O Toxoplasma gondii (T. gondii) é um protozoário neurotrópico causador da toxoplasmose, uma doença de alta prevalência mundial. O T. gondii, espécie única do Gênero, pode ocorrer como uma linhagem clonal no Hemisfério Norte, entretanto, no Hemisfério Sul apresenta-se com características genéticas atípicas e pode gerar sintomas mais graves em seus hospedeiros, sendo, portanto, necessários estudos sobre essas linhagens atípicas. Neste sentido, este trabalho buscou determinar o perfil fenotípico, in vivo, do TgCkBrRN1 (Ck1), um isolado de campo obtido a partir de galinhas de uma fazenda, na cidade de João Câmara, no Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. O isolado Ck1 foi comparado às cepas clonais ME49 (Tipo II) e VEG (Tipo III) e a um controle negativo (não infectado). Para tal foram inoculados 5 cistos/200µL/animal em camundongos Swiss-Webster albinos, os quais foram separados em grupos que receberam tratamento com sulfadiazina por 6 dias (T) e grupos que não receberam tratamento (NT). Com os grupos T foi determinado o perfil de resistência à sulfadiazina e a carga parasitária cerebral nestes camundongos. Com os animais dos grupos NT determinamos a quantificação dos cistos, o perfil de virulência e utilizando o aparato Esquiva Discriminativa em Labirinto em Cruz Elevado Modificado realizamos avaliação concomitante do comportamento tipo-ansioso e mnemônico dos animais. Os resultados evidenciam que apesar da similaridade na quantidade de cistos, em relação as cepas clonais, o isolado Ck1 não causou mortalidade e proporcionou baixa morbidade em camundongos, bem como foi susceptível à sulfadiazina. Os animais infectados com o isolado Ck1 e NT apresentaram aprendizado, evocação e extinção de memória aversiva similares ao grupo controle negativo, sendo superior a este quando avaliamos o tempo de permanência e número de entradas no braço aversivo. Esses animais ainda se mostraram menos ansiosos que os demais, possivelmente devido a não ocorrência de modulação pelo parasito. Assim, é possível propor que o isolado Ck1 apresenta baixa virulência e que este isolado não promove alterações comportamentais quando comparados às cepas clonais ME49 e VEG.
Análise da expressão do marcador CD5 na leucemia linfocítica crônica de células B (LLC-B)
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-10-07) Araujo, Helena Varela de; Fonseca, Henrique Eduardo Macedo; Freire Neto, Francisco Paulo
A leucemia linfocítica crônica de células B (LLC-B) é caracterizada pela proliferação anormal de linfócitos B maduros, funcionalmente incompetentes, que podem ser observados no sangue periférico e/ou na medula óssea. Com o curso clínico indolente, esta doença afeta adultos de idade avançada, acima de 50 anos, sendo estatisticamente mais prevalente em indivíduos do sexo masculino. Tem-se como principal meio de diagnóstico desta doença a imunofenotipagem por citometria de fluxo que possibilita revelar a expressão dos marcadores CD19, CD23 e CD5 nestes linfócitos neoplásicos. O CD5 está mais relacionado a linfócitos T, porém na LLC-B, observa-se expressão aberrante de linfócitos B com esse marcador. O objetivo deste estudo é avaliar, por citometria de fluxo, a expressão do marcador CD5 em 30 pacientes diagnosticados com LLC-B no laboratório de hematologia Hemato-Oncologistas Associados LTDA. Além disso, objetivou-se observar outros padrões hematológicos destes pacientes, utilizando valores de hemograma e citomorfologia. No presente estudo, dos de 30 pacientes, 19 eram do sexo feminino e 11, do masculino, diagnosticados com LLC-B durante março de 2011 e maio de 2016. Os dados hematológicos foram obtidos a partir de analisador hematológico e os aspectos citomorfológicos dos pacientes diagnosticados a partir de agosto de 2015, foram observados por meio de microscopia de distensão de material biológico corado com corante Leishman. Os resultados de imunofenotipagem obtidos por meio do citometro de fluxo BD® FACScan, foram analisados no software CellQuest® de modo a gerar gráficos e porcentagens de reatividade dos marcadores utilizados. Como resultado, observou-se por meio de hemograma leucocitose acentuada e linfocitose. Todos os pacientes tiveram marcação positiva para o CD5, com positividade variando entre 42% e 98%. Este marcador é de imensa importância no diagnóstico de pacientes com LLC-B, por ser capaz de descartar outras neoplasias de linfócitos B.
Reprogramação de astrócitos corticais em neurônios utilizando coquetel de pequenas moléculas
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-02) Farias, Ana Raquel Melo de; Costa, Marcos Romualdo; Velho, Tarciso André Ferreira; Golbert, Daiane Cristina Ferreira
Recentemente, diversas técnicas têm sido descritas visando à geração de neurônios que podem ser usados em terapias celulares objetivando o tratamento de doenças neurodegenerativas ou lesões agudas no sistema nervoso central. Uma dessas técnicas inclui a reprogramação de células já diferenciadas em neurônios, de forma direta ou indireta. Entretanto, a maioria dos protocolos de reprogramação celular depende da expressão de genes ectópicos, o que pode ocasionar outras alterações transitórias não esperadas nas células reprogramadas. A fim de contornar esses efeitos colaterais, investigou-se neste trabalho a possibilidade de reprogramação de astrócitos corticais de camundongos pós-natais em neurônios, através da exposição transitória das células a um coquetel de pequenas moléculas adicionado ao meio de cultivo celular. O referido coquetel inclui moléculas que atuam em diferentes vias celulares, dentre as quais a regulação da expressão gênica, modulação da neurogênese e controle do ciclo celular, tendo sido previamente utilizado na reprogramação de fibroblastos em neurônios. Para demonstrar o fenótipo neuronal após o tratamento dos astrócitos cultivados na presença das pequenas moléculas, foi avaliada a expressão de proteínas tipicamente neuronais, a morfologia celular e a expressão gênica, através dos métodos de imunocitoquímica e RT-qPCR. A partir dos dados preliminares observou-se que os astrócitos tratados adquirem morfologia e expressão gênica compatíveis com um fenótipo neuronal, indicando que o coquetel de pequenas moléculas pode ser utilizado na reprogramação de astrócitos em neurônios induzidos.
Efeito crônico da varfarina na biodistibuição do 99mTc-DTPA em ratos Wistar
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-11) Brandão, Luciana Ribeiro Marinho.; Gavioli, Elaine Cristina; Barbosa, Vanessa Santos de Arruda
Terapia com anticoagulantes orais como a varfarina é realizada na profilaxia de trombose e embolia em inúmeras desordens vasculares que afetam, em sua maioria, indivíduos com idade mais avançada. Ela atua inibindo a formação dos fatores de coagulação II, VII, IX e X, sendo, portanto, uma antagonista da vitamina K. Por sua vez, fármacos marcados com isótopos radioativos são muito utilizados na medicina nuclear para fins diagnósticos. A exemplo disso, tem-se o tecnécio-99m, que é o radioisótopo muito utilizado nas cintilografias humanas para diagnóstico de várias doenças e disfunções orgânicas. Ele apresenta características físicas ideais para a utilização em medicina nuclear diagnóstica, tais como: é mono-emissor gama de baixa energia (140keV), possui tempo de meia vida relativamente curto (6,02 h) e não emite radiação particulada (α ou β-). O presente estudo objetivou avaliar se o anticoagulante oral varfarina, administrado cronicamente por 10 dias consecutivos, altera a biodistribuição normal do radiofármaco ácido dietileno triamino pentacético marcado com tecnécio 99m (99mTc-DTPA) em rins, bexiga e sangue de ratos Wistar. Para tanto, utilizou-se 12 ratos Wistar com idade de 3 meses e massa corpórea ± 300 g, divididos em grupo controle (n=6) e grupo tratado (n=6). O grupo controle recebeu 0,25mL de água filtrada e o grupo tratado recebeu 0,25mL de varfarina (0,30mg/kg), ambos por gavagem e durante 10 dias. Ao 10º dia foi administrado 0,1mL de 99mTc-DTPA (0,66MBq de radioatividade), via veia caudal, 1 hora após o tratamento dos 2 grupos. Após 1 h, foi aplicada a anestesia e realizado eutanásia dos ratos com sucessiva retirada dos rins, bexiga e amostra de sangue. Essas amostras foram levadas ao contador de radiação gama para determinar o percentual de atividade total injetada por grama de tecido (%ATI/g). Observou-se um aumento estatisticamente significativo do %ATI/g nos rins, respectivamente do tratado em relação ao controle (1,732±0,145 e 0,802±0,170), e uma diminuição na bexiga (0,646±0,131 e 2,786±0,481) e no sangue (0,050±0,009 e 1,226±0,105) do tratado em relação ao controle, respectivamente. Diante dos resultados obtidos, infere-se que a varfarina alterou a biodistribuição normal do 99mTc-DTPA, provavelmente devido aos seus efeitos biológicos e/ou metabólicos.
Efeitos da administração aguda e crônica de agomelatina sobre comportamentos relacionados à ansiedade e ao pânico em ratas submetidas ao labirinto em T elevado
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-23) Gomes, Ana Clara da Costa Nunes; Rossato, Janine Inez; Bortolin, Raul Hernandes
A agomelatina é utilizada para o tratamento de depressão e tem mostrado eficácia em aliviar os sintomas de ansiedade. O labirinto em T elevado (LTE) se baseia na aversão inata que roedores apresentam a espaços abertos e altos, permitindo a observação das respostas de esquiva inibitória e de fuga de um mesmo animal. Tais respostas vem sendo associadas, respectivamente, a ansiedade generalizada e ao pânico. O objetivo do presente estudo foi avaliar se a administração de agomelatina altera as respostas relacionadas à ansiedade e ao pânico em ratas. Foram realizados experimentos de forma aguda, nas doses de 25, 50 e 75 mg/Kg/2mL, e de forma crônica na dose de 50 mg/Kg/2mL durante 25 dias. Neste último grupo houve, também, a avaliação da histologia hepática. Para avaliação da atividade locomotora das ratas, utilizou-se o teste de campo aberto. Os resultados demonstram que, tanto a administração aguda de agomelatina quanto a administração crônica, em fêmeas, não altera significativamente a locomoção das ratas. Em relação à resposta de esquiva inibitória, foi visto que não houve alteração desta resposta para ambas as administrações, incluindo a análise das ratas em proestro/estro. Houve efeito das tentativas, sugerindo aquisição da esquiva inibitória em todos os casos. A administração aguda de agomelatina na dose de 25 mg/Kg favoreceu uma redução na latência para a fuga, o que não foi evidenciado para as demais doses, nem após tratamento crônico com a dose de 50 mg/Kg. Em relação à histologia hepática após a administração crônica de agomelatina, não foram observadas alterações quando comparado ao grupo controle. Os dados aqui obtidos sugerem efeito panicogênico após administração aguda e ausência de efeito comportamental, bem como de hepatotoxicidade após administração crônica em fêmeas.
Soroepidemiologia e fatores de risco associados a prevalência de Toxoplasmose em pacientes da Maternidade Escola Januário Cicco
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-28) Oliveira, Dayana Carla de; Holanda, Cecília Maria de Carvalho Xavier; Rachetti, Vanessa de Paula Soares
A Toxoplasmose, zoonose de ampla distribuição geográfica mundial causada pelo parasita intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, quando adquirida pela primeira vez durante a gestação, pode ser transmitida ao concepto por via transplacentária, causando manifestações clínicas no feto de gravidade variada ou resultar, até mesmo, em casos de aborto. A presença de anticorpos IgG anti-T. gondii caracteriza desenvolvimento de memória imunológica pelo hospedeiro e portanto, de infecção prévia pelo parasita. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi determinar a frequência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, bem como identificar fatores de risco associados a ocorrência de Toxoplasmose em gestantes atendidas na Maternidade Escola Januário Cicco, localizada no município de Natal, Estado do Rio Grande do Norte, Nordeste do Brasil. Para tanto, foram colhidas amostras de sangue de 158 pacientes gestantes entre o período de julho de 2015 a agosto de 2016. Para o diagnóstico sorológico das infecções, foi utilizado ELISA convencional e teste de avidez para anticorpos IgG afim de se saber o tempo da infecção pelo parasita, além da aplicação de questionário socioepidemiológico contendo informações sobre possíveis fatores de risco associados a ocorrência de Toxoplasmose na população estudada.
Métodos de amplificação isotérmica e algumas aplicações
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-29) Zatti, Matheus da Silva; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; Moreira, Susana Margarida Gomes
A criação da técnica de PCR foi um marco para a ciência, impulsionando o crescimento tecnológico e abrindo novas possibilidades na área de diagnóstico de doenças humanas, sobretudo doenças de caráter infeccioso. Mas o advento dessa nova tecnologia deixava restrito o seu uso, quase que exclusivamente, aos laboratórios de pesquisa e centros especializados em biologia molecular, devido à sua dependência de aparelhos onerosos e específicos e à complexidade dos procedimentos realizados. Conforme o conhecimento em biologia molecular avançou e novas tecnologias foram surgindo, as limitações atreladas à técnica de PCR também foram alvos de incrementos. Dessa forma, desde a década de 1990, poucos anos após a criação da técnica de PCR, novas abordagens foram criadas, permitindo que a reação fosse realizada em condições isotérmicas e com menor necessidade de aparelhos específicos.Desde a década de 1990, diversas técnicas de amplificação isotérmica foram criadas e aplicadas no contexto do diagnóstico de doenças infecciosas, dentre elas: NASBA™ (Nucleic Acid Sequence-Based Amplification), 3SR (Self-Sustained Sequence Replication), SDA (Strand Displacement Amplification), RCA (Rolling Circle Amplification), HDA (HelicaseDependent Amplification), CPA (Cross Priming Amplification), PSR (Polymerase Spiral Reaction) e LAMP (Loop-Mediated Isothermal Amplification). Estas técnicas representam uma gama de alternativas e novos conceitos de amplificação de ácidos nucleicos. Nesta revisão daremos um destaque especial para a LAMP, uma técnica altamente sensível e específica, cujos esforços destinados ao seu aperfeiçoamento estão criando novos métodos de revelação da reação e novas tecnologias para tornar a técnica cada vez mais simples, eficiente e menos onerosa.
Perspectivas do uso de peptídeos quiméricos na prospecção de vacinas e como potencial marcador sorológico de diagnóstico para a toxoplasmose
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-11-29) Santos, Wilo Victor dos; Salha, Daniella Regina Arantes Martins Salha; Theodoro, Raquel Cordeiro; Aguiar , Carolina de Oliveira Mendes
Toxoplasmose é uma zoonose causada por Toxoplasma gondii, um parasita intrace-lular capaz de infectar animais de sangue quente, incluindo o homem. A transmis-são da doença ocorre principalmente pela ingestão de carnes cruas e mal cozidas com a forma infectante do parasita. A doença apresenta um amplo espectro clínico que pode variar desde formas oculares, apresentando visão turva a cegueira, até formas cerebrais, com quadros convulsivos. Formas clínicas estas bem caracteriza-dos em indivíduos imunocomprometidos e congênitos. A progressão da doença pa-rece estar associada tanto a fatores imunológicos do hospedeiro quanto a variabili-dade genética da cepa do parasita. O diagnóstico baseia-se na sorologia com a busca de títulos de anticorpos específicos contra o parasita. Muito embora este seja o método padrão, o diagnóstico ainda pode ser otimizado, pois há empecilhos atri-buídos ao uso do lisado de Toxoplasma gondii. O Tratamento da doença depende não somente da manifestação clínica do paciente, como também do uso de quimio-terápicos, os quais casos de reações adversas já têm sido descritos na literatura. Atualmente não existe uma vacina segura e eficaz contra a toxoplasmose humana. Os antígenos recombinantes mostraram ser uma ferramenta promissora na escolha e seleção de antígenos de T. gondii para aprimoramento do diagnóstico e imunote-rapia. Ainda, a predição de epítopos antigêncos e construção de quimeras com múl-tiplos epítopos, parece ser mais eficaz porque pode proporcionar um melhor reco-nhecimento de células imunes e induzir a proliferação seletiva de linfócitos do tipo B e T. Estas ferramentas aparecem como opção para minimizar danos e impactos econômicos causados pela Toxoplasmose.
Proteoma comparativo entre células-tronco mesenquimais humanas com cariótipo normal e invertido
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12) Santos, John Lenon de Souza; Medeiros, Silvia Regina Batistuzzo de; Santos, Jonathas Diego Lima; Silva, Leorik Pereira da
s Células-tronco mesenquimais humanas (CTMH) têm sido alvo de estudos na área da medicina regenerativa devido à duas características principais, sua capacidade de autorrenovação e de diferenciação em outros tipos celulares mediante fatores de crescimento específicos. O cordão umbilical humano tem sido uma fonte interessante de obtenção deste tipo celular por ser um tecido descartável e de fácil acesso, todavia, análises citogenéticas realizadas por nosso grupo de pesquisa revelaram que um dos cordões analisados possuem uma alteração cromossômica constitutiva. O presente trabalho teve como objetivo geral analisar o pe rfil proteico de expressão de CTMH com diferentes cariótipos. Os dados brutos oriundos da espectrometria de massas previamente realizada foram extraídos utilizando software Scaffold, com ele foi possível descobrir a quantidade de proteínas presentes nas células com os cariótipos distintos, além da expressão comparativa de proteínas entre as células. Além disso, foram utilizadas ferramentas de bioinformática para se descobrir os processos biológicos e as funções moleculares relacionados a essas proteínas, além da construção da rede de interação proteína-proteína para se descobrir as proteínas principais de grupos de proteínas distintos. Foi possível constatar que as células que possuem a inversão sofreram alterações que levaram a produção de proteínas relacionadas ao estresse celular, além disso, há possibilidade dessas células se transformarem em células cancerígenas. Essas análises corroboram para a importância de se realizar estudos relacionados a instabilidade genética de CTMH, tendo como parâmetro o perfil proteico de expressão dessas células.
Células-tronco mesenquimais humanas e reparo de DNA: Uma análise in silico de dados de microarray
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12) Silva, Elielson Veloso da; Silbiger, Vivian Nogueira; Leal, Angélica Maria de Sousa
Células-tronco mesenquimais, do inglês Mesenchymal Stem cells (hMSC) são células multipotentes de origem estromal. Essas células têm sido amplamente utilizadas no campo da medicina regenerativa devido a sua capacidade de diferenciação tecidual, plasticidade funcional, bem como possibilidade de expansão in vitro. Os efeitos da senescência na estabilidade genética têm sido discutidos ao longo dos anos, de modo que um estudo anterior observou que a senescência em células-tronco mesenquimais está associada com anormalidades cromossômicas, o que pode levar ao surgimento de doenças relacionadas à idade, tais como câncer e Alzheimer, já que, por exemplo, a instabilidade genética pode ser responsável pela aquisição de características tumorigênicas tanto in vitro como in vivo. Nesse estudo, a expressão de vias de reparo de DNA em células-tronco mesenquimais humanas extraídas do cordão umbilical e que apresentam uma inversão cromossômica paracêntrica constitucional (CTMs/inv) foi comparada à expressão em células-tronco com cariótipo normal (CTMs/norm) quando jovens (Passagem 9) e senescentes (Passagem 18). Os dados de microarranjo desses grupos celulares foram analisados in silico através de duas ferramentas de bioinformática, Gene Set Enrichiment Analysis (GSEA) e Gene Prioritization (Endeavour). Os resultados mostraram que, quando comparadas com as células jovens, ambos os grupos de células senescentes apresentaram vias de reparo de DNA menos expressas. Já ao analisarmos os dois grupos de células jovens, não foi observada expressão diferencial de vias de reparo de DNA, enquanto que CTMs/inv possuem vias de reparo de DNA menos expressas em comparação com as células normais senescentes. Esses resultados sugerem que a senescência afeta a capacidade que as células tronco possuem de reparar danos no DNA, dada a inibição de diversas vias de reparo, principalmente em CTMs/inv, que apresentam instabilidade genética acentuada.
Comparação entre amostras selvagem e BRCA-associadas em câncer de ovário
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12-01) Coêlho, Ana Carolina Miranda Fernandes; Souza, Jorge Estefano Santana de; Kroll, José Eduardo
O câncer de ovário representa a principal causa de morte dentre as neoplasias malignas ginecológicas. Apesar da evolução das técnicas cirúrgicas e dos regimes quimioterápicos, a taxa de sobrevida das pacientes com câncer de ovário continua baixa devido ao diagnóstico tardio. Mutações nos genes BRCA constituem o fator de risco mais significativo para o desenvolvimento dessa doença. Usando dados do TCGA, para esta neoplasia específica, juntamente com o método do S-score, foram identificados genes previamente conhecidos e de outros potencias genes envolvidos no processo de carcinogênese. Além disso, propôs-se assinaturas gênicas, compostas por três genes, associadas à uma sobrevida mais curta em pacientes com câncer de ovário. Portanto, os dados apresentados nesse estudo poderão auxiliar o desenvolvimento de ferramentas diagnósticas e terapêuticas mais eficientes, baseadas nas características moleculares do tumor, possibilitando uma redução na taxa de mortalidade associada ao câncer de ovário.
Esporotricose humana no Brasil: casos recentes de uma zoonose epidêmica emergente
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12-05) Lopes, Kallyelton Fernandes; Theodoro, Raquel Cordeiro; Meissner, Rosely de Vasconcellos
A esporotricose é uma doença zoonótica causada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckii. Essa infecção é uma micose cutânea ou subcutânea, de evolução subaguda ou crônica. Esse fungo vive no solo em associação com restos vegetais e acomete diversas espécies de animais. O presente estudo objetivou contribuir para o conhecimento sobre a esporotricose de acordo com a literatura, por meio de sua distribuição em várias regiões brasileiras enfatizando principalmente onde houve grandes surtos desta doença. Portanto, foram feitos levantamentos bibliográficos através de consultas eletrônicas a Bancos de Dados Virtuais (SciELO, PubMed, Capes e LILACS) e foram selecionadas diversas publicações entre vários períodos visando trabalhos recentes de casos zoonóticos emergentes no Brasil. O conhecimento desta micose humana nos aspectos clínicos, epidemiológicos, laboratoriais e terapêuticos é de suma importância para a área médica, pois demonstra uma análise mais detalhada de como a doença se comporta.
Análises in silico do polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) da versão atualizada do MIR137HG que caracteriza a homozigose (T/T) em pacientes esquizofrênicos
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12-05) Campanelli, Stephany Esmaile; Sequerra, Eduardo Bouth; Oliveira, Jonas Ivan Nobre
Os microRNAs são RNAs não-codantes de versátil regulação epigenética, transcricional e traducional. Muitos estão envolvidos, seja por superexpressão ou repressão, em etapas cruciais da diferenciação celular, cânceres, transtornos metabólicos e psiquiátricos. Um microRNA chamado miR-137 vem se destacando por ter sua expressão majoritariamente reprimida em diversos cânceres, por estimular a diferenciação celular de células- tronco neurais em cérebro adulto e por ter uma variante com SNP (single nucleotide polymorphism) na sua região genômica MIR137HG diretamente associada ao agravamento dos sintomas da esquizofrenia quando em homozigose (T/T) e à redução da expressão do gene miR-137. Entretanto, dados in silico dessa região atualmente se encontram escassos e praticamente não há evidências e hipóteses acerca de alterações das características moleculares dessa porção do DNA com e sem SNP. Com base em predições in silico da região do gene humano MIR137HG, os resultados obtidos indicam que a presença de um fator de transcrição, PBX1, somente ocorrente na sequência com SNP, possivelmente se associa com a repressão na expressão do gene miR-137 nos casos graves de esquizofrenia por homozigose T/T.
Aspectos clínicos e epidemiológicos da febre de chikungunya no Estado do Rio Grande do Norte
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12-06) Nascimento, Yasmin Mesquita; Galvão, Josélio Maria de Araújo; Bezerra, Fabiana Lima; Nascimento, Eliana Lúcia Tomaz do
A febre de chikungunya é uma doença emergente nas américas causada pelo vírus Chikungunya (CHIKV). No Brasil, somente no ano de 2016, foram notificados 216.102 casos prováveis da febre de Chikungunya, sendo 25.542 casos ocorridos somente no Estado do Rio Grande do Norte. O objetivo deste trabalho foi analisar a epidemia de febre de Chikungunya ocorrida no Estado do Rio Grande do Norte em 2016 e descrever os aspectos clínicos e epidemiológicos observados durante a epidemia. Para realização deste estudo, foram analisadas amostras de sangue total, soro, plasma e líquidos derivados de lesões provenientes de pacientes atendidos em diferentes Centros de Saúde e Hospitais da Rede Pública do Estado. Os dados foram avaliados a partir do preenchimento das fichas de notificação compulsória enviadas juntamente com as amostras biológicas. Todas as amostras recebidas foram testadas para os vírus Zika e CHIKV por meio do qRT-PCR e para os vírus Dengue por meio do RT-PCR. Foram analisadas 296 amostras de janeiro a setembro, das quais foram confirmados 128 casos positivos para CHIKV. Dentre os 25 municípios que enviaram amostras para análise, 14 apresentaram a circulação do CHIKV. Foi possível observar a apresentação de sintomas típicos e atípicos da doença, além de manifestações em grávidas e recém-nascidos. As principais manifestações clínicas observadas foram a febre, dores articular e muscular, cefaleia, exantema, dor nas costas e fotofobia. No momento ainda não existem estudos publicados sobre a circulação do CHIKV no Estado, nem mesmo sobre as manifestações clínicas causadas pela febre de chikungunya. Nesse sentido, este estudo permitiu descrever os aspectos clínicos e epidemiológicos da fase aguda da doença na primeira epidemia de Chikungunya no Estado do Rio Grande do Norte.
Caracterização das oscilações gama e teta hipocampais na sincronização ao alimento em ratos wistar
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2016-12-07) Dias, Halan Dyego Batista; Miguel, Mario André Leocadio; Carneiro, Breno Tercio Santos
Estudos demonstram que roedores noturnos em um regime de restrição alimentar exibem atividade antecipatória ao alimento. Este comportamento é modulado por um oscilador sincronizado a disponibilidade de alimento (FEO), que é proposto ser uma rede de estruturas cerebrais interconectadas. O hipocampo, que apresenta expressão de genes e proteína sincronizados à disponibilidade alimentar é uma região candidata a fazer parte dessa rede. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta do hipocampo na sincronização ao alimento como possível estrutura pertencente à rede de osciladores que integram o FEO, por meio de uma análise eletrofisiológica. Utilizamos cinco ratos Wistar machos, submetidos ao registro neuronal do hipocampo em duas condições experimentais: alimentação livre e restrição alimentar. Para cada condição foram calculadas as potências das faixas de frequência gama e teta. Nossos resultados demonstram um aumento da atividade elétrica hipocampal na faixa de frequência gama e diminuição na faixa de frequência teta três horas anteriores à disponibilidade de alimento em ratos em um regime de restrição alimentar. As oscilações gama estão relacionadas com processos de facilitação de comunicação entre regiões cerebrais. Portanto, o hipocampo pode ser um forte candidato a fazer parte da rede de estruturas cerebrais interconectadas que integram o FEO.

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