PPGBIO - Doutorado em Biotecnologia
URI Permanente para esta coleçãohttps://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/11904
Navegar
Submissões Recentes
Tese Bebidas probióticas de aveia enriquecidas com antocianinas de jambolão (Syzygium cumini): desenvolvimento, caracterização e efeitos da suplementação em um modelo animal com diabetes tipo 2(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-03-14) Nascimento, Sara Sayonara da Cruz; Sousa Júnior, Francisco Canindé de; Passos, Thais Souza; https://orcid.org/0000-0003-2042-4348; http://lattes.cnpq.br/3721560802857426; https://orcid.org/0000-0002-9419-9027; http://lattes.cnpq.br/0415189674400748; Rezende, Adriana Augusto de; Serquiz, Alexandre Coelho; Porto, Ana Lúcia Figueiredo; Oliveira, Emanuel Neto Alves deO objetivo desse estudo foi desenvolver e avaliar as propriedades bioativas, estabilidade e viabilidade microbiana durante o armazenamento, bem como os efeitos bioativos em modelo animal com Diabetes mellitus tipo 2 (DM2) de bebidas probióticas a base de aveia, enriquecidas com antocianinas de jambolão (Syzygium cumini). Inicialmente, foi realizada uma revisão narrativa da literatura, buscando estudos in vitro e in vivo, com o intuito de apresentar as propriedades funcionais dos probióticos em matrizes vegetais. Os resultados compilados na revisão indicaram evidências científicas relacionadas aos benefícios dos probióticos em matrizes alimentares vegetais e sua associação com compostos bioativos, mostrando potencial adjuvante para o tratamento de diversas doenças como câncer, doenças hepáticas, obesidade e doenças crônicas e inflamatórias. Além disso, foram desenvolvidas bebidas probióticas à base de extrato hidrossolúvel de aveia, contendo polpa de uva, Lactobacillus acidophilus LA14, e enriquecidas com 3% e 5% do extrato rico em antocianinas de jambolão. Ao longo de 28 dias de armazenamento, observou-se viabilidade probiótica acima de 9 Log UFC/mL em todas as bebidas, com maiores resultados de viabilidade nas formulações que utilizaram o extrato de antocianinas (10,8 – 12,59 log UFC/mL), além de apresentarem viabilidade de 10 Log UFC/mL após a digestão gastrointestinal simulada. A atividade antioxidante pela eliminação de radicais ABTS aumentou de 8,08 para 134,75 µmol Trolox/mL, após o armazenamento, enquanto a inibição da α-glicosidase aumentou de 16,24% para 52,37% com a adição de EA. A aceitação sensorial da bebida probiótica enriquecida com 3% de extrato rico em antocianinas de jambolão foi de 67,7%. Por fim, a bebida enriquecida com 3% do extrato rico em antocianinas de jambolão foi avaliada no tratamento de DM2 em modelo animal, e os resultados indicaram melhora nos sintomas de DM2, como redução de glicemia, hemoglobina glicada, diurese, ingestão hídrica, além de promoverem atenuação nos danos pancreáticos e intestinais e modularem a microbiota intestinal dos animais, com aumento da produção de ácidos graxos de cadeia curta. Esses resultados indicam o potencial bioativo das bebidas desenvolvidas, podendo ser uma opção como veículo probiótico vegetal, e adjuvante no tratamento da Diabetes mellitus tipo 2.Tese Desenvolvimento e avaliação de um biscoito nutracêutico à base de folhas de moringa oleifera para cães(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-11-26) Silva, Maria Vitória Serafim da; Padilha, Deborah de Melo Magalhães; http://lattes.cnpq.br/8944056115237337; http://lattes.cnpq.br/9593347648288673; Molina, Wagner Franco; Lima, Adley Antonini Neves de; Guzen, Fausto Pierdona; Cobucci, Ricardo Ney OliveiraAtualmente, a relação entre a espécie humana e a canina tem modificado. Antes, o animal doméstico era tido como companheiro de caça, cão de guarda. Nos dias de hoje, é um integrante da família, criando um grande laço emocional e afetivo entre o responsável e o pet. Esse fato tem estimulado profissionais das ciências veterinárias a investirem na indústria Pet, focando em tornar a vida desses animais mais saudável e longeva. Dessa forma, uma das principais formas de tornar a vida dos cães mais saudável, é explorando o alimento como alternativa de promoção de saúde, surgindo, assim, os nutracêuticos. A resistência a patógenos tem sido um desafio na medicina veterinária, e, com isso, tem-se observado o uso crescente de nutracêuticos para auxiliar no tratamento clínico. Neste contexto, a Moringa oleífera tem se destacado por ser uma planta medicinal abundante em nutrientes e apresentar alguns estudos que evidenciam sua ação anti-inflamatória, efeitos antidiabéticos e antioxidantes, podendo surgir como uma nova possibilidade de nutracêutico na medicina veterinária. Sendo assim, o objetivo da presente tese foi desenvolver e avaliar os efeitos de um biscoito nutracêutico à base de folhas da Moringa oleífera sobre respostas anti-inflamatórias em cães. O biscoito foi elaborado e os nutrientes avaliados conforme a patente em anexo. Para o experimento foram utilizados 45 cães (n=45), de propriedade privada, independente da raça e sexo, com idade acima de 1 ano, sendo utilizados 25 cães para teste de aceitação do biscoito e 20 para avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos. O sangue desses animais para avaliação de hemograma e aspectos bioquímicos foram coletados antes do início do tratamento com o biscoito nutracêutico e após 30 dias da alimentação diária com o biscoito (1 biscoito/dia). No presente experimento, pode-se observar que os níveis de TGO e TGP foram inferiores (p<0,05) após 30 dias do tratamento com os biscoitos (TGO: 28,7; TGP: 30,3) quando comparados com esses níveis antes do tratamento (TGO: 45,8; TGP: 52,7). Diante do exposto, conclui-se que os biscoitos a base de Moringa oleífera apresentaram excelente palatabilidade pelos cães, com adequado nível de proteína, 30,51%, podendo ser utilizados na alimentação dos cães, tornando os produtos alimentícios pet com maior qualidade nutricional e função nutracêutica para atuar no aumento da imunidade. Além disso, a utilização do biscoito de Moringa oleífera apresentou efeito sobre os parâmetros bioquímicos TGO e TGP, antes e após fornecimento dos biscoitos, sugerindo ter um efeito nutracêutico.Tese Transcriptômica da Covid-19: identificação de potenciais biomarcadores e mecanismos moleculares da gravidade da doença(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-09-30) Oliveira, Thaís Teixeira; Lima, Lucymara Fassarella Agnez; https://orcid.org/0000-0003-0642-3162; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; https://orcid.org/0000-0001-9397-7061; http://lattes.cnpq.br/8383930401109308; Medeiros, Silvia Regina Batistuzzo de; Araújo, Joselio Maria Galvão de; Franco, Glória Regina; Santos, Ândrea Kely Campos Ribeiro dosDurante a pandemia da COVID-19, estudos de transcriptoma foram produzidos com o objetivo de investigar possíveis mecanismos de resposta imunológica ao SARSCoV-2, descobrir possíveis alvos de tratamento, elucidar a relação vírus-hospedeiro e elencar biomarcadores da doença. No entanto, muitos desses dados permanecem subutilizados e alguns podem possuir um número limitado de pacientes avaliados fazendo com que uma grande variedade de resultados fosse observada e poucos fossem refletidos em pesquisas futuras ou marcadores clinicamente aplicáveis. O objetivo deste trabalho é identificar genes diferencialmente expressos, mecanismos moleculares, reguladores transcricionais e potenciais biomarcadores envolvidos na patogênese da COVID-19 grave. Para isso, a metodologia foi dividida em três frentes: (1) A fim de melhorar a busca por alvos moleculares e biomarcadores, este trabalho avaliou a literatura produzida durante a pandemia na área de transcriptômica e seus principais resultados. Neste estudo, foram analisados 203 artigos publicados que realizaram experimentos de transcriptômica em pacientes infectados pelo SARS-CoV-2 e controles não infectados. (2) Além disso, vários conjuntos de dados de pacientes com COVID-19 grave e leve foram analisados de maneira integrada para identificar possíveis alvos ou vias associadas à progressão da doença e descobrir biomarcadores de gravidade. Neste tópico, foram analisados três conjuntos de dados de sangue total e um conjunto de dados de amostras de leucócitos. Ademais, dados de swab nasal e PBMC também foram analisados. (3) Os genes destacados foram avaliados em soro de pacientes com COVID-19 leve e grave, a fim de validar biomarcadores testáveis em soro. Como resultado, a literatura produzida destaca a desregulação de genes estimulados por interferon (ISGs), citocinas e quimiocinas e genes relacionados a ativação de neutrófilos. Por outro lado, após a reanálise integrada, foi observado que pacientes graves com COVID-19 exibem superexpressão de genes que codificam proteínas de exossomos extracelulares, proteínas do sistema de endomembranas e grânulos de neutrófilos. Além disso, foram destacados alvos-chave como S100A9, LY96, GAPDH, RAB1B, NFKBIA e CD63 que podem desempenhar um papel importante na resposta celular à infecção. Por outro lado, pacientes com COVID19 grave apresentam regulação negativa de genes que codificam componentes do complexo receptor de células T e proteínas do nucléolo, incluindo TP53, IL2RB e NCL. Finalmente, a análise de predição de reguladores master, considerando o conjunto de genes up e downregulados mostrou que o SPI1 é um fator de transcrição associado aos genes positivamente regulados e TP53, MYC e MAX têm um papel essencial na regulação da expressão dos genes downregulados durante o COVID-19. Por fim, a validação de alvos de RNA testáveis em soro observou que os RNAs de S100A9, GAPDH e NFKBIA são biomarcadores com potencial para avaliação do prognóstico da infecção de COVID-19 grave. Vários desses genes não foram citados em trabalhos anteriores o que indica que este trabalho identificou alvos importantes que podem estimular insights sobre a compreensão da fisiopatologia molecular da infecção por SARS-CoV-2. Além disso, a identificação de fatores transcricionais que regulam a expressão de genes envolvidos na infecção e na resposta inflamatória pode ser fundamental para o avanço da compreensão da doença e para a busca por novos alvos terapêuticos.Tese Nanobioformulações do tipo SNEDDS à base de Anacardium occidentale L. e avaliações farmacológicas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-01-29) Araújo, Leonardo Bruno Aragão de; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; http://lattes.cnpq.br/6033875033893673; Padilha, Deborah de Melo Magalhães; Lima, Aurea Echevarria Aznar Neves; Arcanjo, Daniel Dias Rufino; Paiva, Weslley de SouzaSistemas coloidais ampliam a biodisponibilidade de fármacos e são utilizados como estratégia importante na proteção e entrega direcionada de bioativos de caráter sintético ou natural. Nesta perspectiva, a eficácia terapêutica da espécie medicinal Anacardium occidentale Linn. (AO) foi avaliada em um estudo nanobiotecnológico em que se utilizou modelos experimentais in vitro (antioxidante) e in vivo (avaliação anti-inflamatória pulmonar). Para tanto, o extrato hidroalcoólico (EHA-AO) e a fração rica em taninos (FTAO), obtidos das cascas do caule deste vegetal, foram encapsulados em um sistema coloidal carreador do tipo SNEDDS (sistema autoemulsificante/self-nanoemulsion drug delivery system). Neste contexto, destaca-se a importância da redução de doses terapêuticas administradas, redução de riscos toxicológicos, manutenção do nível constante do fármaco no sangue (pela liberação controlada), e eficácia prolongada dos efeitos terapêuticos, amplamente atribuídos aos sistemas coloidais. A escolha do carreador SNEDDS consiste no fato de serem sistemas coloidais estáveis que resistem a diluições em água, a variações de temperatura e/ou pH, são eficazes na liberação controlada (lenta e prolongada), os bioativos veiculados em baixas concentrações podem ser administradas por via oral, com manutenção de suas propriedades. A parte experimental do estudo foi realizada em diferentes etapas: i) análises bromatológicas e microbiológica da matéria prima regional (cascas do caule de A. occidentale); ii) procedimento fitoquímico para obtenção das amostras EHA-AO e FT-AO; iii) estudo de solubilidade e desenvolvimento do nanosistema coloidal polar O/A (óleo em água) com característica SNEDDS, isento de cotensoativo; iv) aplicação das amostras SNEDDSEHA-AO e SNEDDS-FT-AO em testes experimentais in vitro de oxidação, bem como em modelo experimental in vivo de inflamação (enfisema pulmonar em Rattus norvegicus através de instilação orotraqueal por papaína), via administração oral. O carreador SNEDDS foi preparado com Tween 80 (fase tensoativa), um óleo vegetal de uso alimentício em baixa concentração (1%), contendo os seguintes constituintes: vitamina E, poli-insaturados, gordura saturada e uma mistura dos ácidos oléico, linoleico e linolênico. O sistema SNEDDS-branco (isento das amostras do vegetal A. occidentale), após caracterização físico-química (pH, tensão superficial, CMC, viscosidade e diâmetro de gotícula), solubilizou satisfatoriamente as amostras EHA-AO e FT-AO. O potencial antioxidante dos sistemas SNEDDS-EHA-AO (10 mg mL-1 ) e SNEDDS-FT-AO (2,5 mg mL-1 e 5,0 mg mL-1 ) foi avaliado via experimentos in vitro com resultados significativos observados pelos testes de atividade redutora equivalente ao ácido ascórbico, atividade quelante de íons ferro e cobre, bem como sequestro dos radicais hidroxila e superóxido. O sistema SNEDDS-FT-AO não apresentou citotoxicidade para as células saudáveis das linhagens RAW, Vero e L-929. O estudo farmacológico in vivo dos sistemas SNEDDSEHA-AO e SNEDDS-FT-AO, em modelo experimental de inflamação pulmonar, bem como avaliação subsequente das análises histopatológicas, mostrou que a formulação SNEDDS-FT-AO apresenta o melhor resultado anti-inflamatório. Estes achados, juntamente com resultados preliminares do potencial medicinal de Anacardium occidentale Linn., que tem comprovada ação imunomoduladora, anti-inflamatória e antiviral, possibilitarão a validação fitoterapêutica das formulações SNEDDS-EHA-AO e SNEDDS-FT-AO contra o vírus Sars-CoV-2, e, portanto, poderá contribuir na terapia contra a COVID-19.Tese Abordagens moleculares e citogenéticas na validação taxonômica de espécies da tribo Amphiprionini (Pomacentridae: Teleostei) comercializadas no Brasil(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-09-28) Carvalho, Marcelo Moreira de; Molina, Wagner Franco; https://orcid.org/0000-0002-6695-0952; http://lattes.cnpq.br/8437464961129518; https://orcid.org/0000-0003-2173-6968; http://lattes.cnpq.br/7343103413719345; Padilha, Deborah de Melo Magalhães; Teixeira, Dárlio Inácio Alves; Motta, Jonas Henrique de Souza; Soares, Rodrigo XavierOs peixes-palhaços (Tribo Amphiprionini), originários do Indo-Pacífico e Mar Vermelho, estão entre os grupos taxonômicos de maior interesse comercial na indústria ornamental marinha. No Brasil, informações básicas sobre as espécies de peixes ornamentais marinhos, assim como caracterizações genômicas e citogenéticas são incipientes para estimar a atual diversidade e procedência de espécies e híbridos comercializados, inviabilizando sua rastreabilidade e manejo adequado. Este trabalho objetivou realizar um levantamento quantitativo e qualitativo das principais espécies de peixes ornamentais marinhas comercializadas no Brasil e contribuir com a prospecção da biodiversidade molecular e citogenética das principais espécies de Amphiprionini no mercado nacional. Exemplares das espécies comerciais mais representativas foram obtidas de lojas especializadas e cultivos comerciais do Brasil. As espécies foram ranqueadas quanto ao volume de indivíduos comercializados, estabelecendo-se sua origem e designação taxonômica ou nomes populares. As espécies foram validadas taxonomicamente através do sequenciamento de fitas de DNA mitocondrial (COI) e posterior comparações com sequências depositadas no GenBank. Adicionalmente, as sete espécies mais representativas foram submetidas a análises citogenéticas convencionais (coloração Giemsa, bandamento-C e Ag-RONs). A análise mercadológica do ano de 2015 a 2021, somada as informações genéticas das espécies de peixespalhaços proporcionou uma base biotecnológica para fins de identificação taxonômica, manejo e melhoramento genético. Os dados indicaram esse grupo como o mais popular entre as espécies ornamentais marinhas no mercado brasileiro e contribuem para o fortalecimento biotecnológico da piscicultura ornamental marinha nacional. Adicionalmente, os resultados têm reflexos na conservação biológica, pela ampliação da produção em cativeiro e a consequente mitigação da exploração extrativista das espécies em ambientes naturais.Tese Identificação de sequências da subfamília Orthocoronavirinae em metagenomas e metatranscriptomas e análise da diversidade genômica do coronavírus humano NL63(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-09-29) Silva, Giovanna Melo Martins; Oliveira, Riva de Paula; Rodrigues, Thiago Bruce; https://orcid.org/0000-0002-6092-6142; http://lattes.cnpq.br/6790385939188325; https://orcid.org/0000-0002-4584-6961; http://lattes.cnpq.br/1182271734264345; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-1341-4814; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; Araújo, Josélio Maria Galvão de; Franco, Gloria Regina; Acácio, Stela Mirla da Silva FelipeO desenvolvimento de tecnologias de sequenciamento de alto rendimento na última década resultou em grandes repositórios de dados brutos de sequenciamento e projetos metagenômicos. Paralelamente, a biologia computacional e a bioinformática se tornaram aliadas importantes, resultando na criação de diversas ferramentas de classificação taxonômica. A pandemia da COVID-19 (Coronavirus Disease 2019) demonstrou a importância de investigar melhor os coronavírus, especialmente os coronavírus humanos que impactam a saúde e os serviços públicos. Entre eles, o HCoV-NL63 é um coronavírus sazonal que afeta os seres humanos, está distribuído globalmente, causa doenças respiratórias leves a moderadas e compartilha o mesmo receptor para entrada no hospedeiro que o SARS-CoV e o SARS-CoV-2. Este trabalho utiliza bancos de dados públicos de sequências para 1) comparar duas ferramentas de bioinformática, Kaiju e Burrows-Wheeler Aligner (BWA), na identificação de sequências virais da subfamília Orthocoronavirinae em metagenomas humanos e 2) realizar uma análise filogenética abrangente do HCoV-NL63. Foram selecionadas aleatoriamente 1169 amostras humanas (de um total de 3670) e a classificação taxonômica foi realizada com o uso do Kaiju (análise de dois passos com diferentes bancos de dados de referência). Usando o Kaiju, foram encontradas 150 amostras positivas para CoVs, no entanto, não foi possível montar nenhum genoma. Além disso, todas as 3670 amostras foram analisadas usando o BWA, com resultados negativos para CoVs, exceto uma amostra que continha sequências do HCoV NL63. Nossos resultados sugerem que as amostras investigadas não continham coronavírus, apenas sequências conservadas e similares entre organismos, o que foi superestimado pela ferramenta Kaiju. Por outro lado, o BWA pode ser utilizado para identificar viromas em diversos produtos de sequenciamento. Neste estudo, também utilizamos 173 sequências de genes de espícula disponíveis publicamente do HCoV-NL63 para realizar a análise filogenética. A análise de máxima verossimilhança resultou em oito subgenótipos (A1, A2, A3, B1, B2, C1, C2 e C3), consolidando a divisão da linhagem B em B1 e B2. Os subgenótipos B2 (20,1%), B1 (19,5%) e C3 (16,1%) foram os mais prevalentes. Foi encontrada seleção positiva nas posições S1 (V57, G96, N431) e S2 (V1177, E1206). Foram detectadas sete substituições não sinônimas na região BLR. Em comparação com outros genótipos, o genótipo B apresenta um número significativo de substituições de aminoácidos na região S1. Nossa análise também identificou uma alta prevalência de eventos de recombinação dentro da região S1 (12-307 aminoácidos). O genótipo A, que apresenta o maior número de eventos de recombinação, mostra um período restrito de surgimento tanto em termos de tempo quanto de local, exibindo um padrão de seleção purificadora. Nossos resultados destacam a importância da vigilância epidemiológica e filogenética contínua, sendo fortemente recomendada para prever a evolução de futuras variantes.Tese Hidroxiapatita modificada: estudos biológicos para avaliação da biossegurança e das propriedades osteogênicas(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-09-29) Souza, Augusto Monteiro de; Medeiros, Silvia Regina Batistuzzo de; https://orcid.org/0000-0003-2431-0479; http://lattes.cnpq.br/5882662534904226; https://orcid.org/0000-0002-6269-5536; http://lattes.cnpq.br/7633811857140815; Uchoa, Adriana Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Menezes, Fabiano Peres; Granjeiro, José Mauro; Moreira, Susana Margarida GomesA hidroxiapatita (HA) é um composto mineral natural encontrado nos ossos e dentes, e pode ser adaptada como um biomaterial amplamente utilizado em aplicações clínicas e farmacêuticas. Estudos mostram que substituintes iônicos podem ser incorporados ao HA, tornando-o mais semelhante ao tecido ósseo natural e promissor para a regeneração óssea. No entanto, essas modificações podem alterar as características físico-químicas dos biomateriais, exigindo uma avaliação abrangente da biossegurança antes da produção em larga escala. Este estudo tinha como objetivo investigar a segurança e eficácia de biomateriais à base de HA funcionalizada para aplicações em regeneração óssea. Dividido em cinco capítulos independentes, ele abordou aspectos cruciais da biossegurança e do potencial regenerativo desses materiais. Uma revisão sistemática da literatura foi realizada com o propósito de investigar se os compostos nanoestruturados à base de HA são isentos de genotoxicidade. Nesse estudo, constatou-se que a genotoxicidade dos biomateriais à base de HA, em relação à saúde humana, é subestimada na literatura científica. Em geral, as nanopartículas de HA com forma de agulha tendem a causar mais danos ao DNA e alterações cromossômicas em comparação com outras formas de HA. Além disso, os resultados sugerem que células primárias são mais sensíveis do que as linhagens celulares na avaliação da genotoxicidade desses biomateriais. Os biomateriais utilizados neste estudo foram caracterizados e produzidos no Centro Brasileiro de Pesquisas Físicas no Rio de Janeiro. No segundo capítulo foram avaliadas a citotoxicidade e mutagenicidade de um enxerto ósseo biodegradável à base de nHA, composto por microesferas de nanopartículas de HA encapsuladas em alginato, com e sem incorporação de íons bioativos (CO32-, Zn2+ e Sr2+). Os principais resultados dessas análises foram que os testes de citotoxicidade não revelaram efeitos adversos significativos das microesferas de HA em cultura celular, e não foram observadas mudanças relevantes nos níveis cromossômicos em células CHO-k1 após exposição aos diferentes biomateriais. Além disso, não houve aumento na taxa de mutação reversa bacteriana, utilizando cepas de Salmonella Thyphymurium, após a exposição a esses biomateriais. No terceiro capítulo, realizamos testes de embriotoxicidade em zebrafish para avaliar a segurança de microesferas à base de hidroxiapatita (HA), incluindo HA com íons substituídos. Não houve mortalidade significativa (inferior a 20%), nem efeitos neurotóxicos detectados. Além disso, os biomateriais não alteraram o estresse oxidativo, nem afetaram negativamente o desenvolvimento. No quarto capítulo, nosso estudo se concentrou na avaliação da biossegurança e no potencial de regeneração óssea de nanopartículas de HA. Foram investigados os resultados preliminares da biossegurança das nanopartículas de HA nas concentrações de 25, 50 e 100 µg/mL. Utilizamos células-tronco mesenquimais obtidas de cordão umbilical como modelo celular para essa avaliação. A citotoxicidade foi avaliada por meio do teste MTT, enquanto o potencial osteogênico foi analisado por meio da dosagem da fosfatase alcalina e da coloração com vermelho de alizarina. No último capítulo, avaliamos a biossegurança de nanopartículas de HA funcionalizadas em embriões e larvas de zebrafish nas concentrações de 50, 100 e 500 µg/m. Além disso, investigamos o impacto desses biomateriais na mineralização óssea, utilizando técnicas como coloração e microscopia de fluorescência. No geral, os resultados obtidos nos diferentes capítulos deste estudo destacam a segurança biológica dos biomateriais à base de HA, bem como seu potencial na osteogênese em diferentes concentrações.Tese Desenvolvimento e teste de um dispositivo para estimulação torácica externa com função de marca-passo e avaliação da eficácia da estimulação cardíaca mecânica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-07-28) Oliveira Neto, Nestor Rodrigues de; Fregonezi, Guilherme Augusto de Freitas; Fregonezi, Guilherme Augusto de Freitas; https://orcid.org/0000-0003-4938-7018; http://lattes.cnpq.br/2201375154363914; http://lattes.cnpq.br/3901786270968653; Soares, Bruno Lobão; https://orcid.org/0000-0003-4564-2288; http://lattes.cnpq.br/3124118595692286; Dias, Fernando Augusto Lavezzo; Pinheiro, Francisco Irochima; Belchior, Hindiael AerafO marca-passo transcutâneo tem sido usado como terapia em casos de bradicardia sintomática e sinais de má perfusão, porém apresenta limitações importantes, em virtude da alta energia necessária para promover a ativação miocárdica causa desconforto e estimulação muscular. Assim, formas alternativas de estimulação artificial tem sido objeto de estudos. A estimulação mecânica é capaz de provocar a ativação cardíaca e exercer função de marca-passo, de forma similar a ativação por um estímulo elétrico, uma vez que um estímulo de natureza mecânica, de certa intensidade, pode gerar uma deformação mecânica no miocárdio capaz de iniciar a excitação miocárdica, resultando na contração ventricular. Este trabalho compreende duas partes: o desenvolvimento e teste em bancada de protótipo de dispositivo eletropneumático para estimulação transtorácica cardíaca em humanos, com função de marca-passo cardíaco, com depósito de pedido de patente de invenção, e a realização de um estudo experimental em sapos (Rhinella jimi) para avaliar a eficácia da estimulação cardíaca mecânica, comparando esta forma de estimulação com a estimulação elétrica padrão, quanto à ativação cardíaca, manutenção da captura ventricular e indução de arritmia ventricular. A estimulação mecânica foi realizada por meio do movimento de vai-e-vem e impacto da uma haste metálica de 2 mm de diâmetro na superfície externa do ventrículo esquerdo (visando a parede lateral e o ápice), com uma frequência de disparo de 10 bpm acima da FC basal de cada animal e comparando esta forma de estimulação com a estimulação elétrica, em um modelo de corações de sapo in vivo que foi mantido parcialmente fora do corpo. A estimulação elétrica ventricular foi fornecida por gerador de marca-passo temporário programado em modo de demanda conectado a dois eletrodos. Após a realização das medidas dos limiares, cada forma de estimulação foi mantida por cinco minutos, com FC de 10 bpm acima da FC basal de cada animal, mantendo a mesma energia e FC durante cada fase do experimento. O dispositivo pneumático testado apresentou uma correlação linear entre a energia mecânica liberada e pressão do ar comprimido, fornecendo valores de energia crescentes dentro da faixa prevista para a estimulação cardíaca transtorácica (considerando um limiar de 0,04 a 1,5 J), podendo atingir de zero a cerca de 2,8J, com as pressões máximas fornecidas pela rede de ar comprimido hospitalar. Os achados do estudo experimental mostraram que a estimulação mecânica direta pode manter o comando ventricular, sem perda de captura, por um período de cinco minutos ou mais, em coração de sapo, quando a estimulação ventricular é realizada em baixa frequência cardíaca. No entanto, a FC máxima em que a estimulação mecânica mantém a captura ventricular 1:1 foi próxima a FC de repouso do animal e significativamente menor do que durante a estimulação elétrica, possivelmente devido a diferentes tipos de canais iônicos ativados em cada forma de estimulação. A ocorrência de arritmias ventriculares foi semelhante nas duas formas de estimulação.Tese Interações agonísticas em pares de espécies inter e cogenéricos e diversificação citogenética na família Osphronemidae(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-09-29) Faria, Camila Fernanda Almeida de; Molina, Wagner Franco; https://orcid.org/0000-0002-6695-0952; http://lattes.cnpq.br/8437464961129518; http://lattes.cnpq.br/5000402126927493; Motta Neto, Clóvis Coutinho da; Hoyos, Daniela Chemim de Melo; Padilha, Deborah de Melo Magalhães; Gomes, Veruska Dilyanne SilvaA variabilidade genética e fenotípica intra e interespecíficas são aspectos essenciais ao melhoramento genético. Neste sentido, acasalamentos em peixes com bases genéticas evolutivamente distintas têm contribuído para obtenção de produtos funcionais e com notável valor mercadológico. Híbridos interespecíficos artificiais com fins ao mercado ornamental têm aprimorado características morfológicas, fisiológicas ou comportamentais de interesse econômico. Dentre as espécies mais comercializadas mundialmente, destaca-se a espécie Betta splendens (Osphronemidae), que por sua beleza e rusticidade, movimenta uma enorme cadeia produtiva. Devido ao marcante dimorfismo sexual e elevado nível de interações agonísticas entre os machos, essa espécie é chamada de peixe-de-briga, sugerindo primariamente características morfológicas modeladas por seleção sexual intra-sexual. Análises dos mecanismos de isolamento reprodutivo pré e pós-zigóticos envolvendo os gêneros Betta, Trichogaster, Trichopodus e Macropodus se fazem necessárias ao seu manejo em cativeiro e no desenvolvimento de protocolos de hibridização na família. Assim, foram investigados bloqueios reprodutivos pré-zigóticos através de análises das interações de corte em cruzamentos interespecíficos e intergenéricos na família Osphronemidae e dos padrões citogenéticos das espécies. O primeiro capítulo acessa o isolamento comportamental reprodutivo de espécies da família e associações com o nível de proximidade filogenética. O segundo capítulo explora a diversificação citogenética de seis espécies de Osphronemídeos de interesse comercial e sua possível participação como mecanismo de isolamento reprodutivo pós-zigótico, direcionando práticas potencialmente aplicáveis à hibridização interespecífica e incremento mercadológico da família.Tese Características clínicas associadas ao agravamento da Covid-19 e na predisposição ao desenvolvimento da Condição Pós-Covid(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-10-17) Silva, Nayara Sousa da; Luchessi, André Ducati; https://orcid.org/0000-0002-2758-8102; http://lattes.cnpq.br/4420863418928278; https://orcid.org/0000-0002-3864-4106; http://lattes.cnpq.br/2002678643031631; Fregonezi, Guilherme Augusto de Freitas; https://orcid.org/0000-0003-4938-7018; http://lattes.cnpq.br/2201375154363914; Marques, Otavio Cabral; Braga Neto, Pedro; Cobucci, Ricardo Ney OliveiraO Brasil registrou aproximadamente 37 milhões de casos de COVID-19 até janeiro de 2023. Além dos impactos agudos, a COVID-19 pode se tornar um agravo crônico, conhecido como a Condição Pós-Covid (CPC). Estudos longitudinais são cruciais para entender os impactos de longo prazo da COVID- 19. O presente estudo descreve o perfil clínico de uma coorte de 704 pacientes infectados com SARS-CoV-2 e analisa as consequências na saúde e qualidade de vida dois anos após a infecção. A primeira fase do estudo caracterizou a fase aguda da COVID-19 em pacientes infectados durante os primeiros meses de 2020. Casos críticos representaram 29% do grupo estudado, sendo o sexo masculino e a presença de diabetes as variáveis com maior risco para a gravidade da doença (RR= 1,76; IC95%: 1,43 - 2,17 e RR = 1,60; IC95%: 1,28 - 2,00). O uso de antimaláricos, azitromicina e ivermectina, medicamentos do “Kit COVID”, foi significativamente maior nos grupos de gravidade severa e crítica (p = 0.010, p <0.001, p = 0.010, respectivamente), porém não apresentaram efeito na sobrevivência dos pacientes. Um total de 105 pacientes faleceram decorrente da COVID-19 e suas complicações. A segunda fase do estudo ocorreu entre os meses de maio a junho de 2022, envolvendo 137 sobreviventes da primeira fase. Sintomas persistentes foram relatados por 56.9% dos pacientes. Mulheres e pessoas hospitalizadas durante a infecção aguda apresentaram maior risco de apresentarem sintomas após a COVID-19 (RR=2,07; IC95%: 1,47 - 2,94 e RR=1,53; IC95%: 1,07 - 2,18). Distúrbios respiratórios, efeitos neurológicos e dores no corpo foram as manifestações mais frequentemente relatadas. Pelo menos 20% dos indivíduos referiram algum grau de dificuldade na realização das atividades diárias. Países que enfrentaram altas taxas de infecção por SARS-CoV-2 devem estar preparados para lidar com as consequências de longo prazo da COVID-19. Neste contexto, nosso estudo é fundamental para fornecer um panorama da situação brasileira e orientar a realização de estudos adicionais, bem como a formulação de políticas públicas direcionadas para o enfrentamento da CPC.Tese Identificação e caracterização funcional de variantes genéticas regulatórias da expressão gênica na hipercolesterolemia familiar(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-03-29) Araújo, Jéssica Nayara Góes de; Silbiger, Vivian Nogueira; https://orcid.org/0000-0002-9252-0278; http://lattes.cnpq.br/6121935907512568; http://lattes.cnpq.br/3356845980263437; Simabuco, Fernando Moreira; Navarrete, Luis Antônio Salazar; Martínez, María José Brión; Moreira, Susana Margarida Gomes; https://orcid.org/0000-0002-8333-3016; http://lattes.cnpq.br/7741233949116498A hipercolesterolemia familiar (HF) é um distúrbio hereditário do metabolismo do colesterol, caracterizado por exposição prolongada a concentrações séricas elevadas do colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL), que leva ao aumento significativo do risco de morbidade cardiovascular e mortalidade precoce. A principal causa da HF são variantes genéticas encontradas nos genes envolvidos na via remoção das partículas de LDL da circulação sanguínea (LDLR, APOB e PCSK9), contudo, variantes causais não são encontradas em uma parcela significativa de indivíduos diagnosticados clinicamente. De forma que, variantes em regiões que não costumam ser incluídas nos painéis de diagnóstico, poderiam estar influenciando a expressão desses genes e contribuindo para o fenótipo. O presente estudo objetivou identificar e caracterizar funcionalmente variantes genéticas localizadas a montante de genes relacionados a HF. 25 voluntários diagnosticados clinicamente com HF, mas sem diagnóstico molecular confirmatório foram selecionados para sequenciamento direcionado de regiões 3 kb a montante dos genes LDLR, APOB e PCSK9 (Chr19:11086362-11089361; Chr2:21044074- 21047073; Chr1:55036476-55039475 - GRCh38) usando o método AmpliSeq for Illumina e o Miseq Reagent Nano Kit v2. A análise computacional dos resultados do sequenciamento incluiu pré-processamento, mapeamento das leituras geradas, chamada de variante e inspeção visual dos alinhamentos para confirmar a qualidade da chamada de variante. Variantes potencialmente regulatórias foram priorizadas de acordo com algoritmo de predição de probabilidade regulatória, anotação funcional com dados de bancos públicos, algoritmos de predição de patogenicidade, literatura relacionada à variante e predição alteração na ligação de fatores de transcrição. O efeito da presença de duas dessas variantes potencialmente regulatórias no funcionamento dos promotores de seus genes alvo foi avaliado por ensaio de gene repórter da luciferase em células HepG2. 34 variantes de um único nucleotídeo (SNV) identificadas no sequenciamento, passaram nos filtros de qualidade: 6 a montante do LDLR, 15 do APOB e 13 no PCSK9. 5 variantes foram consideradas potencialmente regulatórias e, consequentemente, boas candidatas para os ensaios de validação funcional: rs36218923-T e rs538300761-T do LDLR; rs934197-T e rs9282606-A do APOB; e g.55038486A>G do PCSK9. Nos ensaios in vitro, a presença da variante rs36218923-T causou uma redução média significativa da atividade da luciferase (75,4% ± 2,9% SEM) em relação a construção contendo o promotor selvagem do LDLR. Enquanto, a variante rs934197-T não causou uma diferença significativa na atividade média da luciferase em comparação com a construção contendo o promotor selvagem do APOB. Esses resultados sugerem que a variante rs36218923-T pode estar contribuindo para a diminuição da expressão do gene LDLR e causando o fenótipo da HF. Mais estudos corroborando esses achados são necessários para confirmar a relevância biológica dessa variante.Tese Desenvolvimento de aditivos bifuncionais derivados do cardanol hidrogenado para aplicação em mistura diesel/biodiesel(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-03-13) Nascimento, Tássio Lessa do; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; Rios, Maria Alexsandra de Sousa; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; https://orcid.org/0000-0002-5250-314X; http://lattes.cnpq.br/2860667150743768; Santos, Everaldo Silvino dos; https://orcid.org/0000-0001-7384-1140; http://lattes.cnpq.br/4330639792072559; Lopes, Ada Amélia Sanders; Rodrigues, Francisco Eduardo Arruda; Santos, Hélcio Silva dosO biodiesel é utilizado na frota veicular através da sua inserção junto ao diesel, que possui elevada estabilidade oxidativa quando comparado a este biocombustível. Porém, na mistura diesel/biodiesel a instabilidade à oxidação predomina podendo causar a longo prazo, desgaste e/ou corrosão nos dispositivos mecânicos de veículos abastecidos com esta combinação. Neste cenário, tem destaque os agentes com propriedades antioxidante e lubricidade, em que se encontra um subproduto da indústria de processamento da castanhado-caju, o cardanol, que está presente no Líquido da Castanha-do-Caju (LCC). No presente estudo objetivou-se avaliar o potencial do cardanol hidrogenado, 3-pentadecilfenol (composto 1), e alguns dos seus derivados como aditivos de combustível. Foi produzido o cloreto terc-butila (2), em laboratório, para ser o agente alquilante para obter o 2-terc-butil5-pentadecilfenol (3). Os demais aditivos sintetizados foram: 2-nitro-5-pentadecilfenol (4), dietil-3-pentadecilfenil fosfato (5), 3-pentadecilfenil difenil (6), tri (3-pentadecilfenil) fosfato (7), 2-terc-butil-5-pentadecilfenil dietil fosfato (8) e 2-terc-butil-5-pentadecilfenil difenil fosfato (9). Durante as sínteses destes compostos, reproduzidas com modificação, empregou-se princípios da química verdes. Os compostos reproduzidos foram caracterizados por Cromatografia Gasosa Acoplada ao Espectrômetro de Massas (CG/EM) e pelas espectroscopias de Infravermelho (IV) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN de 1H e de 13C). O biodiesel de soja utilizado na mistura diesel/biodiesel na proporção 8:2, foi sintetizado através da rota metílica utilizando o catalisador métoxido de potássio, tendo sido caracterizado conforme a Resolução ANP Nº 45 de 25/08/2014. A atividade antioxidante do cardanol hidrogenado e seus compostos derivativos (2.000 mg/kg), foi avaliada através dos métodos DPPH• e Rancimat, e a lubricidade pela técnica de Four Ball. Os resultados das análises antioxidante mostrou que todos os compostos estabilizaram o radical DPPH•, com destaque para 3 (81,1), 1 (46,5) e 7 (43%) pelos maiores percentuais de redução do radical livre. No teste via Rancimat os compostos que apresentaram os maiores acréscimos no tempo de indução foram 7 (32,8%), 3 (31%) e 9 (31%). Para lubricidade, o composto 3-pentadecilfenil difenil (6) proporcionou maior percentual (70,4%) de lubricidade, observado em função da sua maior eficácia de redução do torque quando comparado ao biodiesel de soja isento de aditivo. De forma abrangente, os aditivos fosforados (5, 7, 8 e 9) foram os mais eficientes e representam uma classe de compostos semissintéticos ecocompatíveis, portanto, estão inseridos no setor energético que busca desenvolver combustíveis eficazes e pouco poluentes, assim, se comercializados, agregarão valor biotecnológico as indústrias de combustíveis.Tese Caracterização de marcadores moleculares do tipo SNPs e Microssatélites em Penaeus vannamei e proposição de painéis para estudos populacionais e de associação(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-12-20) Vieira, Iasmim Santos Mangabeira e Silva; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; 05372896663; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; 05512437402; Ribeiro, Karina; 26459233802; http://lattes.cnpq.br/0589962629835994; Theodoro, Raquel Cordeiro; 22405839830; http://lattes.cnpq.br/0977453259767928; Cesar, Aline Silva Mello; 24828813829; http://lattes.cnpq.br/6423577693155656; Lima, Juliana Gabriela Silva De; 04198564124; http://lattes.cnpq.br/1463822009424883A carcinicultura mundial, e sobretudo a brasileira, sofre profundos impactos em decorrência da falta de padronização nos processos produtivos e da ocorrência de doenças infecciosas. Nesse sentido, o estudo do genoma do camarão Penaeus vannamei e o desenvolvimento de novas ferramentas que permitam a seleção de animais com o vigor necessário para produção é crucial para o sucesso na atividade. Entre essas ferramentas, o uso de marcadores moleculares e sua associação a características de interesse tem se mostrado uma estratégia promissora, sobretudo considerando que vacinas e tratamentos não estão disponíveis para carcinicultura. Entretanto, as informações sobre os marcadores moleculares para Penaeus vannamei ainda estão bastante fragmentadas e muitos marcadores não estão devidamente caracterizados. Assim, esse trabalho teve como objetivo identificar e caracterizar em detalhes marcadores do tipo polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) e microssatélites (STR) já descritos na literatura para o P. vannamei, e a partir dessa caracterização, propor painéis de marcadores com potencial aplicação em estudos populacionais e de associação. No capítulo 1, 512 SNPs associados a genes envolvidos na resistência a doenças foram identificados e classificados em detalhes. Foi observado que a maioria dos SNPs estavam presentes nas proteínas receptores Toll like 1 e 3, subunidades grandes e pequenas da hemocianina e fatores anti-lipopolissacarídeos 1 e 2, permitindo propor seu uso como alvos em estudos de associação e melhoramento genético de populações de P. vannamei. No capítulo 2, 306 STR polimórficos foram caracterizados em detalhe, no intuito de identificar a sua localização no genoma. Dentre esses,38,8% foram considerados perfeitos, com a maior prevalência de dinucleótidicos (45,3%). O número de repetições ininterruptas variou de 3 a 62, com a maioria consistindo em repetições curtas. As sequências putativas de 135 STRs foram obtidas e, após o alinhamento funcional, 62 delas foram associadas à genes codificantes (mRNA). As proteínas identificadas estão relacionadas principalmente à atividade de ligação (53,5%) e atividade catalítica (32,14%). Além disso, 7 STRs perfeitos localizados em regiões codificantes do DNA foram validados in vitro em uma população de camarões. O número médio de alelos por loco foi de aproximadamente cinco, indicando que podem haver diferentes isoformas de proteínas na população. Concluindo, esse trabalho resume todos os marcadores já descritos e caracterizados para P. vannamei e detalha painéis de SNPs e microssatélites em regiões codificantes. Esses marcadores têm potencial para utilização em estudos populacionais e, sobretudo, para estudos de associação direta fenótipo-genótipo, elevando o estudo da plasticidade genética e da correlação genótipo fenótipo em P. vannamei.Tese Avaliação do efeito da losartana e do probiótico Limosilactobacillus mucosae CNPC007 no modelo experimental de mucosite intestinal induzido por 5-fluorouracil em camundongos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-10-21) Oliveira, Maisie Mitchele Barbosa; Medeiros, Caroline Addison Carvalho Xavier de; Silva Júnior, Arnóbio Antônio da; https://orcid.org/0000-0002-7516-1787; http://lattes.cnpq.br/2593509584288129; https://orcid.org/0000-0001-9224-2434; http://lattes.cnpq.br/2982271986555450; https://orcid.org/0000-0001-7141-3708; http://lattes.cnpq.br/2771654404049896; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; Araújo, Aurigena Antunes de; Wong, Deysi Viviana Tenazoa; Raimundo, Juliana MontaniA mucosite intestinal (MI) é um efeito colateral associado ao tratamento do câncer decorrente da quimioterapia. A citotoxidade da MI decorrente do uso de 5-fluouroracil (5-FU) promove danos na estrutura epitelial da mucosa e sintomas gastrointestinais associados que induzem a interrupção do tratamento pelo paciente. Na atualidade, não existe um protocolo terapêutico eficiente que melhore os sintomas da mucosite intestinal, neste sentido, em busca de propor alternativas que visem atenuar os sintomas apresentados por pacientes acometidos pela MI, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da losartana (LOS) e o efeito protetor do probiótico (Pb) Limosilactobacillus mucosae CNPC 007 na mucosite intestinal induzida por 5- FU, em camundongos swiss. O 5-FU (450 mg/Kg, i.p.) foi utilizado para induzir a mucosite intestinal no 1° dia. Os grupos experimentais incluíram: Grupo salina, Grupo 5-FU, Grupo LOS (5, 25 ou 50 mg/Kg) e Grupo Probiótico. A losartana foi administrada 30 min antes do 5-FU e o probiótico foi administrado nos 14 dias que antecederam à indução da MI. Estes foram eutanasiados com tiopental (90 mg/Kg, i.p.), no 4° dia após a indução e amostras de sangue e segmentos intestinais foram coletados para análises posteriores. As amostras de sangue foram utilizadas para contagem de leucócitos e segmentos jejunais foram separados para ensaios de imunoabsorção enzimática para dosagem de citocinas (TNF-α e IL-1β), estresse oxidativo (MDA e GSH) e reações em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) para os genes TWEAK, Fn-14 e NF-κB p65 e MUC-2. Os animais com MI sem tratamento apresentaram maior dano intestinal na porção do jejuno, observado por vilosidades encurtadas, perda da arquitetura da cripta e intenso infiltrado de células inflamatórias, avaliadas por análises histopatológica com escores 3 (variação 2-3) e morfometria (p < 0,001 vs grupo Salina). LOS 50 mg/Kg apresentou os melhores resultados para as análises iniciais, sendo esta a dose adotada para avaliação do estudo. Foi observado leucopenia e maior perda de peso nos animais com MI (Grupo 5-FU), comparado ao Grupo Salina. O tratamento dos grupos LOS 50 e Probiótico melhoraram significativamente o aspecto das vilosidades e criptas (p < 0,01), revertendo as alterações histopatológicas (escores 1, variação 1-2) e morfometria, a leucopenia e a perda ponderal (p < 0,05 vs grupo 5-FU), induzidas pelo 5-FU. Houve redução dos níveis das citocinas fator de necrose tumoral (TNF)-α e interleucina (IL)-1β para os grupos LOS 50 e Probiótico. LOS 50 reduziu os marcadores de estresse oxidativo e a expressão dos genes NF-κB p65, TWEAK e Fn-14 em relação ao grupo 5-FU (p < 0,001). O probiótico reduziu a expressão gênica do NF-κB p65 e aumentou a expressão da MUC-2 em relação ao grupo sem tratamento (salina, p < 0,001). Estes resultados mostraram um efeito benéfico da LOS 50 e de Limosilactobacillus mucosae CNPC 007 na MI induzida, em camundongos. Em conclusão, LOS 50 mg/Kg e o probiótico L. mucosae CNPC 007 se mostraram promissores na atenuação dos sintomas da MI, considerando que ambos os tratamentos melhoraram a lesão da MI induzida pelo 5-FU, reduzindo a expressão dos mediadores pró-inflamatórios em segmentos jejunais avaliados.Tese Avaliação da atividade antioxidante de quitosana extraída de fungos e de seu derivado conjugado com ácido gálico através de testes in vitro e in vivo utilizando modelo zebrafish (Danio rerio)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-22) Paiva, Weslley de Souza; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-2252-1221; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; https://orcid.org/0000-0002-2022-5659; http://lattes.cnpq.br/6853669083018775; Scortecci, Katia Castanho; https://orcid.org/0000-0002-4690-2785; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; Theodoro, Raquel Cordeiro; Tosin, Fernanda Fogagnoli Simas; Sabry, Diego de AraújoO estresse oxidativo é uma causa de inúmeras doenças em humanos, isso provoca uma busca constante de novas moléculas que possam ter capacidade antioxidante e evitar o surgimento de doenças. O objetivo desse trabalho foi extrair quitosana de fungos (Chit-F) e sintetizar uma nova molécula, conjugando Chit-F com ácido gálico, a qual foi denominada de ChitFGal, a fim de potencializar sua ação antioxidante. Após coleta, isolamento e identificação do fungo como sendo da espécie Rhizopus arrhizus, foi possível extraír uma molécula que, após testes físico- químicos como cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), infravermelho por transformada de fourier (FTIR) e ressonância magnética nuclear (RMN), foi caracterizada como uma quitosana, com grau de desacetilação 86% e baixa massa molecular, além disso, sem presença de proteínas e compostos fenólicos. Após isso, foi realizada com sucesso a síntese de quitosana fúngica + AG (Chit-FGal), comprovada pelo aumento em 4x da quantidade de compostos fenólicos em relação a Chit-F, como também o surgimento de um pico na região dos anéis aromáticos na análise de RMN. Ao ter as 2 amostras extraídas/sintetizadas e caracterizadas, foram realizados os testes antioxidantes in vitro (Quelação de cobre, quelação de ferro, capacidade antioxidante total (CAT), poder redutor e sequestro de radical superóxido), onde as amostras tiveram atividades em todos os testes, porém Chit-FGal obteve resultados pelo menos 50% (p <0,05) superiores, demonstrando a potencialização das atividades ao modificar a molécula nativa. As amostras Chit-F e ChitFGal não foram citotóxicas para fibroblastos murinos (NIH/3T3) em nenhuma das concentrações utilizadas. Quando estas células foram expostas a apenas peróxido de hidrogênio (0.06 mM), detectou-se sinais de citotoxicidade que não abolidos quando estas células foram expostas a peróxido de hidrogênio e Chit-Fgal (de 0,05 a 0,25 mg/mL). Ao testar a capacidade antioxidante in vivo utilizando modelo zebrafish (Danio rerio), foi observado um efeito de proteção dos embriões contra danos causados por peróxido de hidrogênio 0,06 mM. Posteriormente as larvas com 3 dias pós fecundação foram analisadas quanto a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), peroxidação lipídica e a taxa de morte celular por apoptose . Ambas demonstraram ação protetora contras os 3 fenômenos estudadas. Esses resultados demonstram o excelente potencial antioxidante de Chit-F, como também a potencialização dessa ação ao conjugar esse polímero com ácido gálico (ChitFGal), in vitro e in vivo o que torna essa nova molécula como promissora como antioxidante, com potencial para tratar diversos problemas causados pelo estresse oxidativo.Tese Infertilidade e reprodução assistida: mercado global, avaliação de tecnologias para seleção espermática e prospecção da microbiota seminal(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-29) Aderaldo, Janaina Ferreira; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-1341-4814; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; http://lattes.cnpq.br/4449032685703603; Morais, Danielle Barbosa; http://lattes.cnpq.br/1768180848750009; Cobucci, Ricardo Ney Oliveira; Oliveira, Rodrigo Vasconcelos de; Tilburg, Mauricio Fraga VanA infertilidade é definida como o insucesso em obter uma gestação após 12 meses de relações sexuais regulares desprotegidas, ou como condições que incompatibilizam o encontro de gametas. A infertilidade é considerada um problema de saúde mundial, o mercado global em tecnologias em reprodução assistida (TRA) movimentou cerca de US$ 26 bilhões de dólares em 2019 e deve chegar a US$ 45 bilhões até 2025. Os principais fatores associados a esse mercado, bem como os elementos que podem infuenciar na eficiência dos procedimentos relacionados a fertilidade, ainda são pouco discutidos, e em muitos casos desconhecidos. Nesse contexto, essa tese teve como objetivo caracterizar os principais tópicos relacionados ao mercado global em reprodução humana assistida (RHA) e aprofundar a pesquisa em dois tópicos ainda pouco estudados: a eficiência do procedimento de microfluídica e a ocorrência de patógenos no sêmen. O primeiro capítulo apresenta uma revisão de escopo que teve como objetivo caracterizar o mercado de RHA. Foi aplicada a metodologia de modelagem de tópicos que possibilitou identificar os termos mais abordados em textos revisados por pares e literatura cinzenta relacionados ao tema. Com base nessa revisão foi possível observar que a grande maioria dos trabalhos aborda aspectos econômicos, regulatórios e geográficos e que temas relacionados à pesquisa, desenvolvimento e aprimoramento técnico sobretudo no que tange a fertilização in vitro (FIV) não são abordados. Desta forma, obsevamos a necessidade de aprofundar a análise de elementos de mercado que possam estar relacionados ao aumento da eficiência da FIV no campo técnico. Esse primeiro capítulo motivou o aprofundamento na investifação de tecnologias que estejam relacionadas ao aumento da eficiência da FIV. Dentre as tecnologias supracitadas, está em voga a utilização de microfluídica para a seleção espermática (MFSS). No segundo capítulo da tese apresentamos a primeira metanálise com objetivo de identificar potenciais benefícios na utilização deste dispositivo sobre as taxas de gravidez clínica e abortamento em TRA. Os resultados indicam discreto aumento na taxa de gravidez clínica e diminuição nas taxas de abortamento em relação às técnicas de seleção espermática por gradiente de densidade e swim-up; contudo, estes resultados não apresentaram significância estatística. Os indicadores de sucesso em TRA mais robustos permanecem sendo a idade materna, a reserva ovariana e a análise espermática quali-quantitativa. Nesse contexto de aprofundar o conhecimento sobre os tópicos menos estudados entro da RHA, o terceiro capítulo da tese apresenta o primeiro estudo que aplicou a abordagem metagenômica shotgun em amostras seminais. Apesar de ainda pouco estudada, a ocorrência de patógenos no sêmen pode ser considerada uma causa de infertilidade e a escolha da técnica se justifica pela possibilidade de identificação não-direcionada de todo o grupo de organismos existentes na amostra. Utilizamos um pool de amostras seminais disponibilizadas por voluntários na Unidade de Direitos Reprodutivos na Maternidade Escola Januário Cicco (MEJC). Encontramos 71,3% de domínio bacteriano, 27,6% eucariótico e 1,1% de comunidade viral. Esses achados ampliam a visão atual sobre a microbiota funcional e apontam futuras investigações como o papel de microrganismos não cultiváveis no sistema reprodutivo. Além disso, as famílias Herv identificadas em amostras seminais abrem uma nova linha para estudos com perspectiva funcional e evolutiva. Todos os dados levantados nessa tese contribuem para novas frentes de pesquisa nos níveis de mercado, aprimoramento de metodologias e diagnóstico de doenças relacionadas à fertilidade.Tese Evidência científica sobre avaliação da musculatura respiratória e tratamento dos distúrbios respiratórios do sono em acidente vascular cerebral(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-08-27) Yáñez, Matías Felipe Otto; Fregonezi, Guilherme Augusto de Freitas; https://orcid.org/0000-0003-4938-7018; http://lattes.cnpq.br/2201375154363914; Nóbrega, Antônio José Sarmento da; Lima, Illia Nadinne Dantas Florentino; http://lattes.cnpq.br/9427677288797166; Gualdi, Lucien Peroni; http://lattes.cnpq.br/3486514016305167; Parreira, Verônica FrancoNos últimos quarenta anos, algumas modalidades de teste foram desenvolvidas para avaliar a resistência dos músculos respiratórios, especialmente dos músculos inspiratórios. Os testes e protótipos de dispositivos sempre buscaram avaliar dois aspectos que são relativamente distintos: a fadiga e a resistência. Apesar da importância, estudos prévios utilizandodiferentes modelos de avaliação da resistência de músculos respiratórios foram baseados em dispositivos, ou protótipos, testados com pequeno tamanho amostral, o que torna muito difícil a interpretação dos resultados. Adicionalmente, o teste de endurance respiratória inespecifico mais utilizado, a ventilação voluntária máxima (VVM), por anos foi aplicado de forma indireta em diferentes populações como na Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC) usando equações de predição. No entanto, existem várias equações na literatura e não se sabe se estas realmente concordam com os valores obtidos durante a VVM. Também nas últimas décadas, progressos significativos foram feitos sobre a compreensão dos distúrbios respiratórios no sono esuas consequências. Apesar de haver evidências de que o tratamento com pressão positiva nas vias aérea facilite a atividade dos músculos respiratórios e melhore a ventilação e o controle da doença, não se sabe a sua efetivade em populações especiais, como em pacientes pós acidente vascular cerebral (AVC). Esta tese objetivou examinar métodos de avaliação e tratamento de distúrbios respiratórios em pessoas com doenças crônicas. Nós também avaliamos a concordância da medida de resistência do sistema respiratório utilizando a ventilação voluntária máxima mensurada diretamente e indiretamente (valor estimado) em pacientes com DPOC e sujeitos saudáveis, além de evidenciar a efetividade e segurança do uso de pressão positiva contínua nasal na funcionalidade, severidade clínica da doença, incapacidade, sonolência diurna e mortalidade de pessoas após AVC. O dispositivo projetado trata-se de um equipamento com potencial de inovação capaz de avaliar a resistência dos músculos respiratórios (inspiratórios/expiratórios isolados ou combinados) através de diferentes protocolos. A revisão sistemática está em fase de finalização. Apesar de uma alta heterogeneidade dos estudos, os resultados preliminares obtidos sustentam que o nCPAP tem efeitos positivos na severidade da doença em um período acima de três meses em pacientes com AVC e distúrbios respiratórios do sono. O seguinte estudo teve como objetivos avaliar, desenvolver e examinar métodos de avaliação muscular respiratória e tratamento de distúrbios respiratórios em pessoas saudáveis ou com doenças com DPOC e distúrbios respiratórios do sono em pessoas após acidente vascular cerebral.Tese Derivado de oxazinoquinoxalina e sistemas coloidais à base de óleo de coco aplicados como inibidores de corrosão em aço AISI 1018 em meio salino(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-03-31) Pereira, Joherbson Deivid dos Santos; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; http://lattes.cnpq.br/5911421815221077; Lima, Aurea Echevarria Aznar Neves; Ramalho, Heryka Myrna Maia; Nascimento, José Heriberto Oliveira do; Veiga Júnior, Valdir Florêncio daA corrosão é um dos principais problemas que acomete o setor industrial e o aço carbono constitui o material de maior aplicação industrial, com destaque para o processamento de petróleo. As maiores fontes de petróleo estão localizadas em mares e oceanos, e a corrosão de metal ocorre pela ação de ambiente salino. Alguns derivados de quinoxalina são relatados na literatura como sendo agentes eficazes na inibição à corrosão. No presente trabalho avaliou-se a capacidade inibidora de um derivado oxazinoquinoxalina, N-(2-hidroxietil)-2,3-diidro-[1,4]-oxazinoquinoxalina (OAQX), objetivando proteção à corrosão do aço carbono AISI 1018, em meio salino (3,5% NaCl). Os estudos de Resistência à Polarização Linear (RPL) mostraram eficiências de inibição variando entre 55% a 89% em baixas concentrações (6 ppm a 100 ppm) a amostra avaliada (OAQX). Para determinação dos parâmetros de adsorção, foram obtidas isotermas de Langmuir, Temkin e Frumkin. O derivado de quinoxalina, o oxazinoquinoxalina, consistiu no primeiro composto desta classe, avaliado como um inibidor de corrosão, o qual difere de outros compostos heterocíclicos orgânicos aplicados como anticorrosivos, devido sua solubilização em meios aquosos neutros, que favorece os estudos de suas interações com o metalligante. Em função do agravamento da degradação ambiental mundial, foram adotadas novas práticas no controle de impactos ambientais que consistem no desenvolvimento de tecnologias limpas. Nesta perspectiva, foram avaliados sistemas coloidais à base de óleo de coco (OC) como inibidores de corrosão em aço carbono AISI 1018, em meio salino (NaCl). Sistemas nanoemulsionados de OC foram avaliados pelo método de Resistência a Polarização Linear (LPR), com eficiências máximas 84% para SNE-OC6 e 90% para SNEOC6-OAQX. Extensivamente, os sistemas micro- e nanoemulsionados de OC (SME-OC1, SME-OC2, SNE-OC1 e SNE-OC1) foram eficazes como carreadores de extratos vegetais de comprovada ação anticorrosiva, resultando em novos produtos disponibilizados para o desenvolvimento de tecnologias eco-sustentáveis.Tese Sistemas coloidais SNEDDS carreadores de Croton cajucara Benth aplicados em modelos experimentais in vivo de antinocicepção, inflamação e cicatrização dérmica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-02-22) Medeiros, Magnaldo Inácio Tavares; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; http://lattes.cnpq.br/6820195618816346; Nascimento, José Heriberto Oliveira do; https://orcid.org/0000-0001-6804-2854; http://lattes.cnpq.br/7033735079037677; Albuquerque Júnior, Ricardo Luiz Cavalcanti de; Silva, Terezinha Gonçalves da; Veiga Júnior, Valdir Florêncio daA utilização da tecnologia baseada nas ciências biológicas tem possibilitado novos tratamentos como por exemplo, a ampliação da biodisponibilidade de fármacos e a redução de efeitos adversos. Dentre muitas possibilidades de carreadores de fármacos têm destaque os sistemas coloidais como estratégia importante na proteção e entrega direcionada de produtos bioativos. As doenças inflamatórias crônicas (DICs) e as feridas crônicas, por exemplo, são amplamente tratadas com eficácia, porém, os efeitos adversos atribuídos aos medicamentos limitam o tratamento prolongado. No presente estudo, utilizou-se a espécie medicinal Croton cajucara Benth aplicada em modelos experimentais in vivo, como terapia alternativa. Os bioativos utilizados, óleo fixo (OF) e o diterpeno trans-desidrocrotonina (t-DCTN), obtidos das cascas do caule deste vegetal, foram encapsulados em um sistema coloidal carreador do tipo SNEDDS (self-nanoemulsion drug delivery system), objetivando-se redução de doses terapêuticas e riscos tóxicos, a manutenção do nível constante do fármaco no sangue (pela liberação lenta e controlada), e a eficácia prolongada dos efeitos terapêuticos. O estudo experimental foi realizado em diferentes etapas, tais como: estudo cromatográfico para obtenção dos bioativos OF e t-DCTN; obtenção do nanosistema coloidal polar O/A (óleo em água), isento de cotensoativo, preparado com Tweens (80 e 40) como fase tensoativa, um óleo vegetal de uso alimentício (fase óleo), e os bioativos OFCC e DCTN; e aplicação dos bioprodutos em modelos experimentais in vivo de nocicepção, inflamação e cicatrização dérmica. Os SNEDDS-derivativos foram denominados SNEDDS-OFCC (15 mg de óleo fixo, rico em sesquiterpenos) e SNEDDS-DCTN (3 mg e 5 mg de t-DCTN). O sistema SNEDDS-branco (isento dos bioativos) foi caracterizado por análises físico-químicas e mostrou diâmetro de gotícula com escala reduzida (11 nm). Estes nanosistemas foram administrados por via oral, em modelos experimentais de dor através dos testes das contorções abdominais e da formalina. Nos modelos de inflamação (edema de pata e peritonite) a dexametasona (0,5 mg/kg, s.c.) foi utilizada como controle positivo. SNEDDS-DCTN foi utilizado no modelo experimental de cicatrização, administrado por via tópica em lesões de ratos Wistar (7, 14 e 21 dias). Para cada grupo experimental foi observado o índice de retração (morfometria) da lesão e o comportamento tecidual (análise histopatológica e imuno-histoquímica). Os resultados do tratamento com SNEDDS-OFCC mostraram 40,2% de inibição na dor de origem central (neuropática) e 42,8% na inibição da dor inflamatória periférica. SNEDDS-DCTN na redução das contorções abdominais foi efetivo em 76,7%, e no teste da formalina inibiu 47,9% (dor neuropática) e 52,6% (dor periférica). As taxas de inibições da migração leucocitária (inflamação induzida por carragenina), mostraram reduções significativas para a cavidade peritoneal, com inibições 29,4% para SNEDDS-OFCC e 38% para SNEDDS-DCTN, em relação ao grupo controle negativo (veículo). Na inibição do edema de pata observou-se 89,7% para SNEDDS-DCTN. Com base nestes resultados, o sistema SNEDDS-DCTN foi avaliado em modelo experimental de cicatrização e mostrou índice de retração das lesões no 14º dia quantitativo (98,3%), contra 43,7% para o 7º dia, em comparação ao grupo controle negativo. Nas análises histopatológicas, observou-se redução da inflamação, com ganhos significativos na proliferação celular e maturação tecidual, por comparação ao grupo controle. O carreador SNEDDS por ser um sistema isento de cotensoativo, reforça a proposta da aplicação farmacológica em períodos prolongados, em função da redução do número de ingredientes utilizados no preparo deste sistema carreador e ainda, pelas concentrações encapsuladas dos bioativos de C. cajucara. SNEDDS-OF e SNEDDS-DCTN, por apresentarem ação associada antinociceptiva e antiinflamatória, bem como cicatrizante (SNEDDS-DCTN), poderão atender a uma demanda específica de pacientes que se encontram em tratamentos prolongados (DICs) para combater dor e inflamações causadas por lesões cutâneas ou inflamações crônicas.Tese Análise da exposição humana à radiação natural no munícipio de Lajes Pintadas, Rio Grande do Norte, semiárido brasileiro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-01-28) Oliveira, Richelly da Costa Dantas; Amaral, Viviane Souza do; https://orcid.org/0000-0002-9326-9054; http://lattes.cnpq.br/4440806451383783; http://lattes.cnpq.br/9517728487108153; Theodoro, Raquel Cordeiro; https://orcid.org/0000-0001-5016-1046; http://lattes.cnpq.br/0977453259767928; Becker, Vanessa; Navoni, Júlio Alejandro; Santos, Nataly Albuquerque dosO Brasil possui uma das maiores reservas mundial de urânio. No Semiárido Brasileiro, especificamente no município de Lajes Pintadas/RN, existem afloramentos rochosos com a presença de ionizantes naturais que liberam o gás radônio e, consequentemente, o chumbo para o ambiente. Essa tese objetivou investigar a presença de contaminantes naturais no Município de Lajes Pintadas/RN/Brasil e suas implicações para populações avaliando seus efeitos nocivos por meio de ensaios biológicos. Foram realizadas em 163 indivíduos, análises em células da mucosa oral, utilizando o teste de micronúcleo com abordagem citoma (BMCyt) para visualizar e comparar as possíveis alterações causadas pela exposição ao chumbo e radônio. Nas residências escolhidas para o estudo, foi utilizado o método de emanometria passiva, para quantificar radônio presente no ar, que chegou a níveis 30 vezes mais elevados do que o considerado permissível pela Organização Mundial de Saúde, porém um dos subprodutos, o chumbo, esteve dentro das recomendações nacionais de qualidade. Níveis de exposição efetiva foram detectados abrangendo concentrações de chumbo em sangue desde não detectável até 12 μg/dL. Com relação as alterações nucleares a média da frequência de brotos nucleares foi de 0,163±0,352, apresentando um aumento significativo quando comparada à região controle que foi de -0,0204±0,263; já com relação de células binucleadas observadas (4,13±5,79) foi o dobro da observada na região controle (0,234±4.29), tais parâmetros podem indicar ocorrência de amplificação gênica, assim como sugere alterações no processo de citocinese durante a divisão celular. Porém, não foi estabelecida uma resposta significativa com relação aos dados da frequência de micronúcleos dos expostos (0,200±0,671) em comparação ao grupo controle (0,00870±0,191). Sendo assim, o nível de exposição do chumbo à população mostrou não influenciar em seu estado de saúde, fato este, que precisa ser aprofundado em pesquisas, tanto para averiguar a origem geogênica do chumbo, quanto para exposição dos subprodutos do urânio à população.