Navegando por Autor "Uchôa, Adriana Ferreira"
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Dissertação Atividade citotóxica, bacteriostática e aglutinante para leishmania de ConM: uma lectina isolada das sementes do feijão de praia – Canavalia marítima (Aubl.) Thou. (1813)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-06-26) Araújo, Jonalson Nogueira; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; ; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; ; http://lattes.cnpq.br/5561107181304291; Lima, Jailma Almeida de; ; http://lattes.cnpq.br/9077722100091492; Lima, João Paulo Matos Santos; ; http://lattes.cnpq.br/3289758851760692Sementes de plantas são reservatórios de moléculas com grande potencial para elaboração de bioprodutos e por este motivo uma especial atenção tem sido direcionada na busca de proteínas bioativas com ação antimetabólica e propriedades farmacológicas. As lectinas de plantas são proteínas com atividades biológicas relacionadas a defesa, mas que podem ser utilizadas, heterologamente, como interferentes no metabolismo de outros organismos. Uma lectina das sementes de Canavalia maritima (CML) foi purificada em dois passos, pelo fracionamento com sulfato de amônio seguido pela cromatografia de afinidade em coluna Sephadex G- 50. CML foi analisada por SDS-PAGE e parte de sua sequência de aminoácidos determinada por espectrometria de massas. Os 20 resíduos identificados apresentaram 100% de identidade com ConM. ConM foi testada contra eritrócitos do sangue periférico humano e foi constatado a ausência de toxicidade quando incubados com até 1000 µg/mL da proteína. Já contra células mononucleares, a lectina não foi significativamente tóxica nas concentrações de 1, 2,5 e 5 µg/mL, mas o foi a partir da concentração 7 µg/mL e contra a linhagem RAEC a proteína não apresentou toxicidade significante com 25 µg/ml da proteína. Outros ensaios de citotoxicidade revelaram que a ConM é tóxica para as linhagens tumorais A549, 786- 0, HT-29 e HeLa no intervalo entre 24 e 72 horas, principalmente nas concentrações de 5, 7 e 10 µg/ml. ConM foi capaz de aglutinar as formas promastigotas de Leishmania spp na concentração de 6,25 µg/ml. Quanto a ação contra Candida spp, nenhuma das concentrações testadas (1 a 500 µg/ml) foi capaz de interferir no crescimento. Quando avaliada a atividade bacteriostática, a ConM nas concentrações variando de 0,39 a 400 µg/ml não inibiu o crescimento de Escherichia coli, já para Staphylococcus aureus a concentração de 25 µg/ml se mostrou ativa, reduzindo o crescimento em 75 %. Com base nos dados obtidos, a lectina isolada corresponde a uma isolectina do tipo ConA, e suas propriedades anti-tumoral, bacteriostático e aglutinante para Leishmania precisam ser melhor investigados para que seu potencial biotecnológico seja explorado.TCC Atividade larvicida e inibição in vitro de proteases intestinais de Aedes aegypti por extratos de sementes de plantas da caatinga(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-22) Bezerra, Pedro Vítor Vale; Uchôa, Adriana Ferreira; Sá, Giulian César da Silva; https://orcid.org/0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-8674-6959; http://lattes.cnpq.br/0567529774568955; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; Inácio, Cássio Lázaro Silva; https://orcid.org/0000-0002-1666-6646; http://lattes.cnpq.br/4910533645616566Arboviroses são doenças epidemiologicamente relevantes transmitidas por artrópodes, afetando sobretudo países tropicais, como o Brasil. Atualmente o enfrentamento das arboviroses é realizado, principalmente, através do controle populacional do Aedes aegypti, principal mosquito vetor urbano. Recentemente, a busca por alternativas ecologicamente amigáveis para o controle vetorial tem sido incentivada, como o desenvolvimento de inseticidas botânicos. Nesse cenário, a Caatinga, centro de biodiversidade, representa uma fonte importante de espécies vegetais para prospecção de moléculas inseticidas. A presente pesquisa investigou a potencial atividade de extratos de sementes de 3 espécies vegetais da Caatinga, Amburana cearensis, Anadenanthera colubrina e Erythrina velutina, contra larvas de A. aegypti, e buscou avaliar, in vitro, suas capacidades de inibição das proteases intestinais das larvas deste mosquito. Bioensaios foram realizados expondo as larvas em diferentes concentrações dos extratos, sendo analisada a taxa de sobrevivência larval em 24h e 48h, para estimar as concentrações letais 50% (CL50). Homogenatos foram produzidos a partir dos intestinos médios das larvas para analisar in vitro a inibição pela exposição aos extratos, quantitativamente, através de ensaio de atividade enzimática, e qualitativamente, através de zimogramas. Os extratos aquosos de A. cearensis (EC), A. colubrina (EA) e E. velutina (EM) comprometeram a sobrevivência das larvas, apresentando CL50 iguais a 0,67 mg/mL, 0,28 mg/mL e 1,85 mg/mL, após 24h de exposição, e 0,24 mg/mL, 0,05 mg/mL e 0,91 mg/mL, após 48h de exposição, respectivamente. A caracterização inicial dos extratos sugere uma eficiência nas condições de extrações, com rendimento em peso seco entre 14,53 mg e 34,50 mg, rendimento total entre 7,56% e 54,16%, e teores de proteínas solúveis entre 1,16 mg/mL e 2,30 mg/mL. As proteínas solúveis nos extratos possivelmente favoreceram o comprometimento da atividade enzimática das proteases do homogenato intestinal das larvas de A. aegypti, com atividade inibitória específica em EC (662,65 UI/mg), EA (226,19 UI/mg) e EM (496,11 UI/mg). As análises dos zimogramas revelaram a presença de bandas proteolíticas de peso molecular relativo alto (acima de 66 kDa), médio (entre 45 kDa e 30 Kda) e baixo (abaixo de 30 kDa), e que os extratos afetaram grupos distintos de proteases do homogenato das larvas. Os resultados indicam que a inibição das proteases intestinais pode compreender um dos modos de ação para a atividade larvicida dos extratos, em especial para o extrato EC. Testes complementares estão em andamento para confirmar essa relação.TCC Atividade leishmanicida do extrato e frações proteicas das sementes de Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers. Sobre os promastigotos de Leishmania infantum(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-06-26) Dantas Junior, Dalmo Monteiro; Uchôa, Adriana Ferreira; Martins, Daniella Regina Arantes; https://orcid.org/0000-0002-1350-5919; http://lattes.cnpq.br/3695151190501921; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0003-2998- 8887; http://lattes.cnpq.br/1622064885380087; Andrade Neto, Valter Ferreira de; https://orcid.org/0000-0002-9986-0865; http://lattes.cnpq.br/4863082845974813; Sá, Giulian César da Silva; https://orcid.org/0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038A leishmaniose, causada por protozoários do gênero Leishmania, possui diferentes formas clínicas, como a visceral, cutânea e mucocutânea. No Brasil, a forma visceral, a mais grave e majoritariamente causada por Leishmania infantum, destaca-se pela crescente gravidade devido à escassez de opções de tratamento, toxicidade dos fármacos e resistência. Nesse contexto, os extratos botânicos emergem como fontes promissoras de adjuvantes terapêuticos, devido ao seu vasto repertório de biomoléculas com reconhecida atividade biológica, como proteínas. Nesse estudo, foi avaliado o potencial leishmanicida dos extratos aquosos das sementes de Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers., uma leguminosa tropical conhecida como “timbó de caiena”. O potencial leishmanicida previamente confirmado por nosso grupo estimulou a investigação mais detalhada das frações desse extrato e seus possíveis modos de ação contra promastigotos de L. infantum. Os extratos foram obtidos por extração aquosa da farinha das sementes de T. toxicaria na proporção de 1:5 (p/v), seguida de fracionamento proteico por precipitação em sulfato de amônia, feitos na seguinte faixa de saturação: 0-25% (F1), 25-50% (F2), 50-75% (F3) e 75-100% (F4). Essas frações foram caracterizadas quanto ao teor de proteínas e compostos fenólicos, além de detecção de lectinas e inibidores de proteases (IPs). A atividade leishmanicida foi avaliada através do ensaio de redução da resazurina, expondo promastigotos de L. infantum a concentrações variáveis de extrato e frações, entre 1000 a 0,1 μg/mL. Os resultados revelam uma atividade leishmanicida maior nas frações do que no extrato bruto, possivelmente em razão da maior concentração de proteínas solúveis e IPs, atribuída ao método de fracionamento. As frações F2 a F4 exibiram um percentual de inibição acima de 50% na concentração de 0,1 μg/mL, a menor concentração testada, ultrapassando o extrato bruto, que chegou a 30% de inibição na mesma concentração. A análise morfológica revelou alterações nas estruturas celulares dos parasitos após o tratamento com as frações, incluindo irregularidades nas membranas plasmáticas e desorganização do flagelo, indicando um impacto na integridade celular. A fração F3 se destaca aqui pela presença de alterações em membrana e flagelo, sugerindo um efeito leishmanicida associado a processos fisiológicos essenciais a célula, que estão inibidos. Hipotetiza-se que a presença de IPs nas frações possa contribuir com a redução de viabilidade celular e as alterações morfológicas observadas, uma vez que as proteases desempenham papel fundamental na fisiologia de Leishmania. Investigações futuras contribuirão na validação desta hipótese e explorar o potencial de uso dessas frações e moléculas isoladas como candidatos ao desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.TCC Avaliação In Vitro da atividade antiplasmódica das lignanas em modelo de Plasmodium falciparum(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2019-06-07) Salzer, Ana Luíza Franco; Andrade Neto, Valter Ferreira de; Brenna Marceliane de Melo Marcelino; Uchôa, Adriana Ferreira; Souza, Maria de Fátima deA malária é uma doença infecciosa, de transmissão vetorial, causada por protozoários do gênero Plasmodium e caracterizada por febre alta, calafrios, dor de cabeça, anemia hemolítica e icterícia. Com o agravo do quadro clínico e ausência de tratamento, a malária pode evoluir para sua forma mais grave, causando danos sistêmicos e cerebrais, causando elevada morbi-mortalidade. No Brasil, a maioria dos casos de malária encontra-se no norte do país (região amazônica), onde o clima favorece a reprodução do mosquito transmissor e sobrevivência do protozoário. Entretanto, em estados da região extra-amazônica a ocorrência da malária importada representa uma grande preocupação devido aos elevados índices de letalidade e riscos de surtos. As espécies de interesse clínico e científico causadoras da malária humana são Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium knowlesi e Plasmodium simium. O tratamento medicamentoso ainda é a principal estratégia para o controle da malária, contudo o P. falciparum, vem adquirindo resistência aos antimaláricos usuais de maneira muito mais rápida que o desenvolvimento e implementação de novos fármacos utilizados contra a malária; sendo uma das prioridades da OMS o desenvolvimento de novos antimaláricos, que sejam eficazes, de baixo custo e que tenham novos alvos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar in vitro a atividade antiplasmódica de Lignanas contra o estágio intraeritrocítico assexuado de Plasmodium falciparum (cepa 3D7) e observamos uma redução expressiva no crescimento da cultura tratada com o composto. Sendo as LIG-C1, LIG-C2 e LIG-E1 as que tiveram melhores resultados na inibição do crescimento do Plasmodium falciparum.Artigo Biochemical characterisation of a kunitz-type inhibitor from tamarindus indica L. seeds and its efficacy in reducing plasma leptin in an experimental model of obesity(Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2018-01) Maciel, Bruna Leal Lima; Medeiros, Amanda Fernandes de; Costa, Izael de Sousa; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Kiyota, Sumika; Souza, Beatriz Blenda Pinheiro de; Sifuentes, Daniel Nogoceke; Serquiz, Raphael Paschoal; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoA trypsin inhibitor isolated from tamarind seed (TTI) has satietogenic effects in animals, increasing the cholecystokinin (CCK) in eutrophy and reducing leptin in obesity. We purified TTI (pTTI), characterised, and observed its effect upon CCK and leptin in obese Wistar rats. By HPLC, and after amplification of resolution, two protein fractions were observed: Fr1 and Fr2, with average mass of [M þ 14H]þ ¼ 19,594,690 Da and [M þ 13H]þ ¼ 19,578,266 Da, respectively. The protein fractions showed 54 and 53 amino acid residues with the same sequence. pTTI presented resistance to temperature and pH variations; IC50 was 2.7 1010mol.L1 and Ki was 2.9 1011mol.L1 . The 2-DE revealed spots with isoelectric points between pH 5 and 6, and one near pH 8. pTTI action on leptin decrease was confirmed. We conclude that pTTI is a Kunitz trypsin inhibitor with possible biotechnological health-related applicationTese Caracterização de uma nova exonuclease identificada em uma biblioteca metagenômica(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-03-27) Silva, Rita de Cássia Barreto da; Fuchs, Robert P.; ; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; ; http://lattes.cnpq.br/2488757427439903; Uchôa, Adriana Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Scortecci, Katia Castanho; ; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; Machado, Carlos Renato; ; http://lattes.cnpq.br/6306925202374274; Henriques, Joao Antonio Pêgas; ; http://lattes.cnpq.br/0251361943436465A abordagem metagenômica tem permitido o acesso ao material genético de microrganismos não cultivados e tem sido usada para identificação de novos genes. Apesar da importância dos mecanismos de reparo de DNA para a manutenção da integridade genômica nosso conhecimento sobre mecanismos de reparo de DNA é baseado em organismos modelo como E. coli e pouco é conhecido sobre os organismos de vida livre e não cultivados. Neste trabalho, a abordagem metagenômica foi aplicada para descobrir novos genes envolvidos com a manutenção da integridade genômica. Um clone positivo foi identificado por replicar a biblioteca metagenômica em meio seletivo contendo H2O2. O clone metagenômico foi capaz de complementar parcialmente a deficiência em reparo de DNA de cepas simples e duplo-mutantes de E.coli (recA e xthA nfo, respectivamente) submetidas ao estresse gerado por H2O2 e MMS.A análise de sequência mostrou uma ORF codificando para uma proteína hipotética membro da superfamília Exo_Endo_Phos (PF03372) e, a filogenia indicou que a mesma não está inclusa em nenhuma das subfamílias EEP. Assim, uma nova nuclease foi identificada e experimentalmente caracterizada in vivo e in vitro. Ensaios específicos utilizando a nuclease purificada e oligonucleotideos fluorescentemente marcados revelaram sua atividade 3´-5´exonuclease, em substratos simples e dupla-fita, dependente de Magnésio e sensível a EDTA. Uma vez que este é o primeiro relato e caracterização de uma enzima obtida a partir de abordagem metagenômica mostrando uma atividade exonuclease, foi nomeada EXOMEG1TCC Caracterização inicial dos extratos de Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers. quanto a atividade leishmanicida e toxicidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-02-15) Silva, Melissa Farias Alves da; Uchôa, Adriana Ferreira; Sá, Giulian César da Silva; https://orcid.org/ 0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038; https://orcid.org/ 0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-9931-2367; http://lattes.cnpq.br/7085509522800469; Salha, Daniella Regina Arantes Martins; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do; Silva, Kássia Jéssica Galdino da; http://lattes.cnpq.br/9304612925767591A leishmaniose é uma zoonose complexa causada por protozoários do gênero Leishmania, vetorizada por flebotomíneos que acometem humanos e outros vertebrados. Das opções terapêuticas disponíveis, os antimoniais pentavalentes são as intervenções de primeira escolha. No entanto, seu uso está associado a um alto custo, requer internação e acompanhamento médico de longo prazo, eventos adversos aos pacientes e ocorrência de resistência dos parasitas. Assim, novos adjuvantes quimioterápicos precisam ser disponibilizados e extratos vegetais têm sido relatados como fortes candidatos às terapias farmacológicas, pois concentram biomoléculas capazes de manifestar inúmeras atividades biológicas. O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial leishmanicida dos órgãos da leguminosa Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers (raízes, caules, folhas e sementes) contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis, a partir da obtenção de extratos aquosos e hidroetanólicos. Concentrações crescentes dos extratos (0,01 a 1,0 mg/mL) foram incubadas com os parasitos para determinação da inibição de seu crescimento e analisadas algumas classes de compostos químicos presentes nos extratos, com ênfase em proteínas e investigado os efeitos tóxicos dos extratos em ensaios de culturas de células. Dentre os extratos obtidos, o extrato hidroetanólico de folhas (FHA) se destaca como o mais ativo ao inibir aproximadamente 30% do crescimento parasitário na menor concentração investigada (0,01 mg/mL), rendendo uma IC50 = 0,47 mg/mL. Os ensaios de citotoxicidade sugerem que FHA não induz eventos tóxicos em fibroblastos embrionários de camundongos, linhagem celular 3T3 (CC50 = 2,66 mg/mL) e em linhagem imortalizada de hepatócito, HepG2 (CC50 = 1,60 mg/mL). As análises químicas preliminares sugerem que as condições de extração de FHA favoreceram a concentração de carboidratos, compostos fenólicos e proteínas, principalmente inibidores de protease, com massas moleculares estimadas entre 13 e 45 kDa. Os resultados indicam o potencial de T. toxicaria e seus extratos, principalmente FHA, como candidatos ao estudo para o desenvolvimento de formulações para intervenções terapêuticas na leishmaniose, devido a sua capacidade de inibir o crescimento dos parasitas em um intervalo de concentração sem eventos tóxicos contra HepG2 e 3T3.Artigo Characterization and pharmacological properties of a novel multifunctional kunitz inhibitor from erythrina velutina seeds(PloS One, 2013-05) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Machado, Richele Janaína Araújo; Monteiro, Norberto de Kássio Vieira; Migliolo, Ludovico; Silva, Osmar Nascimento; Pinto, Michele Flaviane Soares; Oliveira, Adeliana; Franco, Octávio Luiz; Kiyota, Sumika; Bemquerer, Marcelo Porto; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dosInhibitors of peptidases isolated from leguminous seeds have been studied for their pharmacological properties. The present study focused on purification, biochemical characterization and anti-inflammatory and anticoagulant evaluation of a novel Kunitz trypsin inhibitor from Erythrina velutina seeds (EvTI). Trypsin inhibitors were purified by ammonium sulfate (30–60%), fractionation followed by Trypsin-Sepharose affinity chromatography and reversed-phase high performance liquid chromatography. The purified inhibitor showed molecular mass of 19,210.48 Da. Furthermore, a second isoform with 19,228.16 Da was also observed. The inhibitor that showed highest trypsin specificity and enhanced recovery yield was named EvTI (P2) and was selected for further analysis. The EvTI peptide fragments, generated by trypsin and pepsin digestion, were further analyzed by MALDI-ToF-ToF mass spectrometry, allowing a partial primary structure elucidation. EvTI exhibited inhibitory activity against trypsin with IC50 of 2.261028 mol.L21 and constant inhibition (Ki) of 1.061028 mol.L21 , by a non-competitive mechanism. In addition to inhibit the activity of trypsin, EvTI also inhibited factor Xa and neutrophil elastase, but do not inhibit thrombin, chymotrypsin or peptidase 3. EvTI was investigated for its anti-inflammatory and anticoagulant properties. Firstly, EvTI showed no cytotoxic effect on human peripheral blood cells. Nevertheless, the inhibitor was able to prolong the clotting time in a dose-dependent manner by using in vitro and in vivo models. Due to antiinflammatory and anticoagulant EvTI properties, two sepsis models were here challenged. EvTI inhibited leukocyte migration and specifically acted by inhibiting TNF-a release and stimulating IFN-a and IL-12 synthesis. The data presented clearly contribute to a better understanding of the use of Kunitz inhibitors in sepsis as a bioactive agent capable of interfering in blood coagulation and inflammationArtigo Determinação da atividade antitríptica em proteínas de produtos do amendoim isoladas por cromatografia de afinidade(Quimica Nova, 2014) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Araújo, Jéssica Morais de; Alves, Jussara Cristina; Peixoto, Thayane Kerbele Oliveira das Neves; Medeiros, Amanda Fernandes de; Machado, Richele Janaína de Araújo; Serquiz, Alexandre Coelho; Neves, Renata Alexandra Moreira das; Santos, Elizeu Antunes dos; Uchôa, Adriana FerreiraThe peanut is an oleaginous plant of high nutritional value, a source of protein and a trypsin inhibitor. Trypsin inhibitors are proteins present in the vegetable kingdom, considered anti-nutritional factors for animals. However, there have been several recent reports about their heterologous and beneficial effects on human health. These important effects have been the focus of studies investigating these inhibitors in foods. The aim of the present study was to isolate and determine the estimated molecular mass and specific inhibitory activity, for trypsin in the Japanese peanut, peanut butter, and peanut nougat using the techniques of precipitation with ammonium sulfate and affinity chromatography on trypsin - Sepharose CNBr 4B. The techniques used in this study were efficient for isolating the protein inhibitors with antitryptic specific activity of 694 UI mg-1, 823 UI mg-1 and 108 UI mg-1 for the Japanese peanut, peanut nougat, and peanut butter, respectively. The techniques featured high selectivity of the adsorbent, with consequent efficiency in isolation, given the low amount of dosed proteins and specific antitryptic activity presented by the products studied. The various health-related benefits show the importance of detecting and isolating efficient trypsin inhibitors in foods, taking into account the health claims attributed to the vegetable and its high consumption by humansTCC Estudo do potencial larvicida do extrato aquoso das sementes de Bauhinia cheilantha (Bong.) Steud contra vetores de arboviroses(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-03-08) Amorim, Rian Mendes de; Uchôa, Adriana Ferreira; Bezerra, Pedro Vitor Vale; https://orcid.org/0000-0002-8674-6959; http://lattes.cnpq.br/0567529774568955; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0003-2148-2056; http://lattes.cnpq.br/3315087700284916; Sá, Giulian César da Silva; https://orcid.org/0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038; Ximenes, Maria de Fátima Freire de Melo; https://orcid.org/0000-0001-7173-5416; http://lattes.cnpq.br/4231925509338101O aumento da incidência de arboviroses, doenças causadas por vírus transmitidos por artrópodes, como dengue, Zika e Chikungunya, disseminadas por mosquitos vetores, incluindo Aedes aegypti e Aedes albopictus, tem intensificado a busca por novas estratégias de controle vetorial. Diante das limitações dos inseticidas químicos, como seu impacto ambiental, efeito em organismos não alvo e o surgimento de vetores resistentes, os extratos botânicos se destacam como fontes promissoras de moléculas bioinseticidas com maior biodegradabilidade, baixo custo e segurança ambiental. Nesse contexto, o presente estudo investigou o potencial larvicida do extrato aquoso das sementes de Bauhinia cheilantha, uma leguminosa popularmente conhecida por mororó, ocorrente no Nordeste brasileiro, para obtenção de um bioinseticida candidato ao controle das larvas de A. aegypti e A. albopictus. As sementes foram pulverizadas em moinho elétrico para obtenção de uma farinha de granulação fina (peneirada em peneira de malha de 40 mesh), homogeneizada em água destilada (1:10) e submetida a extração aquosa (80 °C) por 3 h. Em seguida o extrato nomeado EAM foi liofilizado e posteriormente submetido a avaliação da atividade larvicida, determinação do teor de proteínas solúveis totais e peso seco. Larvas no estágio L4 de A. aegypti e A. albopictus foram expostas a diferentes concentrações do extrato em bioensaios realizados em quintuplicata, com mortalidade avaliada após 24 e 48 horas. Os valores de CL50 e CL90 foram calculados utilizando análise Probit. Adicionalmente, análises morfológicas foram conduzidas para identificar alterações estruturais nas larvas. Os resultados demonstraram que o extrato apresenta atividade larvicida com baixas concentrações letais de 0,14 à 0,91 mg/mL e promoveu um encurtamento abdominal nas larvas. Os resultados indicam que o extrato aquoso das sementes B. cheilantha (EAM) apresentam potencial para o desenvolvimento de produtos bioinseticidas para controle vetorial de A. aegypti e A. albopictus, no entanto, são necessários estudos mais aprofundados quanto a composição do extrato e identificação do agente (s) ativo (s), modo de ação larvicida e para a compreensão do impacto do extrato em outros estágios do ciclo de vida do mosquito.Artigo Gastroprotective and antielastase effects of protein inhibitors from Erythrina velutina seeds in an experimental ulcer model(Biochemistry and Cell Biology, 2017-04) Maciel, Bruna Leal Lima; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Machado, Richele Janaína de Araújo; Monteiro, Norberto Kássio Vieira; Lyra, Ibson Lucas de; Camillo, Christina da Silva; Serquiz, Alexandre Coelho; Oliveira, Adeliana Silva de; Rufino, Fabíola Patrícia da Silva; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoTrypsin and chymotrypsin inhibitors from Erythrina velutina seeds have been previously isolated by our group. In previous studies using a sepsis model, we demonstrated the antitumor and anti-inflammatory action of these compounds. This study aimed to evaluate the gastroprotective and antielastase effects of protein inhibitors from E. velutina seeds in an experimental stress-induced ulcer model. Two protein isolates from E. velutina seeds, with antitrypsin (PIAT) and antichymotrypsin (PIAQ) activities, were tested. Both protein isolates showed a high affinity and inhibitory effect against human neutrophil elastase, with 84% and 85% inhibition, respectively. Gastric ulcer was induced using ethanol (99%) in 6 groups of animals (female Wistar rats, n = 6). Before ulcer induction, these animals were treated for 5 days with one of the following: (1) PIAT (0.2 mg·kg−1), (2) PIAT (0.4 mg·kg−1), (3) PIAQ (0.035 mg·kg−1), (4) ranitidine hydrochloride (50 mg·kg−1), (5) saline solution (0.9%), or (6) no intervention (sham). Both PIAT and PIAQ protected gastric mucosa, preventing hemorrhagic lesions, edema, and mucus loss. No histologic toxic effects of PIAT or PIAQ were seen in liver and pancreatic cells. Our results show that protein isolates from E. velutina seeds have potential gastroprotective effects, placing these compounds as natural candidates for gastric ulcer preventionArtigo A lactose-binding lectin from the marine sponge cinachyrella apion (Cal) induces cell death in uuman cervical adenocarcinoma cells(Marine Drugs, 2012-03) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Rabelo, Luciana; Monteiro, Norberto de Kássio Vieira; Serquiz, Raphael Paschoal; Santos, Paula; Oliveira, Ruth; Oliveira, Adeliana Silva de; Rocha, Hugo; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dosCancer represents a set of more than 100 diseases, including malignant tumors from different locations. Strategies inducing differentiation have had limited success in the treatment of established cancers. Marine sponges are a biological reservoir of bioactive molecules, especially lectins. Several animal and plant lectins were purified with antitumor activity, mitogenic, anti-inflammatory and antiviral, but there are few reports in the literature describing the mechanism of action of lectins purified from marine sponges to induce apoptosis in human tumor cells. In this work, a lectin purified from the marine sponge Cinachyrella apion (CaL) was evaluated with respect to its hemolytic, cytotoxic and antiproliferative properties, besides the ability to induce cell death in tumor cells. The antiproliferative activity of CaL was tested against HeLa, PC3 and 3T3 cell lines, with highest growth inhibition for HeLa, reducing cell growth at a dose dependent manner (0.5–10 µg/mL). Hemolytic activity and toxicity against peripheral blood cells were tested using the concentration of IC50 (10 µg/mL) for both trials and twice the IC50 for analysis in flow cytometry, indicating that CaL is not toxic to these cells. To assess the mechanism of cell death caused by CaL in HeLa cells, we performed flow cytometry and western blotting. Results showed that lectin probably induces cell death by apoptosis activation by pro-apoptotic protein Bax, promoting mitochondrial membrane permeabilization, cell cycle arrest in S phase and acting as both dependent and/or independent of caspases pathway. These results indicate the potential of CaL in studies of medicine for treating cancerTese Lectina manganês-dependente da peçonha de bothrops moojeni com atividade bacteriostática: isolamento e caracterização(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-10-15) Nunes, Ellynes Amancio Correia; Migliolo, Ludovico; Luna, Karla Patrícia de Oliveira; https://orcid.org/0000-0002-6027-9109; http://lattes.cnpq.br/0781953872281542; Uchôa, Adriana Ferreira; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Santos, Elizeu Antunes dos; Zuliani, Juliana Pavan; Franco, Octávio LuizA rica diversidade de moléculas bioativas presentes em peçonhas de animais oferece um vasto potencial para o desenvolvimento de novos fármacos. As peçonhas ofídicas são um complexo de molecular proteico, cuja diversidade de toxinas e seus mecanismos de ação explicam a variedade de manifestações clínicas observadas em envenenamentos por serpentes. O estudo das proteínas da peçonha ofídica permite explorar suas atividades biológicas. Nesse contexto, objetivou-se investigar o potencial biotecnológico de lectinas presentes na peçonha de Bothrops moojeni. A partir da revisão bibliográfica sobre lectinas ofídicas, foi formulada a hipótese de que essas proteínas podem apresentar atividades antibióticas. Para testar essa hipótese, foram realizados o isolamento, a caracterização bioquímica e a avaliação das atividades biológicas de uma lectina purificada da peçonha. O isolamento e identificação da lectina foi realizado por cromatografia de exclusão molecular em coluna de Sephacryl S-100, equilibrada com tampão bicarbonato de amônio 50 mM e pH 7,8, com vazão de 680 µL.min-1. As frações com atividade hemaglutinante foram submetidas a cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa em coluna C18, utilizando um gradiente linear de acetonitrila e água em ácido trifluoroacético 0,1% como fase móvel. A pureza da proteína foi avaliada por eletroforese em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 12,5%, sob condições redutoras. A presença de lectinas nas diferentes frações foi monitorada pela atividade hemaglutinante utilizando eritrócitos humanos a 2% (v/v) em PBS. A determinação de especificidade e dependência de íons foi investigada por hemaglutinação na presença de diferentes açúcares e íons, respectivamente. A influência do pH e temperatura na atividade hemaglutinante foi investigada em uma faixa de pH de 2 a 11, temperaturas de -4 a 100°C. A atividade hemolítica foi avaliada pela liberação de hemoglobina de eritrócitos de sangue humano tipo A, em uma concentração de 2% v:v, utilizando o método de espectrofotometria a 425 nm. A atividade antibacteriana contra Acinetobacter baumannii e Staphylococcus aureus foi determinada por ensaios modificados de inibição do crescimento por micro diluição em caldo. A formação de biofilme foi quantificada pelo método de cristal violeta. A cromatografia de exclusão molecular resultou em um perfil com seis frações proteicas distintas. A análise por ensaios de hemaglutinação revelou que as frações 5 e 6 apresentavam atividade hemaglutinante. A fração 5, com maior atividade, foi denominada BmoojL. A caracterização bioquímica da lectina BmoojL revelou que sua atividade é dependente de manganês e inibida por diversos monossacarídeos, como glicose, frutose e manose. Além disso, a proteína mostrou-se estável em uma ampla faixa de pH (5-9) e temperatura (até 80°C). BmoojL não foi hemolítica nas concentrações avaliadas (31,25-500 µg. mL-1), com porcentagem de hemólise abaixo de 10%. Os ensaios antibacterianos mostraram que apesar de não ter atingido a concentração inibitória mínima, BmoojL reduziu o crescimento bacteriano de A. baumannii a partir da concentração de 64 µg.mL-1 sendo, portanto, bacteriostática. O ensaio antibiofilme mostrou que para S. aureus, BmoojL foi efetivo, reduzindo consideravelmente o crescimento do biofilme em todas as concentrações testadas (16 - 512 µg.mL-1) em cerca de 50%. Dessa forma, o estudo permitiu isolar uma molécula com atividade lectínica manganês dependente com potencial para exercer atividade bacteriostática e antibiofilme, contribuindo para a pesquisa de moléculas bioativas derivadas de serpentes peçonhentas. Embora haja alguns estudos envolvendo tais moléculas e suas atividade heterólogas, quando comparado a outros grupos moleculares, o estudo envolvendo as lectinas de serpentes é uma área ainda pouco explorada, e esses achados mostram o que ainda há para se conhecer acerca destas moléculas e direcionar e propor novas atividades que venham somar as pesquisas biotecnológicas envolvendo esses grupos animais.Tese Mosquitos vetores (Diptera: Culicidae) do semiárido brasileiro: fatores bioecológicos e socioepidemiológicos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-08-31) Inácio, Cássio Lázaro Silva; Ximenes, Maria de Fátima Freire de Melo; http://lattes.cnpq.br/4231925509338101; http://lattes.cnpq.br/4910533645616566; Uchôa, Adriana Ferreira; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Soriano, Eliane Marinho; http://lattes.cnpq.br/2017823516741199; Cavalcanti, Marília Gabriela dos Santos; http://lattes.cnpq.br/7178584065878686; Barbosa, Patricia Batista Barra Medeiros; http://lattes.cnpq.br/6945268593644384Os mosquitos são insetos presentes em todo o planeta. Atualmente são conhecidas cerca de 3.578 espécies. No Brasil, são relatadas cerca de 530 espécies de mosquitos, dentre estas, algumas são consideradas vetores de patógenos causadores de doenças. Estima-se que na Caatinga, bioma exclusivamente brasileiro, ocorrem cerca de 80 espécies. No estado brasileiro do Rio Grande do Norte já foram registradas 76 espécies. A alimentação sanguínea, por parte das fêmeas, acaba propiciando a infecção e transmissão de agentes patogênicos. O Rio Grande do Norte vem sofrendo ao longo dos anos com epidemias de Dengue, Zika e Chikungunya, doenças cujo principal vetor é o Aedes aegypti. Os estudos sobre a fauna de mosquitos no estado ainda são escassos, necessitando assim de mais pesquisas para uma melhor compreensão das relações destes insetos na transmissão de patógenos e com o meio ambiente. Neste sentido, o presente trabalho buscou inventariar a fauna de culicídeos no município de Currais Novos em área urbana e natural preservada, objetivando a compreensão das interações bioecológicas e socioepidemiológicas. No meio urbano, foi realizado o monitoramento mensal da população de Aedes aegypti com a utilização de ovitrampas. As armadilhas foram instaladas e no intradomicílio, equidistantes cerca de 300 m, instaladas e expostas durante sete dias e depois substituídas. Foram calculados os índices de Positividade de Ovitrampas (IPO), de Densidade de Ovos (IDO) e da Média de Ovos (IMO) para cada período estudado, os quais são importantes para o entendimento da dinâmica populacional e período reprodutivo de mosquitos. Um total de 92.340 ovos foram coletados durante o estudo, entre maio de 2018 e março de 2020. O índice de positividade de ovitrampas apresentou correlação positiva com a precipitação. A pesquisa viral em insetos adultos oriundos dos ovos coletados, revelou um possível novo vírus específico de insetos, por métodos de inferência filogenética: Máxima Verossimilhança, Máxima Parcimônia e Neighbor-Joining. Em ambiente de mata, ovos, larvas, pupas e adultos foram investigados. As coletas de ovos ocorreram por meio de ovitrampas. Os imaturos, por busca ativa em criadouros naturais e os insetos adultos com armadilha de Shannon. Todas as coletas ocorreram uma vez por mês, na área preservada no período de abril de 2017 a março de 2020 no Cânion dos Apertados em Currais Novos. Um total de 15 táxons foram encontrados, sendo 14 de imaturos e 13 de mosquitos adultos. A correlação dos insetos com as variáveis climáticas locais foi constatada, tendo a temperatura como componente climático preponderante. Para os imaturos foram registrados 14 tipos de criadouros naturais. Foram coletados 2.342 mosquitos adultos entre às 17h-20h. No entanto, apenas exemplares da espécie silvestre Haemagogus spegazzinii foram encontrados infectados por arbovírus, vírus dengue tipo 2. A postura de ovos deste mosquito é realizada principalmente durante o período cuja pluviosidade é mais intensa, e esses ovos podem resistir por até 380 dias no ambiente. O desenvolvimento de Hg. spegazzinii dura em torno de 14 dias, da eclosão até a fase adulta, podendo estes apresentar 3 morfotipos além do padrão clássico para a espécie. Relatamos o primeiro registro da espécie Hg. spegazzinii em meio urbano, e presença de Ae. albopictus no município de Currais Novos-RN. Desse modo, o presente trabalho acrescenta novas informações sobre os mosquitos da caatinga e contribui para o entendimento de sua biologia e estratégias de sobrevivência no semiárido em meio urbano e natural. Neste aspecto, o monitoramento das populações de mosquitos pode auxiliar em políticas públicas para o controle e combate destes insetos a partir do conhecimento sobre os nichos, bioecologia, frequência, abundância e sazonalidade dos mosquitos.Tese Potencial biotecnológico de bactérias isoladas a partir de consórcios provenientes de água de produção em reservatórios de petróleo no Brasil(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2021-12-22) Castro, Jenielly de Noronha Ferreira de; Lima, Lucymara Fassarella Agnez; http://lattes.cnpq.br/1083882171718362; http://lattes.cnpq.br/4357187902075718; Uchôa, Adriana Ferreira; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; Sousa Júnior, Francisco Canindé de; http://lattes.cnpq.br/3721560802857426; Passaglia, Luciane Maria Pereira; http://lattes.cnpq.br/3496070172209437; Vainstein, Marilene Henning; http://lattes.cnpq.br/1152828531273019Durante os processos extrativos de petróleo e gás ocorre também a formação da água de produção, que é composta por matéria orgânica e inorgânica, além de microrganismos. A microbiota desse ambiente, adaptada a condições extremas, apresenta grande potencial para aplicação em processos biotecnológicos, tais como a biorremediação e/ou MEOR (Microbial Enhance Oil Recovery). Dentro desse contexto, este estudo visou o isolamento, identificação e caracterização de bactérias provenientes de três consórcios, previamente obtidos a partir de água de produção. Um total de 16 bactérias foram isoladas, sendo quinze delas selecionadas para a caracterização metabólica a partir de ensaios funcionais. Os isolados foram selecionados de acordo com a capacidade de utilizar hidrocarbonetos como fonte de carbono. Para isso, curvas de crescimento foram elaboradas utilizando meio mínimo suplementado com petróleo como única fonte de carbono. Considerando avaliar a degradação de hidrocarbonetos, o teste com indicador redox 2,6 - DCPIP (2,6-Dichlorophenolindophenol) foi empregado e ensaios como o Índice de Emulsificação, colapso da gota e dispersão do óleo foram aplicados para avaliação da produção de biossurfactantes/bioemulsificantes. Os resultados obtidos a partir dos ensaios de degradação confirmaram a capacidade de quinze isolados utilizarem o petróleo e outros hidrocarbonetos como única fonte de carbono. Os testes realizados para produção de biossurfactantes confirmaram a capacidade desses 15isolados em produzir biossurfactantes e/ou formar emulsão. Com base na sequência do gene 16S os isolados foram identificados como pertencentes aos gêneros Bacillus pumillus/safensis, Acinetobacter baumanii, Staphylococcus cohnii, Ochrobactrum e Citrobacter amalonaticus. Dentre os isolados, quatro foram selecionados e tiveram seus genomas sequenciados, sendo identificados como Bacillus safensis (2), Ochrobactrum (1) e Acinetobacter baumanii (1). O isolado AP1BH01-1, classificado como membro do gênero Ochrobactrum, foi designado como uma nova espécie, uma vez que ele não se agrupa com outra espécie do gênero. Os genomas dos isolados sequenciados apresentaram grande diversidade de genes cujos produtos estão envolvidos na degradação de hidrocarbonetos alifáticos e aromáticos, bem como genes codificadores de proteínas envolvidas na síntese de biossurfactantes e bioemulsificantes. Diversos genes relacionados a produtos que conferem resistência a metais pesados também foram identificados. Os dados obtidos através dos ensaios funcionais e mineração do genoma dos isolados revelaram perfis promissores em processos de degradação de hidrocarbonetos e produção de biossurfactantes para aplicação em biorremediação de ambientes contaminados com hidrocarbonetos e/ou aplicação em MEOR para melhorar a extração em poços maduros.Dissertação Prospecção de atividade antifúngica e potencial modulador para fármacos de referência em extratos e frações de Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers.(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-05-09) Silva, Melissa Farias Alves da; Uchôa, Adriana Ferreira; Silva, Giulian César da; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-9931-2367; http://lattes.cnpq.br/7085509522800469; Taveira, Gabriel Bonan; Scortecci, Katia Castanho; Arantes, Thales DomingosOs fungos patogênicos são um dos principais contribuintes para o crescimento da taxa de mortalidade global associada a doenças infecciosas e o uso indiscriminado de agentes antibióticos e antifúngicos compromete a eficácia do fármaco pelo desenvolvimento de resistência aos patógenos. Além disso, os fármacos de uso clínico podem ocasionar efeitos adversos em organismos não-alvo. Neste cenário, os extratos botânicos e suas frações têm se revelado como fontes promissoras para o desenvolvimento de novos antifúngicos e adjuvantes terapêuticos. No qual, a Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers., uma leguminosa bem adaptada ao semiárido nordestino, tem se destacado por seu biopotencial. Neste contexto, a presente pesquisa objetivou investigar o potencial antifúngico de extratos e frações proteicas obtidas de sementes de T. toxicaria contra Candida albicans, Candida parapsilosis, Cryptococcus gattii e Cryptococcus neoformans, e a sua atividade moduladora para antimicrobianos de referência. Os extratos e frações obtidas pelos métodos de Scopes e Osborne foram parcialmente caracterizados bioquimicamente e avaliados quanto sua atividade antifúngica pela determinação das CIMs (Concentração Inibitória Mínima). Posteriormente a fração mais ativa e suas combinações foram também investigadas quanto sua atividade moduladora com fármacos de uso clínico, através do método de associação (checkerboard) por ICIF (Índice de Concentração Inibitória Fracionada) e por modelos matemáticos. Dos 2 extratos e 13 frações produzidos, todos apresentaram atividade antifúngica contra pelo menos uma das leveduras testadas, em diferentes graus. Em destaque, a fração T 50-75 foi a mais ativa sobre C. gattii, C. neoformans e C. parapsilosis e apresentou a Menor Concentração capaz de Inibir 100% do crescimento (CIM100), com 32 µg/mL contra C. gattii (R-265), seguido do extrato da Semente em Tampão Tris-HCl (ST) com 128 µg/mL e das frações T 50-75 e T 75-100 com 256 µg/mL, todos contra C. gattii (FC1). Portanto, o extrato ST e as frações T 50-75 e T 75-100 foram os mais promissores ao apresentarem os menores valores de CIM e por isso foram selecionadas para investigação do seu potencial modulador em combinação com Anfotericina B, Fluconazol e 5-Flucitosina sobre C. gattii. Todas as combinações testadas foram capazes de reduzir a CIM e após harmonização dos dados, as combinações entre as frações T 50-75 e T 75-100 com Anfotericina B e Fluconazol foram classificadas como sinérgicas e as combinações com a fração T 50-75 apresentaram maior sensibilidade (93%) e grau de intensidade sinérgica. A combinação da fração T 50-75 com os fármacos causou maiores interferências na curva de crescimento, na melanização e significativa redução do tamanho da cápsula. Entretanto, a exposição de C. gattii ao tratamento com a fração T 50-75 isolada também causou alterações morfológicas na parede celular e cápsula, indicando que a fração contribuiu fortemente para o resultado observado na combinação com o fármaco. Portanto, a fração T 50-75 se apresenta como uma candidata promissora ao desenvolvimento de adjuvantes e/ou novos fármacos para a quimioterapia antifúngica. A análise dos resultados sugere que a ação fungistática da fração T 50-75 pode contribuir para minimizar o surgimento de resistência no patógeno, agindo em vias redundantes e reduzindo as concentrações efetivas dos fármacos de referência clínica, melhorando, assim, o tratamento e minimizando a toxicidade gerada.Artigo Safety and potential functionality of nanoparticles loaded with a trypsin inhibitor isolated from tamarind seeds(Elsevier, 2020) Morais, Ana Heloneida Araújo; Costa, Rafael Oliveira de Araújo; Matias, Lídia Leonize Rodrigues; Passos, Thaís Souza; Queiroz, Jaluza Luana Carvalho de; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Maciel, Bruna Leal Lima; Uchôa, Adriana Ferreira; Amado, Isabel Rodríguez; Gonçalves, Catarina; Pastrana, Lorenzo; https://orcid.org/0000-0002-6460-911XThe trypsin inhibitor isolated from tamarind seeds(TTI) presentssatietogenic and anti-inflammatory effects. In the present study, TTI encapsulation by nanoprecipitation in purified chitosan and whey protein isolate (ECW) was performed to maintain TTI’s integrity and protection through the gastrointestinal tract. The interaction between TTI and the encapsulating agents was determined by filtration monitoring the antitrypsin activity. Cytotoxicity was evaluated at different concentrations (0.5, 2.5 and 5.0 mg/mL) in Caco-2 and CCD-18Co cells. Subacute blood toxicity was evaluated in Wistar rats (12.5 mg/kg) for ten days. The particles presented a smooth surface, with 118.00 (17.27) nm of diameter, 0.37 (0.02) of polydispersity index, -38.26 (0.15) mV (neutral pH) of sur face charge, and 95.31 (0.31)% of incorporation efficiency. At neutral pH, there was a strong interaction of the encapsulating agents and TTI, and a gradual release of TTI at pH 3.0. Cell viability (> 70%) evaluation, in vivo biochemical and hepatic parameters of Wistar rats showed the absence of toxic effects of the nanoparticles with TTI. The study showed that TTI nanoparticles are potentially safe and represent a promising formulation for the clinical application of TTI and may become an option as a novel ingredient in foodArtigo Supplementation with a new trypsin inhibitor from peanut is associated with reduced fasting glucose, weight control, and increased plasma CCK secretion in an animal model(Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2016-02) Maciel, Bruna Leal Lima; Serquiz, Alexandre Coelho; Machado, Richele Janaína de Araújo; Serquiz, Raphael Paschoal; Lima, Vanessa Cristina Oliveira; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Carneiro, Marcella Araújo do Amaral; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoIngestion of peanuts may have a beneficial effect on weight control, possibly due to the satietogenic action of trypsin inhibitors. The aim of this study was to isolate a new trypsin inhibitor in a typical Brazilian peanut sweet (pac¸oca) and evaluate its effect in biochemical parameters, weight gain and food intake in male Wistar rats. The trypsin inhibitor in peanut pac¸oca (AHTI) was isolated. Experimental diets were prepared with AIN-93G supplemented with AHTI. Animals had their weight and food intake monitored. Animals were anesthetized, euthanized, and their bloods collected by cardiac puncture for dosage of cholecystokinin (CCK) and other biochemical parameters. Supplementation with AHTI significantly decreased fasting glucose, body weight gain, and food intake. These effects may be attributed to increased satiety, once supplemented animals showed no evidence of impaired nutritional status and also because AHTI increased CCK production. Thus, our results indicate that AHTI, besides reducing fasting glucose, can reduce weight gain via food intake reductionArtigo A trypsin Inhibitor from tamarind reduces food intake and improves inflammatory status in rats with metabolic syndrome regardless of weight loss(Nutrients, 2016-09) Maciel, Bruna Leal Lima; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Costa, Izael de Souza; Medeiros, Amanda Fernandes de; Serquiz, Alexandre Coelho; Lima, Maíra Conceição Jerônimo de Souza; Serquiz, Raphael Paschoal; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoTrypsin inhibitors are studied in a variety of models for their anti-obesity and anti-inflammatory bioactive properties. Our group has previously demonstrated the satietogenic effect of tamarind seed trypsin inhibitors (TTI) in eutrophic mouse models and anti-inflammatory effects of other trypsin inhibitors. In this study, we evaluated TTI effect upon satiety, biochemical and inflammatory parameters in an experimental model of metabolic syndrome (MetS). Three groups of n = 5 male Wistar rats with obesity-based MetS received for 10 days one of the following: (1) Cafeteria diet; (2) Cafeteria diet + TTI (25 mg/kg); and (3) Standard diet. TTI reduced food intake in animals with MetS. Nevertheless, weight gain was not different between studied groups. Dyslipidemia parameters were not different with the use of TTI, only the group receiving standard diet showed lower very low density lipoprotein (VLDL) and triglycerides (TG) (Kruskal–Wallis, p < 0.05). Interleukin-6 (IL-6) production did not differ between groups. Interestingly, tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) was lower in animals receiving TTI. Our results corroborate the satietogenic effect of TTI in a MetS model. Furthermore, we showed that TTI added to a cafeteria diet may decrease inflammation regardless of weight loss. This puts TTI as a candidate for studies to test its effectiveness as an adjuvant in MetS treatmentArtigo Trypsin inhibitor from tamarindus indica L. seeds reduces weight gain and food consumption and increases plasmatic cholecystokinin levels(Clinics, 2015-02) Maciel, Bruna Leal Lima; Ribeiro, Joycellane Alline do Nascimento Campos; Serquiz, Alexandre Coelho; Silva, Priscila Fabíola dos Santos; Barbalho, Patrícia Batista Barra Medeiros; Sampaio, Tarcísio Bruno Montenegro; Araújo, Raimundo Fernandes de; Oliveira, Adeliana Silva de; Machado, Richele Janaina Araújo; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoObjectives: Seeds are excellent sources of proteinase inhibitors, some of which may have satietogenic and slimming actions. We evaluated the effect of a trypsin inhibitor from Tamarindus indica L. seeds on weight gain, food consumption and cholecystokinin levels in Wistar rats. Methods: A trypsin inhibitor from Tamarindus was isolated using ammonium sulfate (30–60%) following precipitation with acetone and was further isolated with Trypsin-Sepharose affinity chromatography. Analyses were conducted to assess the in vivo digestibility, food intake, body weight evolution and cholecystokinin levels in Wistar rats. Histological analyses of organs and biochemical analyses of sera were performed. Results: The trypsin inhibitor from Tamarindus reduced food consumption, thereby reducing weight gain. The in vivo true digestibility was not significantly different between the control and Tamarindus trypsin inhibitortreated groups. The trypsin inhibitor from Tamarindus did not cause alterations in biochemical parameters or liver, stomach, intestine or pancreas histology. Rats treated with the trypsin inhibitor showed significantly elevated cholecystokinin levels compared with animals receiving casein or water. Conclusion: The results indicate that the isolated trypsin inhibitor from Tamarindus reduces weight gain by reducing food consumption, an effect that may be mediated by increased cholecystokinin. Thus, the potential use of this trypsin inhibitor in obesity prevention and/or treatment should be evaluated