Navegando por Autor "Santos, Elizeu Antunes dos"
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Dissertação Ação Sacietogênica de um inibidor de tripsina da semente de tamarindo (Tamarindus indica L.)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-02-19) Ribeiro, Joycellane Alline do Nascimento Campos; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null; ; Vasconcelos, Ilka Maria; ; http://lattes.cnpq.br/0103197383336584; Sousa, Jacira Maria Andrade de; ; http://lattes.cnpq.br/7638624358027104As sementes são excelentes fontes de inibidores de proteinases, e a estes têm sido atribuído inúmeras aplicações. Dentre estas aplicações estão as com efeito sobre o consumo alimentar e o ganho de peso que se destacam devido o crescente aumento de indivíduos obesos. Esse estudo avaliou os efeitos do inibidor de tripsina presente na semente de tamarindo (Tamarindus indica L.) sobre o ganho de peso e parâmetros bioquímicos e morfohistológicos de órgãos de ratos wistar. Para isso, foi parcialmente purificado um inibidor de tripsina de semente de tamarindo (ITT2). Este na concentração de 25 mg/Kg de peso, num período de 11 dias, foi capaz de reduzir o consumo alimentar de ratos em cerca de 47%, ocasionando uma redução no ganho de peso de aproximadamente 70% quando comparado com o grupo controle. Com a avaliação da digestibilidade proteica in vivo foi possível demonstrar que os animais perderam peso devido à saciedade, apresentada pela redução do consumo alimentar, visto que não houve variações significativas da digestibilidade verdadeira entre o grupo controle (90,7%) e o grupo tratado com inibidor (89,88%). Além disso, o sangue dos animais foi coletado a fim de serem avaliados os efeitos do ITT2, sobre parâmetros bioquímicos (glicose, triglicerídeos, colesterol total, lipoproteínas de alta-densidade, lipoproteína de baixa-densidade, alanina amino transferase, aspartato amino transferase, gama glutamil transferase, albumina, globulina, proteínas totais e proteína C reativa) e estes não apresentaram variações significativas. Os órgãos, fígado, estômago, intestino, além do pâncreas, não apresentaram alterações. Para avaliar se o efeito do ITT2 sobre o consumo alimentar devido à saciedade seria acompanhado pelo aumento de colecistocinina (CCK), foram dosados os seus níveis plasmáticos, e observado que os níveis de CCK nos animais que receberam ITT2 eram significativamente maiores (20 + 1,22) do que nos animais que receberam apenas caseína (10,14 + 2,9) ou água (5,92 + 1,15). Dessa forma, os resultados obtidos, indicam que o ITT2 causou um efeito sacietogênico, reduzindo o consumo alimentar, que por sua vez ocasionou uma redução no ganho de peso nos animais, porém sem causar alterações bioquímicas ou morfohistológicas, efeito este acompanhado pela elevação nos níveis plasmáticos de CCKTese Ações antibacteriana, moduladora de antibióticos e antiproteásicas de frações proteicas da semente de catingueira (Poincianella pyramidalis Tul.)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-08-30) Cruz, Joelton Igor Oliveira da; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0001-5751-7682; http://lattes.cnpq.br/2448189217304566; Câmara, Rafael Barros Gomes da; Veras, Bruno Oliveira de; Oliveira, Maria Tatiana Alves; Santos, Paula Ivani Medeiros dosA resistência bacteriana, bem como os distúrbios inflamatórios, são problemas de saúde pública expressivos que levam milhares de pessoas aos hospitais todos os anos, sendo muitas vezes necessários vários dias de internação para o tratamento, gerando custos excessivos e, por vezes, sem resolução do problema. Considerando a importância da descoberta de novas substâncias que mitiguem esses problemas, este trabalho teve como objetivo avaliar o extrato bruto e frações proteicas da semente de Poincianella pyramidalis (Tul.) quanto às atividades antibacteriana, moduladora de antibióticos, e inibitória de proteases. Os extratos proteicos foram obtidos com tampão Tris-HCL 0,05M, pH 7,5, e posterior fracionamento nas faixas de saturação: 0-30% (F1), 30-60% (F2) e 60-90% (F3) de sulfato de amônio. O perfil eletroforético revelou diversas bandas proteicas entre 12 e 225 KDa. A fração enriquecida em inibidor (FE) foi obtida utilizando apenas uma cromatografia de afinidade em Tripsina-Sepharose após a extração. O teste da atividade antimicrobiana foi realizado através do ensaio de microdiluição e a ação moduladora dos antibióticos ampicilina, norfloxacino e gentamicina, utilizando uma concentração subinibitória CIM/8. Embora as amostras não tenham apresentado ação antimicrobiana direta sobre as linhagens ATCC Escherichia coli, Staphylococcus aureus e S. aureus resistente a meticilina (MRSA), observou-se que, em uma concentração de 128 µg/mL, as amostras associadas aos diferentes antibióticos (aminoglicosídeo, β-lactâmico e fluoroquinolona) tiveram uma ação sinérgica contra as cepas multirresistentes de E. coli, S. aureus e Pseudomonas aeruginosa. Enquanto as demais amostras inibiram a ação das serinoproteases testadas em porcentagens acima de 80%, FE reduziu 50% das atividades das enzimas tripsina, elastase neutrofílica humana (ENH) e quimotripsina, nas concentrações de 0,017, 0,023 e 0,156 µg/µL, respectivamente, e sua atividade antitripsina foi mantida em altas temperaturas (80 ºC) e ampla faixa de pH (2 a 12). Não foi observada atividade hemolítica em concentrações até 10x maiores que a IC50, viabilizando assim, o seu uso em possíveis preparações farmacológicas. Desta forma, conseguimos separar de forma relativamente simples, produtos derivados das sementes de P. pyramidalis com atividades relevantes no contexto clínico, considerando o seu potencial de aplicação no combate a infecções causadas por bactérias resistentes, bem como nos distúrbios de proteases inflamatórias, e com redução dos custos do tratamento.Artigo An insulin receptor-binding multifunctional protein from tamarindus indica L. presents a hypoglycemic effect in a diet-induced type 2 diabetes-preclinical study(Foods, 2022-07) Maciel, Bruna Leal Lima; Costa, Izael de Sousa; Lima, Mayara Santos Rosa; Medeiros, Amanda; Bezerra, Lucas Lima; Santos, Paula; Serquiz, Alexandre; Lima, Maíra Conceição Jerônimo de Souza; Oliveira, Gerciane Santos de; Santos, Elizeu Antunes dos; Monteiro, Norberto de Kássio Vieira; Morais, Ana HeloneidaThe objectives of this study were to evaluate the hypoglycemic effect of the trypsin inhibitor isolated from tamarind seeds (TTI) in an experimental model of T2DM and the in silico interaction between the conformational models of TTI 56/287 and the insulin receptor (IR). After inducing T2DM, 15 male Wistar rats were randomly allocated in three groups (n = 5): 1—T2DM group without treatment; 2—T2DM group treated with adequate diet; and 3—T2DM treated with TTI (25 mg/kg), for 10 days. Insulinemia and fasting glucose were analyzed, and the HOMA-IR and HOMA-β were calculated. The group of animals treated with TTI presented both lower fasting glucose concentrations (p = 0.0031) and lower HOMA-IR indexes (p = 0.0432), along with higher HOMA-β indexes (p = 0.0052), than the animals in the other groups. The in silico analyses showed that there was an interaction between TTIp 56/287 and IR with interaction potential energy (IPE) of −1591.54 kJ mol−1 (±234.90), being lower than that presented by insulin and IR: −894.98 kJ mol−1 (±32.16). In addition, the presence of amino acids, type of binding and place of interaction other than insulin were identified. This study revealed the hypoglycemic effect of a bioactive molecule of protein origin from Tamarind seeds in a preclinical model of T2DM. Furthermore, the in silico analysis allowed the prediction of its binding in the IR, raising a new perspective for explaining TTI’s action on the glycemic responseTCC Análise das atividades biológicas de extratos obtidos de fungos Geastrum Autóctones do Rio Grande do Norte(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2017-06-30) Moura, Geovanna Maria de Medeiros; Santos, Elizeu Antunes dos; Marques Neto, Antônio Moreira; Santos, Yago Queiros dosHoje em dia existe um interesse crescente em fungos como fonte de compostos biologicamente ativos de valor medicinal, tais como agentes anticancerígenos, antivirais, antibacterianos, anticoagulantes, imunopotenciadores e hepatoprotetores. Em novas espécies de fungos estão sendo encontrados um novo repertório de moléculas ativas que potencializam, de maneira inesperada, a medicina moderna. Os extratos de corpos fúngicos de frutificação são, muitas vezes, ricos em biomoléculas de elevado valor medicinal incluindo lectinas, polissacarídeos e inibidores de proteases. Novas espécies de fungos basidiomicetos estão sendo descobertas no Nordeste do Brasil e estão sendo estudadas como fontes promissoras dessas moléculas. Este trabalho teve como objetivo avaliar as atividades hemaglutinante, inibitória de proteases, anticoagulante e antibacteriana presentes em extratos e frações de fungos do gênero Geastrum. Três extratos em PBS, e suas respectivas frações, da espécie Geastrum rusticum Baseia, B.D.B. Silva & T. S. Cabral nos estágios imaturos (GRI) e maduros (GRM) e a espécie Geastrum entomophilum Fazolino, Calonge & Baseia (GEM) tiveram suas proteínas e carboidratos quantificados e foram submetidos a ensaios de hemaglutinação, inibição de proteases; tempo de coagulação (aPTT e TP) e atividade antibacteriana (contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus). O perfil proteico dos extratos também foi avaliado por SDS-PAGE. GRI e GRM apresentaram resultados positivos para atividades hemaglutinantes e inibidoras da proteases (tripsina e quimotripsina), bem como concentrações significativas de proteína, enquanto GRI aumentou o tempo de coagulação da via extrínseca (PT). Somente o GEM obteve quantificação detectável de carboidratos. Nenhum extrato mostrou atividade antibacteriana e interferência na coagulação da via intrínseca (aPTT). Os dados atuais corroboram a necessidade de mais estudos aprofundados, focados no isolamento das moléculas bioativas potencialmente novas.Tese Analise estrutural do galactano acidico dos ovos de pomacea lineata e avaliacao de suas atividades proliferativa e antiinflamatoria(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2010-06-18) Cruz, Ana Katarina Menezes da; Maranhão, Técia Maria de Oliveira; ; http://lattes.cnpq.br/7869140767244263; ; http://lattes.cnpq.br/9810605697247961; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null; Oliveira, Fernanda Wanderley de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786179U0&dataRevisao=null; Abreu, Luiz Roberto Diz de; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723470U6; Carvalho, Maria Goretti Freire de; ; http://lattes.cnpq.br/8934375314306198; Leal, Rosélia de Sousa; ; http://lattes.cnpq.br/2632211728274360O Galactano acídico (GA) foi obtido através de extração por proteólise e precipitação com acetona das ovas do molusco Pomacea lineata. Sua estrutura foi elucidada através de uma combinação de análises químicas, da viscosidade intrínseca e de espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear, mono e bidimensionais. Os aspectos biológicos do GA foram avaliados através de ensaios in vivo de cicatrização e de peritonite induzida (atividade antiinflamatória); e ensaios in vitro da atividade citotóxica (MTT). Este polissacarídeo apresentou uma estrutura simples, sem presença de sulfato e ácidos urônicos. Suas viscosidades intrínseca e relativa foram avaliadas em 0,44 ± 0,05 e 1,744 ± 0,07 dL.g-1. A espectroscopia mostrou que o GA possui uma constituição formada predominantemente por β-D-galactoses, além de β- D-NAcetil-glucosamina que surge em menor proporção na cadeia. O caráter acídico deste polissacarídeo é dado pela presença de piruvato na molécula, formando um acetal cíclico de 6-membros, localizados nas β-D-galactoses. A participação do GA na cicatrização foi avaliada e as análises histológicas revelaram que houve, de forma precoce ao processo de cicatrização, uma grande estimulação de macrófagos, com formação de granulomas. Sugerindo que o GA pode ter promovido a antecipação de eventos biológicos necessários à cicatrização do tecido. No ensaio de peritonite induzida o GA se mostrou dose dependente, demonstrando uma ação antiinflamatória em concentrações acima de 20mg/kg, e comprovando seu caráter inflamatório na concentração de 1mg/Kg. Em ensaios in vitro o GA utilizado na concentração de 1000 μg/mL apresentou atividade proliferativa estimulando o crescimento de células 3T3, corroborando os achados in vivo e demonstrando ausência de atividade citotóxicaArtigo Anti-TNF-α agent tamarind kunitz trypsin inhibitor improves lipid profile of Wistar rats presenting dyslipidemia and diet-induced obesity regardless of PPAR-γ induction(Nutrients, 2019) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Costa, Izael Souza; Luz, Anna Beatriz Santana; Ladd, Fernando Vagner Lobo; Serquiz, Alexandre Coelho; Bortolin, Raul Hernandes; Silbiger, Vivian Nogueira; Maciel, Bruna Leal Lima; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0002-6460-911XThe increasing prevalence of obesity and, consequently, chronic inflammation and its complications has increased the search for new treatment methods. The effect of the purified tamarind seed trypsin inhibitor (TTIp) on metabolic alterations in Wistar rats with obesity and dyslipidemia was evaluated. Three groups of animals with obesity and dyslipidemia were formed, consuming a high glycemic index and glycemic load (HGLI) diet, for 10 days: Obese/HGLI diet; Obese/standard diet; Obese/HGLI diet + TTIp (730 µg/kg); and one eutrophic group of animals was fed a standard diet. Rats were evaluated daily for food intake and weight gain. On the 11th day, animals were anesthetized and sacrificed for blood and visceral adipose tissue collection. TTIp treated animals presented significantly lower food intake than the untreated group (p = 0.0065), TG (76.20 ± 18.73 mg/dL) and VLDL-C (15.24 ± 3.75 mg/dL). Plasma concentrations and TNF-α mRNA expression in visceral adipose tissue also decreased in obese animals treated with TTIp (p < 0.05 and p = 0.025, respectively) with a negative immunostaining. We conclude that TTIp presented anti-TNF-α activity and an improved lipid profile of Wistar rats with dyslipidemia and obesity induced by a high glycemic index and load diet regardless of PPAR-γ induction.Tese Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2006-12-05) Salha, Daniella Regina Arantes Martins; Jerônimo, Selma Maria Bezerra; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785584A3&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/3695151190501921; Carvalho, Lain Pontes; ; http://lattes.cnpq.br/6148007775748893; Pompeu, Margarida Maria de Lima; ; http://lattes.cnpq.br/2618502430533433; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null; Braz, Regina de Fátima dos Santos; ; http://lattes.cnpq.br/9442000157600332O controle da Leishmaniose Visceral em regiões endêmicas é em parte dificultado pela falta de conhecimento em relação ao papel dos reservatórios e vetores, não havendo ainda vacina disponível. Leishmania s.p são protozoários que expressam múltiplos antígenos reconhecidos pelo sistema imune dos hospedeiros. Devido à ausência de um epítopo imunodominante reconhecido pela maioria dos hospedeiros, estratégias para a identificação e seleção de novos antígenos para a prevenção e imunodiagnóstico. Nossa estratégia foi construir uma biblioteca de cDNA da forma amastigota da L. chagasi, com subseqüente realizadção de dupla varredura da biblioteca para sistematicamente identificar antígenos específicos de células T e B. A primeira etapa teve como objetivo a identificação do maior número de clones produtores de peptídeos através da utilização de um pool de soro de indivíduos com Leishmaniose Visceral. Os clones codificadores de proteínas de choque térmico foram removidos e os clones restantes foram submetidos à segunda etapa da varredura, que consistiu na avalição capacidade destes antígenos em induzir estimulação e proliferaçõa de linfócitos T de camundongos resistentes à infecção por L. chagasi. Seis clones foram selecionados após a segunda varredura. Os clones codificaram parte da seqüência da glutamina sintetase, ATPase do retículo endoplasmático, Fator de alongamento 1 γ, Kinesina K-39 proteína repetitiva A2, e proteína hipotética conservada. Indivíduos naturalmente infectados com L. chagasi desenvolveram respostas imunes celular e humoral frente a essas proteínas. Formulações contendo múltiplos antígenos podem servir como excelentes métodos para imunodiagnóstico e vacinaçãoArtigo Antitryptical, anticoagulant and hemagglutinating activities of Eucalyptus sp. seeds(F1000Research, 2019-01-08) Santos, Yago Queiroz dos; Carelli, Gabriella Silva Campos; Veras, Bruno Oliveira de; Batista, Virgínia Cunha; França, Anderson Felipe Jácome de; Silva, Márcia Vanusa da; Santos, Elizeu Antunes dosBackground: Plant biodiversity has great value for science being an inexhaustible source for new bioactive molecules capable of offering environmentally friendly and innovative solutions for various areas of the industry. The scientific community has increased their interest in the study of plant species in the search of new molecules and to determine their mechanisms of action. Plant seeds are natural sources of bioactive compounds, such as carbohydrates, lipids and proteins with special focus on enzymatic inhibitors which protect them against digestive enzymes of phytopathogens and lectins that play an important role on carbohydrate signalization and metabolism during germination. The objective of the present study was to evaluate and describe the protein profile and to test the hemagglutinating, hemolytic and anticoagulant activities, as well as the antitryptic effect of extracts and fractions obtained from seeds of Eucalyptus species. Methods: The crude protein extract was obtained from the seed of Eucalyptus sp. with 0.02 M sodium phosphate buffer, at pH 6.6, and fractionated using ammonium sulfate in order to study its antitryptical properties as well as the capacity of hemagglutination and influence on hemostasis. Results: The crude extract showed a high effectiveness for trypsin inhibition. For hemagglutinating activity, the ammonium sulfate fraction 0-30% presented better activity, while no hemolytic activity was present in the obtained fractions. For anticoagulation assay, the fraction 0-30% showed better results. Conclusions: Taken together, the obtained results demonstrate the biotechnological potential of Eucalyptus sp. seeds, although further study is still necessary to better isolate as well as describe the bioactive compoundsDissertação Associação entre fatores nutricionais e a resposta frente à infecção por Leishmania chagasi(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2008-07-07) Maciel, Bruna Leal Lima; Jerônimo, Selma Maria Bezerra; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785584A3&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/5790541670952158; Carvalho Filho, Edgar Marcelino de; ; http://lattes.cnpq.br/6998360791945569; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=nullA infecção por Leishmania chagasi apresenta diversas formas clínicas, variando de infecção assintomática e espontaneamente resolvida à manifestação clínica da doença, que é denominada leishmaniose visceral (LV). Não se conhecem os exatos mecanismos que determinam a evolução da infecção à LV. Acredita-se que a desnutrição seja um fator de risco associado ao desenvolvimento de LV, porém são poucos os estudos em humanos nesta área. Este trabalho teve como objetivo avaliar fatores nutricionais associados com a resposta à infecção por L. chagasi no Rio Grande do Norte. O estudo foi realizado de dezembro de 2006 a janeiro de 2008. Foram avaliadas 149 crianças, sendo 20 casos de LV ativa, 33 casos de história de LV, 40 com resposta ao teste de Montenegro positiva (DTH+) e 56 DTH-. Avaliou-se o estado nutricional através de escores-z para Peso/Idade, Altura/Idade, Peso/Altura, Índice de Massa Corporal (IMC) e circunferência do braço (CB)/altura. O estado de vitamina A foi medido através do retinol sérico e teste de dose-resposta relativa modificado (MRDR). A história de amamentação e o peso ao nascer das crianças foram avaliados. As crianças com LV ativa apresentaram estado nutricional comprometido em relação às demais crianças estudadas, segundo IMC e CB/altura, com médias -1,53 ± 1,10 e -1,48 ± 1,28 escores-z, respectivamente (ANOVA, p < 0,05). O nível de vitamina A também foi menor nas crianças com LV aguda com 43% de prevalência de retinol sérico < 20 µg/dL e 15% de MRDR > 0,060. O peso ao nascer foi inversamente associado com o risco em pertencer ao grupo de crianças com LV (β = -0,00; OR = 0,84; IC 95% de 0,73 - 0,99; p = 0,047), enquanto que maior tempo de amamentação foi diretamente associado com o risco da criança em pertencer ao grupo DTH+ (β = 0,02; OD = 1,16; IC 95% de 1,01 - 1,33; p = 0,036). As variáveis nutricionais avaliadas mostraram-se associadas com a resposta à infecção por L. chagasi, sendo a desnutrição e o estado comprometido de vitamina A características das crianças que apresentam LV. Além disso, o maior peso ao nascer mostrou-se associado com proteção contra a doença, enquanto que o maior tempo de amamentação foi associado com maior chance de infecção assintomática. Os resultados indicam que aspectos nutricionais que podem ser modificados na população estão associados com a resposta à infecção por L. chagasiArtigo Atividade antitríptica em semente e produto alimentício de Chia (Salvia Hispanica L.)(DEMETRA: Alimentação, Nutrição & Saúde, 2017-03) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Souza, Ana Paula Araújo de; Nascimento, Lorena Maria Araújo Marinheiro; Lima, Vanessa Cristina Oliveira de; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Santos, Elizeu Antunes dosObjetivo: Este estudo objetiva detectar a atividade antitríptica em semente e farinha comerciais de chia e isolar um inibidor de tripsina presente na semente. Metodologia: Foram realizados extração de proteínas, fracionamento com sulfato de amônio, cromatografia de afinidade, ensaio de inibição sobre tripsina, quantificação de proteínas e eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante. Resultados e discussão: A partir desses experimentos, detectou-se a atividade antitríptica no pico proteico retido na coluna de afinidade (RT), da farinha e semente, apresentando 51% e 64%, respectivamente. Porém, não foram verificadas grandes quantidades de proteínas solúveis no RT, tanto da semente quanto da farinha, quando comparadas ao extrato bruto e frações proteicas. O inibidor de tripsina de semente foi isolado, indicando massa molecular estimada em, aproximadamente, 14,4 kDa. Conclusões: Diante dos resultados relativos à detecção da atividade antitrípica em semente e farinha comercial de chia, e isolamento do inibidor na semente, faz-se necessário o aprofundamento nas pesquisas acerca dessa molécula quanto as suas propriedades bioativas e segurança do consumoDissertação Atividade citotóxica, bacteriostática e aglutinante para leishmania de ConM: uma lectina isolada das sementes do feijão de praia – Canavalia marítima (Aubl.) Thou. (1813)(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-06-26) Araújo, Jonalson Nogueira; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; ; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; ; http://lattes.cnpq.br/5561107181304291; Lima, Jailma Almeida de; ; http://lattes.cnpq.br/9077722100091492; Lima, João Paulo Matos Santos; ; http://lattes.cnpq.br/3289758851760692Sementes de plantas são reservatórios de moléculas com grande potencial para elaboração de bioprodutos e por este motivo uma especial atenção tem sido direcionada na busca de proteínas bioativas com ação antimetabólica e propriedades farmacológicas. As lectinas de plantas são proteínas com atividades biológicas relacionadas a defesa, mas que podem ser utilizadas, heterologamente, como interferentes no metabolismo de outros organismos. Uma lectina das sementes de Canavalia maritima (CML) foi purificada em dois passos, pelo fracionamento com sulfato de amônio seguido pela cromatografia de afinidade em coluna Sephadex G- 50. CML foi analisada por SDS-PAGE e parte de sua sequência de aminoácidos determinada por espectrometria de massas. Os 20 resíduos identificados apresentaram 100% de identidade com ConM. ConM foi testada contra eritrócitos do sangue periférico humano e foi constatado a ausência de toxicidade quando incubados com até 1000 µg/mL da proteína. Já contra células mononucleares, a lectina não foi significativamente tóxica nas concentrações de 1, 2,5 e 5 µg/mL, mas o foi a partir da concentração 7 µg/mL e contra a linhagem RAEC a proteína não apresentou toxicidade significante com 25 µg/ml da proteína. Outros ensaios de citotoxicidade revelaram que a ConM é tóxica para as linhagens tumorais A549, 786- 0, HT-29 e HeLa no intervalo entre 24 e 72 horas, principalmente nas concentrações de 5, 7 e 10 µg/ml. ConM foi capaz de aglutinar as formas promastigotas de Leishmania spp na concentração de 6,25 µg/ml. Quanto a ação contra Candida spp, nenhuma das concentrações testadas (1 a 500 µg/ml) foi capaz de interferir no crescimento. Quando avaliada a atividade bacteriostática, a ConM nas concentrações variando de 0,39 a 400 µg/ml não inibiu o crescimento de Escherichia coli, já para Staphylococcus aureus a concentração de 25 µg/ml se mostrou ativa, reduzindo o crescimento em 75 %. Com base nos dados obtidos, a lectina isolada corresponde a uma isolectina do tipo ConA, e suas propriedades anti-tumoral, bacteriostático e aglutinante para Leishmania precisam ser melhor investigados para que seu potencial biotecnológico seja explorado.Artigo Atividade hemaglutinante em sementes exóticas germinadas e comestíveis(Revista Brasileira de Inovação Tecnológica em Saúde, 2017-04) Morais, Ana Heloneida de Araújo; Lima, Vanessa Cristina Oliveira; Silva, Priscila Fabíola dos Santos; Alves, Nínive Rayane de Medeiros; Pereira, Danielle Alves de Oliveira; Figueredo, Júlia Braga dos Santos; Costa, Izael de Sousa; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Santos, Elizeu Antunes dosAs sementes não convencionais vêm ganhando destaque no cenário alimentar pela alegação de que são benéficas à saúde; concomitante a esse fato, o consumo das sementes altera seu metabolismo e sua composição, fato relacionado, segundo a literatura, a uma maior síntese e menor degradação de aglutininas. O objetivo deste estudo constituiu em avaliar a atividade hemaglutinante nos extratos totais aquosos de sementes exóticas germinadas e comestíveis. Assim, foram testadas a atividade hemaglutinante, a dependência de íons e a inibição por carboidratos dos extratos dessas sementes. Como resultado, para as sementes estudadas, identificou-se a presença de aglutininas em todas as sementes germinadas, sendo mais expressivas nas sementes de Gergelim (88,11 UH/mg) e Girassol (61,07 UH/mg) e nas sementes não germinadas, apenas não apresentaram atividade hemaglutinante, as de Quinoa, Feijão Mungo e Gergelim. A especificidade para os tipos sanguíneos (AB0), tratado com papaína ou tripsina variaram entre as sementes, bem como a dependência por e íons magnésio e cálcio, atentando para a necessidade crescente de estudos mais aprofundados sobre fatores antinutricionais em alimentos alternativos e sementes germinadasTCC Atividade larvicida e inibição in vitro de proteases intestinais de Aedes aegypti por extratos de sementes de plantas da caatinga(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2022-07-22) Bezerra, Pedro Vítor Vale; Uchôa, Adriana Ferreira; Sá, Giulian César da Silva; https://orcid.org/0000-0002-4734-4228; http://lattes.cnpq.br/2134578884742038; https://orcid.org/0000-0002-3822-6502; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; https://orcid.org/0000-0002-8674-6959; http://lattes.cnpq.br/0567529774568955; Santos, Elizeu Antunes dos; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; Inácio, Cássio Lázaro Silva; https://orcid.org/0000-0002-1666-6646; http://lattes.cnpq.br/4910533645616566Arboviroses são doenças epidemiologicamente relevantes transmitidas por artrópodes, afetando sobretudo países tropicais, como o Brasil. Atualmente o enfrentamento das arboviroses é realizado, principalmente, através do controle populacional do Aedes aegypti, principal mosquito vetor urbano. Recentemente, a busca por alternativas ecologicamente amigáveis para o controle vetorial tem sido incentivada, como o desenvolvimento de inseticidas botânicos. Nesse cenário, a Caatinga, centro de biodiversidade, representa uma fonte importante de espécies vegetais para prospecção de moléculas inseticidas. A presente pesquisa investigou a potencial atividade de extratos de sementes de 3 espécies vegetais da Caatinga, Amburana cearensis, Anadenanthera colubrina e Erythrina velutina, contra larvas de A. aegypti, e buscou avaliar, in vitro, suas capacidades de inibição das proteases intestinais das larvas deste mosquito. Bioensaios foram realizados expondo as larvas em diferentes concentrações dos extratos, sendo analisada a taxa de sobrevivência larval em 24h e 48h, para estimar as concentrações letais 50% (CL50). Homogenatos foram produzidos a partir dos intestinos médios das larvas para analisar in vitro a inibição pela exposição aos extratos, quantitativamente, através de ensaio de atividade enzimática, e qualitativamente, através de zimogramas. Os extratos aquosos de A. cearensis (EC), A. colubrina (EA) e E. velutina (EM) comprometeram a sobrevivência das larvas, apresentando CL50 iguais a 0,67 mg/mL, 0,28 mg/mL e 1,85 mg/mL, após 24h de exposição, e 0,24 mg/mL, 0,05 mg/mL e 0,91 mg/mL, após 48h de exposição, respectivamente. A caracterização inicial dos extratos sugere uma eficiência nas condições de extrações, com rendimento em peso seco entre 14,53 mg e 34,50 mg, rendimento total entre 7,56% e 54,16%, e teores de proteínas solúveis entre 1,16 mg/mL e 2,30 mg/mL. As proteínas solúveis nos extratos possivelmente favoreceram o comprometimento da atividade enzimática das proteases do homogenato intestinal das larvas de A. aegypti, com atividade inibitória específica em EC (662,65 UI/mg), EA (226,19 UI/mg) e EM (496,11 UI/mg). As análises dos zimogramas revelaram a presença de bandas proteolíticas de peso molecular relativo alto (acima de 66 kDa), médio (entre 45 kDa e 30 Kda) e baixo (abaixo de 30 kDa), e que os extratos afetaram grupos distintos de proteases do homogenato das larvas. Os resultados indicam que a inibição das proteases intestinais pode compreender um dos modos de ação para a atividade larvicida dos extratos, em especial para o extrato EC. Testes complementares estão em andamento para confirmar essa relação.Dissertação Avaliação da atividade anticoagulante e bloqueadora de elastase de um inibidor de tripsina isolado de Caesalpinea pyramidalis Tul.(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2017-09-28) Cruz, Joelton Igor Oliveira da; Uchoa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; 41305655400; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; http://lattes.cnpq.br/6644671747055211; http://lattes.cnpq.br/2448189217304566; Medeiros, Caroline Addison Carvalho Xavier de; http://lattes.cnpq.br/2982271986555450; Rabêlo, Luciana Maria Araújo; http://lattes.cnpq.br/2165223941043909As plantas estão sujeitas a uma diversidade de condições bióticas e abióticas desfavoráveis, sofrendo constantemente alguma adaptação evolutiva que pode favorecer sua reprodução e sobrevivência. A elaboração de estratégias de defesa sofisticadas contra pragas e patógenos, como a síntese de diversos compostos naturais bioativos destaca-se como parte desse arsenal biológico adaptativo. Um grupo de moléculas bioativas fundamental nesse contexto são os inibidores de proteases, que comprometem a atividade de enzimas digestórias de herbívoros, bem como a ação de patógenos, contribuindo para o equilíbrio das interações biológicas. Os inibidores de protease, também são moléculas importantes devido ao seu potencial heterólogo, podendo ter efeitos in vitro e in vivo em diversos modelos biológicos, bem como apresentar aplicações terapêuticas em uma gama de distúrbios que comprometem a saúde humana. Neste trabalho um inibidor de serinoprotease (CpTI), foi isolado das sementes de Caesalpinia pyramidalis Tul por fracionamento do extrato bruto com sulfato de amônio com melhor rendimento na faixa de saturação de 30-60%, seguido de separação em cromatografia de afinidade em coluna de Tripsina-Sepharose 4B CNBr-ativada. O teste de termoestabilidade mostrou que o CpTI foi capaz de manter sua funcionalidade até 80 ºC e as concentrações necessárias para inibir 50% da atividade das enzimas tripsina, elastase neutrofílica humana (ENH) e quimotripsina foram de 0,017, 0,021 e 0,156 µg/µL, respectivamente. Nos ensaios in vitro CpTI se mostrou capaz de prolongar o tempo de coagulação em mais de 80 segundos para a via intrínseca (TPPa) em uma concentração de 36,2 µg/mL. Também foi observado que CpTI não possui atividade citotóxica para hemácias em nenhuma das concentrações testadas (0,03 , 0,125 e 0,5 mg/mL). Esses resultados demonstram o potencial de uso terapêutico de CpTI em processos que envolvem a inflamação e coagulação.Tese Avaliação da atividade antimicrobiana das defensinas recombinantes de ervilha (drr230a) e café (cd1) produzidas em Pichia pastoris(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2015-06-30) Lacerda, Ariane Ferreira; Grossi, Maria Fátima; Scortecci, Kátia Castanho; ; http://lattes.cnpq.br/4808910380593455; ; http://lattes.cnpq.br/3058512809761818; ; http://lattes.cnpq.br/0816835876517153; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; Vasconcelos, Ilka Maria; ; http://lattes.cnpq.br/0103197383336584; Pedrini, Márcia Regina da Silva; ; http://lattes.cnpq.br/0099275569766870; Silva, Marília Santos; ; http://lattes.cnpq.br/6395128945646125A ineficácia de pesticidas químicos no controle de fungos fitopatogênicos na agricultura e a frequente incidência de doenças humanas causadas por bactérias resistentes a antibióticos levam à busca por compostos antimicrobianos alternativos. Neste contexto, defensinas vegetais constituem uma promissora ferramenta no controle de agentes patogênicos tanto de plantas quanto de humanos. Defensinas de plantas são peptídeos catiônicos com aproximadamente 50 resíduos de aminoácidos, ricas em cisteínas e cuja estrutura tridimensional é bastante conservada entre as diferentes espécies vegetais. Estas moléculas de ação antimicrobiana representam um importante componente inato da resposta de defesa vegetal contra patógenos e são expressas em diversos tecidos da planta, como folhas, tubérculos, flores, vagens e sementes. O presente trabalho teve por finalidade a avaliação da atividade antimicrobiana de duas defensinas vegetais contra diferentes espécies de fungos fitopatogênicos e bactérias patogênicas ao homem. A defensina Drr230a, cujo gene foi isolado de ervilha (Pisum sativum) e a defensina CD1, cujo gene foi identificado no transcriptoma de café (Coffea arabica) foram subclonadas em vetor de expressão de levedura e expressas em Pichia pastoris. O gene cd1 foi subclonado em duas formas recombinantes: CD1tC, contendo uma sequência codificante para seis histidinas (6xHis) na região C-terminal do peptídeo e CD1tN, contendo sequência codificante para 6xHis na região N-terminal. No caso da defensina Drr230a, a sequência codificante para 6xHis foi inserida apenas na região N-terminal da proteína. Ensaios de atividade antimicrobiana das proteínas recombinantes purificadas rDrr230a e rCD1 contra Phakopsora pachyrhizi, agente causal da ferrugem asiática da soja, foram realizados para analisar a inibição da germinação de esporos in vitro e a severidade da doença causada pelo fungo in planta. As duas defensinas recombinantes testadas foram capazes de inibir a germinação de uredosporos de P. pachyrhizi, não havendo diferença entre a ação antimicrobiana de CD1tC e CD1tN. Ademais, rDrr230a e rCD1 reduziram drasticamente a severidade da ferrugem asiática da soja, conforme demonstrado em ensaios in planta. Apesar de rCD1 não ter sido capaz de inibir a proliferação das bactérias patogênicas humanas Staplylococcus aureus e Klebsiella pneumoniae, rCD1 mostrou-se capaz de inibir o crescimento do fungo fitopatogênico Fusarium tucumaniae, causador da síndrome da morte súbita da soja. Os resultados obtidos mostram que tais defensinas vegetais são candidatas úteis para serem utilizadas em programas de engenharia genética de plantas para controlar doenças fúngicas impactantes na agricultura.Dissertação Avaliação da toxicidade aguda do inseticida metomil e o seu efeito sobre a atividade da acetilcolinesterase do peixe Danio rerio(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2009-10-05) Santos, Paula Ivani Medeiros dos; Medeiros, Guilherme Fulgêncio de; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/1731390914884781; ; http://lattes.cnpq.br/1631947914918841; Colepicolo Neto, Pio; ; http://lattes.cnpq.br/9346462712672265; Schwarz, Aline; ; http://lattes.cnpq.br/2401319567715548O Metomil (Lannate®) é um inseticida do grupo dos carbamatos utilizado no combate a pragas em diversos tipos de lavouras, sua forma de ação é através da inibição da enzima acetilcolinesterase. Para uma caracterização adequada e controle de seus despejos, a estratégia mais eficiente é o uso integrado de análises químicas, físicas e ecotoxicológicas. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a toxicidade aguda em 96h do metomil, e através de um ensaio subletal de cinco (5) horas, estimar o seu efeito sobre a atividade da acetilcolinesterase no cérebro e músculo esquelético dorsal da espécie Danio rerio. Os resultados demonstraram que no Danio rerio o valor da CL-50-96h encontrada foi de 3,40 mg/L, obtida através da média de quatro testes realizados. Nos ensaios in vitro foi atestada a ação inibitória da metomil diretamente sobre a AChE solúvel extraída do músculo esquelético dorsal do D. rerio com uma inibição máxima de 68,57 % para a concentração de 0,2 mg/L do inseticida. Nos testes subletais com D. rerio foi constatado o efeito inibitório do metomil sobre a forma solúvel da AChE de músculo esquelético dorsal, tanto em uma como em cinco horas de exposição do peixe ao inseticida. Em ambos os horários os valores médios de inibição foram em torno de 61%. Nas mesmas condições não foi observada inibição significativa da atividade da AChE de membrana do músculos. Não foi observado efeito inibitório do metomil sobre as AChE solúvel e de membrana de cérebro de D. rerio, nas concentrações 0,42, 0,85, 1,70, 2,50 mg/L e em ambos os horários de exposição dos peixesDissertação Avaliação do efeito da megadose de vitamina A no colostro humano(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2007-06-12) Ribeiro, Karla Danielly da Silva; Dimenstein, Roberto; ; http://lattes.cnpq.br/8520928220989866; ; http://lattes.cnpq.br/5658288179573297; Arruda, Ilma Kruze Grande de; ; http://lattes.cnpq.br/4003459675307504; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=nullA suplementação materna de vitamina A no pós-parto é utilizada como medida de intervenção no combate à deficiência de vitamina A. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da megadose de vitamina A sobre os níveis de retinol no colostro de puérperas da Maternidade Escola Januário Cicco (MEJC),Natal-RN, assim como analisar a influência do estado nutricional materno na resposta a esta suplementação. O estudo foi do tipo transversal, com participação de 91 parturientes divididas em grupo controle (44 mulheres) e grupo suplementado (47 mulheres). No período da manhã foram coletados sangue e leite (leite 0h). Em seguida uma cápsula de palmitato de retinil (200 000 UI ou 60 mg) foi fornecida às parturientes do grupo suplementado. Outra alíquota de colostro foi obtida após 24h da primeira coleta (leite 24h). O retinol no leite e soro foi quantificado utilizando a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. A ingestão de vitamina A foi avaliada pelo questionário de freqüência de consumo alimentar. Os níveis de retinol sérico nos grupos controle e suplementado foram 35,9 ± 10,6 e 40,6 ± 10,9 µg/dL, respectivamente. As mulheres apresentaram uma satisfatória ingestão média de vitamina A (1492,4 µgRAE/dia), porém com alta prevalência de consumo inadequado (23%). Foram encontrados valores médios de retinol no leite 0 e 24h do grupo controle de 99,1 ± 49,3 µg/dL e 93,5 ± 50,3 µg/dL (p>0,05) respectivamente. Após a suplementação houve um aumento significativo nos níveis de retinol do grupo suplementado, sendo encontrado valores de 102,0 ± 56,0 µg/dL e 196,1 ± 74,0 µg/dL (p<0,0001) para leite de 0 h e 24 h, respectivamente. As parturientes apresentaram diferentes respostas à megadose. Mulheres com níveis deficientes de retinol no leite transferiram mais retinol ao leite 24h do que as com níveis adequados, encontrando um percentual de resposta equivalente a 326,1% e 86,5% de aumento, respectivamente (p< 0,0001). Apesar da aparente normalidade encontrada no soro, as lactantes são consideradas de risco ao desenvolvimento da deficiência de vitamina A, e a megadose foi eficaz nas primeiras 24h após a suplementação e está de acordo com os mecanismos propostos para transferência da vitamina A ao leiteTese Avaliação do potencial anti-inflamatório do óleo de rã-touro puro e microemulsionado em modelo experimental(2017-02-23) Davim, André Luiz Silva; Dantas, Tereza Neuma de Castro; ; http://lattes.cnpq.br/0676872399141537; ; http://lattes.cnpq.br/5623374421279476; ; http://lattes.cnpq.br/3809975612215286; Santos, Elizeu Antunes dos; ; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; Maciel, Maria Aparecida Medeiros; ; http://lattes.cnpq.br/5360188002708095; Cabral, Richard Halti; ; http://lattes.cnpq.br/7567119410336544Atualmente os custos no tratamento de pacientes com doenças inflamatórias que progridem de forma sistêmica, com destaque para a sepse, são muito elevados e representa a maior causa de morte em unidades de terapia intensiva, não cardiológica, em todo o mundo. No Brasil, a incidência de pacientes com sepse é cada vez mais frequente. Apesar dos avanços farmacológicos, tecnológicos e cirúrgicos, a mortalidade por sepse e/ou doenças associadas continua alta em todo o mundo, e por isso se busca alternativas terapêuticas de fácil acesso e baixo custo para conter o avanço dessa doença. Os produtos naturais vêm desempenhando importante papel na indústria farmacêutica, pois algumas dessas substâncias agem de forma benéfica sobre o sistema imunológico humano. Nos últimos tempos, há uma crescente investigação das possíveis propriedades biológicas e terapêuticas atribuídas ao óleo de rã-touro, pois esse óleo vem sendo utilizado de forma indiscriminada pela população no tratamento de diversas doenças como bronquite, asma, líquem escleroso, furunculose, cisto sebáceo e para cicatrização de pele e mucosas. Porém as possíveis consequências no consumo excessivo desse óleo são, o aumento da produção de eicosanoides derivados do ácido araquidônico proinflamatório e a deficiência na regulação hepática, predispondo à esteatose podendo progredir para inflamação hepática e fibrose. Muitas hipóteses se baseiam na atuação dos compostos presentes no óleo de rã-touro na modulação da resposta inflamatória, impedindo assim a instalação de injúrias teciduais. Dessa forma, a microemulsão apresenta-se como uma possível alternativa para um novo sistema de liberação de fármacos, com o intuito de diminuir a incidência de hepatoxicidade e protegendo o organismo contra instalação de lesões teciduais em função do quadro séptico. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial anti-inflamatório do óleo de rã-touro puro e em um sistema microemulsionado em modelo experimental. Neste estudo, foi preparado e caracterizado um sistema microemulsionado (WIV) e, aplicado em ensaios biológicos a fim de avaliar o potencial antiinflamatório do óleo puro e em microemulsão. Foram utilizados o modelo de sepse, induzida pela técnica da CLP (cecal ligant puncture), e a lesão muscular induzida pela formalina. Os ensaios foram realizados em modelos murinos, onde os animais foram separados aleatoriamente em grupos e tratados com o óleo de rã-touro puro e em microemulsão, através da técnica de gavage para posterior avaliação do potencial hepatotóxico e anti-inflamatório. Para a análise do potencial antiinflamatório em modelo de sepse, foram realizadas lavagens bronco alveolares com posterior contagem de células inflamatórias e análises histopatológicas do tecido pulmonar. Para a análise no modelo de lesão muscular, foi avaliado extensão horizontal da pata dos animais, bem como feita a análise histopatológica do tecido muscular. Para a análise do potencial hepatotóxico das substâncias, foram avaliados a taxa de sobrevida dos animais pós-sepse e as análises histopatológicas dos tecidos hepáticos dos animais. Quando avaliado a toxicidade do óleo de rã-touro puro e em sistema microemulsionado, foi observado que no grupo em que foi administrado a microemulsão (ME), o fígado teve a arquitetura preservada, mas com sinais clínicos de esteatose hepática, diferentemente do grupo óleo de rã-touro puro (OR), que apresentou múltiplos focos de necrose hepatocítica acompanhado de infiltrado de polimorfonucleares. Esses achados evidenciam um quadro de esteatohepatite, ou seja, um estágio mais avançado e um precursor do carcinoma hepático. Quando avaliada a sobrevida dos animais, foi observado que no grupo ME a taxa foi significativamente maior quando comparado ao grupo OR. Quando avaliado o potencial antiinflamatório da ME e OR em modelo de sepse, foi observado em ambos os grupos potencial de modulação da resposta inflamatória, visto a capacidade de reduzir de forma significativa (P0.01) a migração de leucócitos para os pulmões após a indução da sepse. Quando analisado a histologia dos tecidos pulmonares dos animais dos dois grupos, foi verificado intenso desgaste nos animais do grupo OR quando comparados com o grupo ME, onde evidenciou-se pouco comprometimento tecidual. No ensaio de lesão muscular, foi observado que o grupo ME e OR apresentaram bom potencial antiedematogênico até a segunda hora da indução da lesão, quando comparados ao grupo controle (P0.01), mas não sendo observado diferenças significativas entre os dois grupos até a vigésima quarta hora pós-lesão. Nas análises histológicas foram observadas maior desgaste no tecido muscular do grupo OR, com intensa presença de infiltrado celular (edema) e comprometimento de fibras musculares, não sendo observado a mesma intensidade de injúria no grupo ME. Assim, conclui-se que o óleo de rã-touro puro e em sistema microemulsionado apresentam bom potencial anti-inflamatório nos modelos avaliados, embora o óleo puro tenha apresentado alto potencial hepatotóxico, caracterizando que este em um sistema microemulsionado, se mostra com um possível novo sistema de liberação de fármacos (NSLF).Artigo Biochemical characterisation of a kunitz-type inhibitor from tamarindus indica L. seeds and its efficacy in reducing plasma leptin in an experimental model of obesity(Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2018-01) Maciel, Bruna Leal Lima; Medeiros, Amanda Fernandes de; Costa, Izael de Sousa; Carvalho, Fabiana Maria Coimbra de; Kiyota, Sumika; Souza, Beatriz Blenda Pinheiro de; Sifuentes, Daniel Nogoceke; Serquiz, Raphael Paschoal; Uchôa, Adriana Ferreira; Santos, Elizeu Antunes dos; Morais, Ana Heloneida de AraújoA trypsin inhibitor isolated from tamarind seed (TTI) has satietogenic effects in animals, increasing the cholecystokinin (CCK) in eutrophy and reducing leptin in obesity. We purified TTI (pTTI), characterised, and observed its effect upon CCK and leptin in obese Wistar rats. By HPLC, and after amplification of resolution, two protein fractions were observed: Fr1 and Fr2, with average mass of [M þ 14H]þ ¼ 19,594,690 Da and [M þ 13H]þ ¼ 19,578,266 Da, respectively. The protein fractions showed 54 and 53 amino acid residues with the same sequence. pTTI presented resistance to temperature and pH variations; IC50 was 2.7 1010mol.L1 and Ki was 2.9 1011mol.L1 . The 2-DE revealed spots with isoelectric points between pH 5 and 6, and one near pH 8. pTTI action on leptin decrease was confirmed. We conclude that pTTI is a Kunitz trypsin inhibitor with possible biotechnological health-related applicationTese Bioprospecção de compostos do fungo Langermannia bicolor: potencial modulador de antibióticos, atividade antioxidante e avaliação de toxicidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2024-12-04) Moura, Geovanna Maria de Medeiros; Santos, Elizeu Antunes dos; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; https://orcid.org/0000-0003-4372-2161; http://lattes.cnpq.br/6762251930590306; https://orcid.org/0000-0002-3480-2218; http://lattes.cnpq.br/0915146393491834; Veras, Bruno Oliveira de; Oliveira, Maria Tatiana Alves; Santos, Paula Ivani Medeiros dos; Paiva, Weslley de SouzaA seleção e aumento da variedade de bactérias multirresistentes tem impulsionado a busca por novos agentes terapêuticos e adjuvantes. Neste estudo investigamos as propriedades de um extrato do cogumelo Langermannia bicolor como modulador de antibióticos (gentamicina, norfloxacina e ampicilina) contra linhagens multirresistentes de Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, bem como a sua ação antioxidante e sua toxicidade in vitro e in vivo. O extrato bruto aquoso de L. bicolor foi fracionado com volumes crescentes de acetona, resultando em três frações (F0.5, F1 e F2), que apresentaram diferentes perfis bioquímicos. Testes com eritrócitos humanos revelaram que o extrato e as frações não possuem ação hemolítica, enquanto os ensaios de redução de MTT em células fibroblásticas (NHI/3T3), apenas o extrato bruto reduziu a viabilidade em 50%. Em diferentes estágios de desenvolvimento de zebrafish (Danio rerio), os ensaios in vivo confirmaram a ausência de toxicidade das frações, através de análises em briotóxicas, batimentos cárdiacos e testes comportamentais. Embora nenhuma fração tenha demonstrado atividade antibacteriana direta, todas exibiram efeitos moduladores significativos quando combinadas com antibióticos convencionais nas bactérias multirresistentes testadas. Notavelmente, a fração F2, rica em proteínas, com maiores atividades proteolíticas e hemaglutinante, reduziu a Concentração Inibitória Mínima (CIM) da gentamicina em todas as linhagens testadas. As frações também foram potentes antioxidantes in vitro e in vivo. A fraçãoF0.5, rica em compostos fenólicos e flavonoides, exibiu o espectro mais amplo de atividades antioxidantes, incluindo quelação de metais (Fe+2 e Cu+2), sequestro de radicais livres (OH• e O2-•) e proteção celular, concomitante e preventiva, contra estresse oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio (H2O2) em células 3T3. Já a fração F1, com predominância decarboidratos, após o estresse de H2O2, foi capaz de corrigir o dano oxidativo. In vivo, todas as frações protegeram os embriões de zebrafish expostos a H2O2.Na quantificação das espécies reativas de oxigênio (EROs) pela sonda fluorescente (DCFH), as larvas de zebrafish tratadas com a F0.5 e, em seguida, com H2O2 reduziram significativamente a produção de EROs em suas células, com valores menores, até, do que os das larvas não expostas ao agente oxidante. De forma menos expressiva, F1 e F2 também protegeram as células do zebrafish, reduzindo a produção de EROs. Ao explorar de forma pioneira o potencial terapêutico de L. bicolor, nosso estudo pavimenta o caminho para investigações futuras, mais aprofundadas, sobre a composição de bioativos desse cogumelo e seus respectivos mecanismos moleculares, envolvidos nas propriedades encontradas: potencialização de antibióticos e proteção contra o estresse oxidativo.