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Aspectos clínicos e infecção natural por Leishmania infantum em canis familiaris do município de Natal, Estado do Rio Grande do Norte, Brasil
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2023-11-28) Dias, Lumenna Azevedo; Silva, Andressa Noronha Barbosa da; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; https://orcid.org/0000-0001-7337-9320; http://lattes.cnpq.br/5445255186647578; https://orcid.org/0000-0002-6584-5771; http://lattes.cnpq.br/2721128645663357; http://lattes.cnpq.br/6088693396861104; Batista, Lucas Abrantes; https://orcid.org/0000-0001-5149-0909; http://lattes.cnpq.br/5387725518532072; Silva, Ana Clara Oliveira da; http://lattes.cnpq.br/8017698830473550
A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é uma zoonose causada pelo protozoário do gênero Leishmania e tem o cão como o seu principal reservatório em áreas urbanas. O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos clínicos e a infecção natural por Leishmania infantum em Canis familiaris no Município de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil. Um total de 77 cães provenientes da Unidade de Vigilância de Zoonoses/Natal foram utilizados para este estudo. A infecção por Leishmania infantum foi verificada por exames parasitológicos da cultura de amostras do linfonodo poplíteo e medula óssea. Os animais foram submetidos a avaliações clínicas e posteriormente testados, seguindo o protocolo para diagnóstico da doença: TR-DPP-Bio Manguinhos e ELISA. Dos cães positivos no TR-DPP, 65,1% (41/63) apresentaram o parasito na cultura. No ELISA, 80,6% (29/36) dos animais que foram sorologicamente reativos, posteriormente apresentaram o parasito na cultura. Formas sugestivas de promastigotas de Leishmania infantum foram observadas em culturas provenientes de 61,0% (47/77) dos animais. O parasito foi identificado tanto no linfonodo poplíteo quanto na medula óssea em 40,4% (19/47) dos cães. O sinal clínico mais observado nesses animais foi a alopecia (76,6% - 36/47). Além disso, 55,3% (26/47) dos cães eram polissintomáticos, 34% (16/47) oligossintomáticos e 10,6% (5/47) assintomáticos. Os dados do estudo revelaram a presença de cães com LVC em vários bairros de Natal. Isso destaca a necessidade de fortalecer a vigilância epidemiológica e as medidas preventivas e de controle para conter a transmissão do parasito.
Avaliação da expressão de receptores da imunidade inata em linhagens de camundongos suscetíveis e resistentes a infecção pelo Schistosoma mansoni
(2016-01-29) Lima, Janete Cunha; Guedes, Paulo Marcos da Matta; Melo, Alan Lane de; ; http://lattes.cnpq.br/5549358735432795; ; http://lattes.cnpq.br/5445410844075357; ; http://lattes.cnpq.br/4092310916480803; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; ; http://lattes.cnpq.br/5445255186647578; Andrade, Cléber de Mesquita; ; http://lattes.cnpq.br/6366550343886595
O presente estudo objetivou avaliar a expressão dos receptores da imunidade inata em linhagens de camundongos suscetíveis e resistentes à infecção pelo Schistosoma mansoni. Cerca de 30 cercárias da cepa LE do S. mansoni foram inoculadas por via subcutânea em camundongos machos das linhagens Balb/c, C57BL/6 e Swiss. Duas, sete, 12 e 16 semanas após a infecção (SAI) os camundongos foram mortos e quando possível foram avaliados os seguintes parâmetros: parasitismo (por meio de perfusão hepática), oograma, presença de granulomas hepáticos, e expressão do RNA mensageiro (RNAm) de citocinas da imunidade inata (IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12p35, IL-18 e TNF-α), dos receptores do tipo Toll (TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9), dos receptores do tipo Nod (NALP1 e NALP3) e moléculas adaptadoras (Myd88, ASC, Caspase-1) em tecido hepático, por meio de PCR em tempo real. Camundongos Balb/c e C57BL/6 apresentaram sobrevivência de 70%, enquanto camundongos Swiss apresentaram sobrevivência de 100%, quando avaliados até 16 SAI. Em duas SAI os camundongos Swiss apresentaram maior expressão do RNAm de NLRP1, NLRP3, Caspase-1, IL-1β e IL-18, quando comparados aos Balb/c e C57BL/6. Os animais das linhagens Balb/c e C57BL/6 apresentaram maior expressão do RNAm de TLR2, TLR3, TLR5, NLRP3 e ASC em sete SAI, quando comparados aos Swiss. Em adição, a linhagem Balb/c apresentou expressão aumentada do RNAm de TLR6, TLR7, TLR9, Myd88, NLRP1 e TNF-α. Ademais, camundongos Swiss apresentam menor quantidade de parasitos adultos no sistema porta hepático e menor quantidade de ovos no fragmento íleo distal, em sete e 12 SAI, quando comparados aos C57BL/6 e Balb/c. Em conclusão, os camundongos C57BL/6 e Balb/c apresentam expressão elevada dos receptores TLRs e NLRs em sete SAI (início da oviposição), sugerindo maior suscetibilidade a infecção, com consequente aumento na taxa de mortalidade nestes animais. Outrossim, camundongos Swiss apresentam acentuado perfil inflamatório inicial (em duas SAI), o que poderia auxiliar no controle do parasitismo. E a supressão da ativação dos receptores e citocinas da imunidade inata, em sete SAI, poderiam ocasionar menor mortalidade e maior resistência à infecção neste período.
Avaliação da infecção por Trypanosoma cruzi em triatomíneos em municípios considerados de alto risco de transmissão no Rio Grande do Norte, Brasil
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2025-02-20) Silva, Odair José Queiroz da; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; Silva, Andressa Noronha Barbosa da; https://orcid.org/0000-0001-7337-9320; http://lattes.cnpq.br/5445255186647578; https://orcid.org/0009-0004-9161-1081; http://lattes.cnpq.br/5721162971304714; Vieira, Thallyta Maria; Guedes, Paulo Marcos da Matta
O estado do Rio Grande do Norte (RN) é endêmico para a doença de Chagas, apresentando 36 municípios de alto risco de transmissão do Trypanosoma cruzi. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência da infecção natural por T. cruzi em triatomíneos capturados em ambiente silvestre e unidades domiciliares (UDs) nos municípios de alto risco de transmissão do parasito no RN. Os triatomíneos foram coletados nas UDs e ambiente silvestre, identificados e o conteúdo intestinal foi analisado por exame direto, xenocultura e PCR do kDNA para a detecção do parasito. Um total de 22 UDs foram investigadas, sendo 14 no município de São Tomé e seis em Sítio Novo, e a presença de triatomíneos foi registrada em 21,4% (3/14) e 16,7% (1/6), respectivamente. O município de São Tomé apresentou um percentual elevado de triatomíneos infectados, correspondendo a 14,2%. Nas UDs, 40 espécimes de triatomíneos foram capturados e a única espécie identificada foi Triatoma brasiliensis, com índice de infecção natural por T. cruzi foi de 7,5%. No ambiente silvestre, a maior diversidade de espécies foi encontrada na ESEC-Seridó, onde foram capturados exemplares de T. brasiliensis, Triatoma pseudomaculata, Panstrongylus lutzi e Triatoma sp. Triatoma brasiliensis foi a espécie mais capturada tanto na ESEC-Seridó quanto em Sítio Novo. Esses dados ressaltam a importância da vigilância e controle constantes nos municípios de alto risco para prevenir a transmissão do T. cruzi para os seres humanos e animais.
Avaliação do método FAMACHA© para detecção de anemia por Haemonchus contortus em rebanhos caprinos e ovinos
(2019-02-26) Souza Júnior, Rogério Damião de; Medeiros, Lilian Giotto Zaros de; ; ; Bezerra, Ana Carla Diogenes Suassuna; ; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da;
O objetivo do presente estudo foi comparar sensibilidade e especificidade do método FAMACHA© na detecção de anemia por Haemonchus contortus em rebanhos caprinos e ovinos. Para isso foram avaliados rebanhos caprinos e ovinos provenientes da Embrapa Caprinos e Ovinos e da EAJ/UFRN, formados por 264 ovinos mestiços e 256 caprinos mestiços, por um período entre 98 e 225 dias, totalizando 4568 observações para ovinos e 825 para caprinos. Quatro valores padrão de volume globular (VG) ≤15%, ≤18%, ≤19%, ≤22%, foram usados para confirmar a anemia. Foram determinadas a especificidade (Sp) e sensibilidade (Se). A relação entre FAMACHA© , VG e contagem de ovos por grama de fezes (OPG) foi calculada através do coeficiente de correlação de Spearman Para avaliar a concordância entre FAMACHA© e VG, foi calculado o valor Kappa (Ƙ). Em todos os pontos de corte de VG, a Se do FAMACHA© nos ovinos da Embrapa Caprinos e Ovinos aumentou quando os animais FAMACHA© 3 foram incluídos como anêmicos (75% a 92%). A Sp foi maior nos caprinos do que nos ovinos em todos os pontos de corte de VG quando os animais FAMACHA© 3 não foram incluídos como anêmicos (99,4% e 99,8%). Para o rebanho ovino da EAJ/UFRN, foram observados maiores valores de Se quando animais FAMACHA© 3 foram incluídos como anêmicos (48,5% a 51%). Já a Sp desses animais variou de 88,1% a 90,1% quando os animais FAMACHA© 3 não foram incluídos como anêmicos. A avaliação do método FAMACHA© para os caprinos da EAJ/UFRN não foi significativo, uma vez que a carga parasitária de H. contortus não alcançou o mínimo de 60% recomendado. Os maiores valores de classificação correta foram encontrados em todos os pontos de corte de VG para ambos os rebanhos da Embrapa Caprinos e Ovinos quando FAMACHA© 4 e 5 foram considerados positivos para anemia (75,7% a 91% para ovinos e 82,1% a 98,5% para caprinos). Nos ovinos da EAJ/UFRN os maiores valores de classificação correta foram encontrados quando os animais FAMACHA© 3 não foram incluídos como anêmicos (65,13% a 78,2%). O valor Ƙ para ovinos do rebanho da Embrapa Caprinos e Ovinos variou entre 0,320 < Ƙ < 0,560, sendo maior quando a categoria FAMACHA© 3 não foi incluída como positiva para anemia, indicando uma concordância de razoável a moderada. Para os caprinos foi observado o valor Ƙ=0,620 para o VG ≤19, inferindo-se uma concordância substancial. No rebanho da EAJ/UFRN, os valores Ƙ indicaram uma concordância razoável para os ovinos (0,067 < Ƙ < 0,074) e uma fraca concordância para os caprinos (Ƙ ≤ 0,02, p>0,05). Estes resultados corroboram a aplicabilidade do método FAMACHA© em casos de hemocose em ambos os rebanhos. O ponto de corte de VG ≤15 se mostrou adequado para ambas às espécies por apresentar altos índices de sensibilidade, porém estudos que objetivem uma melhor padronização dos pontos de corte do VG em caprinos ainda são necessários para aumentar a Se do método para essa espécie.
Carreadores lipídicos nanoestruturados contendo óleo de urucum (Bixa orellana L.): uma alternativa para o tratamento da leishmaniose cutânea
(2018-07-31) Ferreira, Marianna Araújo; Moura, Tulio Flávio Accioly de Lima e; Barbosa, Raquel de Melo; ; ; ; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; ; Pergher, Sibele Berenice Castella; ; Chaud, Marco Vinícius;
A leishmaniose é uma das principais Doenças Tropicais Negligenciadas (DTN). Todos os anos milhões de pessoas são infectadas, no entanto os fármacos utilizados apresentam muitos efeitos adversos e baixa efetividade. Dessa forma o desenvolvimento de alternativas medicamentosas se faz necessário. A nanotecnologia vem se destacando por apresentar soluções eficientes no desenvolvimento de novos medicamentos. Por esse motivo o intuito desse trabalho foi incorporar a fração oleosa do urucum (Bixa orellana L.), ativo vegetal com comprovada ação contra parasitas do gênero Leishmania, a Carreadores Lipídicos Nanoestruturados (CLN). As nanopartículas foram produzidas pelo método de fusãoemulsificação e caracterizadas quanto ao tamanho de partícula, índice de polidispersão, morfologia, potencial zeta, estabilidade frente a estocagem, eficiência de encapsulação, perfil de degradação térmica, perfil cristalino, citotoxicidade in vitro, atividade antileishmania in vitro e avaliação da influência de 3% (m/m) da argila sintética Laponita® sobre o sistema. Análises dos resultados mostraram a efetividade do método de produção, com a obtenção de nanopartículas variando entre 173,73 nm ± 1,15 e 185,23 nm ± 1,80, polidispersão menor que 0,3 e potencial zeta entre -23,07 mV ± 0,15 e -39,13 mV ± 0,50 e estabilidade durante o tempo de estocagem, mesmo com a presença da Laponita®. A perda de massa das formulações ocorreu apenas em elevadas temperaturas (≅ 200ºC). A estrutura cristalina dos nanocarreadores promoveu o encapsulamento de 78,92 ± 2,89 e 52,54 ± 3,41 nas formulações com 2% e 4% de óleo de urucum, respectivamente. Os carreadores apresentaram atividade antileishmania similar à Anfotericina B e maior que o Glucantime® e o óleo de urucum não encapsulado. Esses resultados demonstram um sistema estável e com atividade biológica comprovada, devendo ser, portanto, visto como uma alternativa terapêutica para o tratamento das manifestações cutâneas da leishmaniose.
Determinação de patogenicidade e resistência à sulfadiazina de três isolados de Toxoplasma gondii do Estado do Rio Grande do Norte e atividade anti-toxoplasma do timol e estragol
(2016-02-25) Oliveira, Cláudio Bruno Silva de; ; ; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; ; Cavalcanti, Marília Gabriela dos Santos; ; Andrade, Milena de Medeiros Clementino; ; Guedes, Paulo Marcos da Matta;
Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular obrigatório amplamente distribuído, ele é o etiológico da toxoplasmose, doença de curso normalmente benigno que pode ter sérias repercursões em imunossuprimidos e fetos congenitamente infectados. Esta doença é uma das principais responsáveis por hospitalização relacionada à alimentos e, considerando o padrão atípico pelo qual esta se observa no Brasil, os efeitos adversos no tratamento-padrão e os fenótipos emergentes de resistência o presente estudo teve como objetivo padronizar a manutenção e determinar o perfil de patogenicidade e resistência à sulfadiazina de isolados locais do T. gondii; verificar o potencial imunogênico e alterações comportamentais; além de avaliar o potencial antiparasitário do timol e estragol versus cepa clonal e isolados locais do parasito. O efeito citopático induzido pelo parasito foi avaliado em cultura de células RAW 264.7 e a patogenicidade foi determinada em modelo murino após infecção com monitoramento por 30 dias e confirmada por PCR-RFLP, usando o marcador CS3. A resistência fenotípica à sulfadiazina foi medida utilizando de uma curva de doses em animais infectados (100, 200 ou 300 mg/kg) e a atividade anti-Toxoplasma do timol e estragol contra isolados locais e cepa padrão foram determinadas em camundongos Suiços infectados e tratados durante 6 dias. As alterações na memória/aprendizado e impulsividade foram avaliados em labirinto em cruz elevado. Polimorfismos foram determinados por sequenciamento do gene DHPS. Amostras de sangue foram coletadas de camundongos C57BL/6 para o ELISA e dosagem de citocinas em camundongos C57BL/6. O efeito citopático e a PCR-RFLP mostraram que os isolados de galinhas representam diferentes populações do parasito. O isolado Ck3 foi o mais patogênico in vivo, o isolado moderadamente patogênico Ck2 induziu uma resposta humoral e alterações comportamentais diferentes da cepa ME49. Falhas terapêuticas foram observadas nos animais infectados com Ck3 e Pg1 e tratados com sulfadiazina, porém não foram observados polimorfismos no gene DHPS. Foi possível estabelecer um modelo para determinação da atividade anti-Toxoplasma de novos compostos e, através deste, foi obervado que timol e estragol apresentaram efetividade contra a cepa ME49, mas apenas o estragol apresentou ação contra o isolado Ck2, com forte resposta Th1. Timol, estragol e sulfadiazina não tiveram ação contra Ck3 e Pg1. Estes perfis atípicos de patogenicidade e resistência dos parasitos locais foram observados de forma inédita e podem explicar os perfis diferenciados da toxoplasmose observados nessa região.
Distribuição da fauna triatomínica e infecção natural pelo Trypanosoma cruzi em diferentes municípios do semiárido do Rio Grande do Norte
(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-03-26) Silva, Andressa Noronha Barbosa da; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; ; http://lattes.cnpq.br/5445255186647578; ; http://lattes.cnpq.br/6437957961133013; ; http://lattes.cnpq.br/2721128645663357; Diotaiuti, Lileia Gonçalves; ; http://lattes.cnpq.br/9211345386050612; Guedes, Paulo Marcos da Matta; ; http://lattes.cnpq.br/5445410844075357
A distribuição da fauna triatomínica e a infecção natural pelo Trypanosoma cruzi foi avaliada visando compreender a dinâmica de transmissão deste parasito na zona rural do estado do Rio Grande do Norte e, a pesquisa do Trypanosoma rangeli também foi investigada. As capturas de triatomíneos nos ambientes, silvestre, peridomiciliar e domiciliar de diferentes municípios das mesorregiões central e oeste desse estado. Os insetos foram identificados e examinados pelo método direto, xenocultura e PCR para a identificação do T. cruzi. Para a detecção do T. rangeli foi realizado o exame direto da hemolinfa e a PCR multiplex de 151 espécimes infectados pelo T. cruzi. Dos 824 insetos capturados, as espécies foram distribuídas em T. brasiliensis (66,4%), T. pseudomaculata (18,2%), Panstrongylus lutzi (12,7%) e Rhodnius nasutus (2,7%), e o T. brasiliensis foi encontrado na maioria dos municípios avaliados. As espécies foram capturadas nos estágios de ninfa e adulto, exceto P. lutzi, exclusivamente no estágio adulto. No ambiente silvestre foram capturadas as espécies T. brasiliensis (57%), P. lutzi (28%) e T. pseudomaculata (15%). No ambiente peridomiciliar foram identificadas T. brasiliensis (74%), T. pseudomaculata (21%) e R. nasutus (5,0%), enquanto no intradomicílio somente o T. brasiliensis. O índice de infecção dos triatomíneos pelo T. cruzi foi 30,4%, o P. lutzi mostrou o índice mais elevado (78,0%), seguida do T. brasiliensis (24,4%), T. pseudomaculata (22,6%) e R. nasutus (4,5%). Os índices de triatomíneos infectados nos ambientes silvestre, peridomiciliar e domiciliar foram 41,8%, 20,1% e 50,0%, respectivamente. O T. rangeli foi detectado apenas pela PCR multiplex em 2,6% (4/151) dos insetos examinados, desses 4,4% (3/67) foram de T. brasiliensis e 1,5% (1/63) de P. lutzi. Os dados mostraram que a positividade do P. lutzi aliada a sua capacidade de invadir o domicílio atraído pela luz, sugere uma provável participação deste inseto no intercâmbio entre os ciclos epidemiológicos de transmissão do T. cruzi. A espécie T. brasiliensis foi a única presente em todos os ambientes, o que reforça sua importância em relação à capacidade de adaptação ao ambiente doméstico, potencial como vetor e manutenção dos ciclos de transmissão silvestre e doméstico no semiárido indicando a necessidade de ações contínuas na vigilância epidemiológica. A ocorrência do T. rangeli em T. brasiliensis e P. lutzi foi registrada pela primeira vez na zona rural deste estado, ampliando a área de ocorrência deste protozoário no nordeste do Brasil.
Seroepidemiology of Trypanosoma cruzi infection in the semiarid rural zone of the State of Rio Grande do Norte, Brazil
(Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 2012-05) Brito, Carlos Ramon do Nascimento; Sampaio, George Harisson Felinto; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da; Nunes, Daniela Ferreira; Azevedo, Paulo Roberto Medeiros de; Chiari, Egler; Galvão, Lúcia Maria da Cunha
A seroepidemiological survey was carried out to evaluate Trypanosoma cruzi infection in an endemic area of the State of Rio Grande do Norte, Brazil, involving rural residents. Methods: Sixteen municipalities were randomly selected, 15 from the west mesoregion and one from the central, with an estimated population of 83,852 individuals. A total of 1,950 blood samples were collected in the west mesoregion and 390 in Caicó. Anti-T. cruzi antibodies were detected using the Chagatest® ELISA HAI-hemagglutination kits and indirect immunofluorescence. As sera presented indeterminate results, TESAcruzi® western blot was performed to confirm reactivity. Results: An estimated seroprevalence of 6.5% was determined for the west mesoregion and 3.3% for Caicó. Seropositivity rises progressively with the age of individuals, up to 40 years in Caicó and up to 50 years in the west mesoregion. Only educational level and knowledge regarding the triatomine were associated with seropositivity. No seroreactive individuals under 18 years of age were identified. Conclusions: Infection by T. cruzi remains high and is concentrated in municipalities in the central western area of the west mesoregion; however, evidence suggests a decline in vector transmission in this mesoregion and in Caicó. Epidemiological variables appear not to influence seropositivity, with the exception of education and knowledge concerning the triatomine, among seroreactive individuals from the west mesoregion.
Trypanosoma cruzi III causing the indeterminate form of Chagas disease in a semi-arid region of Brazil
(Elsevier, 2015-08) Martins, Kiev; Andrade, Cléber de Mesquita; Barbosa-Silva, Andressa Noronha; Nascimento, Gerson Barbosa do; Chiari, Egler; Galvão, Lúcia Maria da Cunha; Câmara, Antonia Cláudia Jácome da
Objective: Trypanosoma cruzi is subdivided into six discrete typing units (DTUs), TcI–TcVI. The precise identification of each can contribute to tracking wild DTUs that invade the domiciliary environment. Methods: Twenty T. cruzi stocks isolated from 16 chagasic patients, two Panstrongylus lutzi, one Galea spixii, and one Euphractus sexcinctus, from different localities in the State of Rio Grande do Norte, Brazil, were characterized by genotyping the 30 region of the 24Sa rRNA gene, the mitochondrial cytochrome oxidase subunit 2 gene, and the spliced leader intergenic region. Results: TcIII was identified in 18.7% (3/16) of patients from different municipalities, as well as in P. lutzi, G. spixii, and E. sexcinctus, indicating the connection between the sylvatic and domestic cycles in this Brazilian semi-arid region. TcI and TcII were also detected, in 37.5% (6/16) and 43.8% (7/16) of patients, respectively. These DTUs were associated with cardiac, digestive, and indeterminate clinical forms, while TcIII was identified only in patients with the indeterminate form. Conclusions: The occurrence of these DTUs reveals important phylogenetic diversity in T. cruzi isolates from humans. TcIII is reported for the first time in northeastern Brazil. These findings appear to indicate an overlap between the sylvatic and domestic transmission cycles of the parasite in this region.

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