Navegando por Autor "Barbosa, Carlos Augusto Galvão"
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Dissertação Adesão de células mesenquimais da medula óssea de camundongos e do ligamento periodontal de ratos a diferentes superfícies de titânio: estudo comparativo in vitro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2008-12-19) Alves, Luciana Bastos; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/8158498939467841; Lins, Ruthnéia Diógenes Alves Uchôa; ; http://lattes.cnpq.br/4462076152744400; Barbosa, Gustavo Augusto Seabra; ; http://lattes.cnpq.br/0788938137723541O presente trabalho utilizou a cultura celular para analisar a capacidade de adesão de células mesenquimais da medula óssea de camundongos e do ligamento periodontal de ratos a diferentes superfícies de titânio. Para tanto, foram utilizados discos de titânio grau II ASTM F86 nas dimensões de 15mm de diâmetro por 1,5mm de espessura, os quais receberam diferentes tratamentos de superfície em 2 grupos distintos (polido e nitretação a plasma por gaiola catódica). As células foram isoladas da medula óssea de camundongos e do ligamento periodontal de ratos e cultivadas em meio de cultura meio básico α-MEM contendo antibióticos e suplementado com 10% de FBS, por 72 horas, em atmosfera úmida com 5% de CO2 a 37ºC. No subcultivo as células foram cultivadas em 1 placa de 24 poços, na densidade de 1 x 104 células por poço, onde os discos de titânio foram distribuídos de acordo com os grupos, incluindo-se controles positivos sem os discos de titânio. Após 24 horas de cultivo, as células foram submetidas a contagem em câmara de Neubauer. Os resultados analisados mostraram que tanto as células mesenquimais da medula óssea de camundongos como as células do ligamento periodontal de ratos tiveram melhor adesão à superfície controle. O número de células da medula óssea aderidas a superfície de Ti polido não foi estatisticamente significante quando comparado ao mesmo tipo celular aderido à superfície de Ti tratada por plasma na configuração de gaiola catódica, entretanto diferença significante foi encontrada entre o grupo controle e o grupo Ti polido. Com relação à adesão das células do ligamento periodontal, diferença significativa foi encontrada apenas entre as superfícies controle e as superfícies de Ti tratadas por plasma. No que diz respeito às comparações entre superfícies iguais com células diferentes, não foi observada nenhuma diferença estatisticamente significante. Portanto, conclui-se que o titânio é um bom biomaterial para a adesão de células mesenquimais e que as diferentes formas de tratamento de superfície dada ao material podem influenciar neste processoTese Adesão, proliferação e genotoxicidade celular de celulose bacteriana modificada por plasma(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2010-06-07) Silva, Naisandra Bezerra da; Alves Júnior, Clodomiro; ; http://lattes.cnpq.br/7441669258580942; ; http://lattes.cnpq.br/6590909272236189; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Guerra Neto, Custódio Leopoldino Brito; ; http://lattes.cnpq.br/5387010100082241; Peixoto, Christina Alves; ; http://lattes.cnpq.br/9533923853937162; Weissmuller, Gilberto; ; http://lattes.cnpq.br/8065187901142626A celulose bacteriana (CB) é utilizada, geralmente como uma membrana temporária, na substituição de pele lesionada, em feridas, queimaduras, ulcerações ou como enxerto. Modificações em sua superfície podem determinar respostas no funcionamento celular dos tecidos adjacentes, influenciando sua biocompatibilidade. Este estudo apresenta a primeira avaliação da influência de nanopartículas de celulose bacteriana e de membranas de celulose bacteriana com superfície modificada por plasma (CBP) no comportamento e genotoxicidade celular. Inicialmente, a proliferação celular foi avaliada com o teste MTT e danos ao DNA foram avaliados utilizando-se os testes Cometa e Kado, sob a influencia das concentrações de 0,1; 0,5 e 1,0 mg/ml de nanofibras de CB em contato com fibroblastos 3T3 e células CHO-K1. Os resultados obtidos nessas análises revelaram que a proliferação celular, para os dois tipos de células, foi cerca de 15-20% menor na presença de NFs, após 72h de cultivo celular, independentemente da concentração utilizada, estas também não promoveram dano significativo ao DNA. Em um segundo trabalho, membranas de celulose bacteriana foram submetidas ao plasma em atmosfera contendo 70%N2 e 30% de O2. Posteriormente foram caracterizadas por MEV e AFM e submetidas aos ensaios cometa, micronúcleo, de adesão e proliferação celular. Os resultados revelaram que o plasma modificou a superfície da CBP produzindo uma rugosidade de aproximadamente 70± 5,1 nm. Na CBP, as células tornaram-se mais alongadas com proliferação maior, provavelmente, influenciadas pelo aumento da rugosidade da superfície. A nova superfície gerada também não foi xii genotóxica. Face ao exposto, este estudo gerou um novo biomaterial que pode ser testado in vivo com futuro potencial para implante artificialTese Análise comparativa da imunoexpressão de GLUT-1, GLUT-3 e M-CSF em lesão periférica e central de células gigantes(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-12-18) Vasconcelos, Rodrigo Gadelha; Queiroz, Lelia Maria Guedes; ; http://lattes.cnpq.br/3265824235655776; ; http://lattes.cnpq.br/0935664051881901; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Silveira, Ericka Janine Dantas da; ; http://lattes.cnpq.br/2186658404241838; Nunez, Manuel Antonio Gordon; ; http://lattes.cnpq.br/6553619409299152; Alves, Pollianna Muniz; ; http://lattes.cnpq.br/4860117599607892A lesão periférica de células gigantes (LPCG) e a lesão central de células gigantes (LCCG) são lesões histologicamente semelhantes que acometem a região de cabeça e pescoço. O estudo teve a finalidade de analisar a expressão imuno-histoquímica através dos marcadores GLUT-1, GLUT-3 e M-CSF em uma série de casos de lesão periférica e central de células gigantes, na tentativa de estabelecer possíveis associações e correlações entre a expressão destas proteínas nessas lesões, buscando uma melhor compreensão do diferente comportamento biológico dessas entidades patológicas. A amostra foi constituída por 20 espécimes teciduais emblocados em parafina de LPCG, 20 de LCCG não agressivo e 20 de LCCG agressivo, oriundos do Serviço de Anatomia Patológica da Disciplina de Patologia Oral do Departamento de Odontologia da UFRN. Em relação ao GLUT-1, verificou-se uma diferença estatisticamente significante (p< 0,05) na quantidade de células mononucleares imunomarcadas entre a lesão periférica (LP) e a lesão central não agressiva (LCNA) e entre a LP e a lesão central agressiva (LCA). Em relação à intensidade da marcação também foi verificado uma diferença estatisticamente significante tanto para as células mononucleares quanto para as células gigantes entre LP e LCNA e entre LP e LCA, nas células gigantes também ocorreu uma diferença estatisticamente significante entre a LCNA e a LCA. Em relação ao GLUT-3, foi encontrada uma diferença estatisticamente significante entre LP e LCA e entre LCNA e LCA na quantidade de células mononucleares imunomarcadas. No que concerne à intensidade de marcação para a referida proteína foi verificado uma diferença estatisticamente significante nas células gigantes entre LP e LCA. Para o M-CSF foi observado apenas uma diferença estatisticamente significante na intensidade de marcação nas células mononucleares entre LP e LCNA e entre LP e LCA. Com base nestes resultados, pode-se concluir a participação do GLUT-1, GLUT-3 e do M-CSF na patogênese das lesões estudadas. Os transportadores de glicose estariam envolvidos no fornecimento de energia, para o metabolismo energético das células e a proteína osteoclastogênica estaria envolvida no mecanismo de reabsorção óssea encontrada nessas lesões.Dissertação Atividade biológica de células-tronco da polpa de dentes decíduos humanos submetidas à criopreservação(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-02-14) Antunes, Fernanda Ginani; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/4031509110803993; Santos, Jean Nunes dos; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4728907T1; Souza, Lélia Batista de; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787927Z7&dataRevisao=nullCélulas-tronco da polpa dental humana têm sido amplamente investigadas em razão da sua capacidade de diferenciar-se tanto em células dentais quanto não dentais, com potencial de utilização em terapias envolvendo a engenharia de tecidos. A técnica de criopreservação celular representa uma alternativa viável para a conservação dessas células, já que cessa reversivelmente, de forma controlada, todas as suas funções biológicas em uma temperatura ultra-baixa. O presente estudo teve como objetivo avaliar, através de experimentos in vitro, a influência de um protocolo de criopreservação na atividade biológica de células-tronco da polpa de dentes humanos d ecíduos esfoliados (SHED). Células obtidas da polpa de três dentes decíduos em estágio final de esfoliação ou com exodontia indicada foram expandidas em meio de cultivo α-MEM suplementado com antibióticos e 15% de soro fetal bovino. No segundo subcultivo (P2), um grupo de células foi submetido a criopreservação por 30 dias em DMSO diluído a 10% em soro fetal bovino, a 80ºC negativos, enquanto o restante seguiu em condições normais de cultivo. A proliferação celular em ambos os grupos (criopreservado e não criopreservado) foi avaliada através do método de coloração por azul de Tripan nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após o plaqueamento. Nestes mesmos intervalos foi realizada a análise do ciclo celular das SHEDs submetidas ou não ao protocolo de criopreservação. Os eventos relacionados à morte celular foram analisados através da expressão de Anexina V e PI em citometria de fluxo, nos intervalos de 24 e 72 horas. A presença de alterações morfológicas nucleares foi avaliada através da marcação por DAPI no intervalo de 72 horas. Observou-se que ambos os grupos exibiram uma curva de proliferação celular ascendente, sem alterações consideráveis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribuição das células nas fases do ciclo celular foi coerente com células em proliferação nos dois grupos. Não foram observados danos morfológicos nucleares no intervalo final do experimento . Deste modo, conclui-se que o protocolo de criopreservação proposto é eficiente para o armazenamento do tipo celular estudado, permitindo a sua utilização em futuros estudos experimentaisDissertação Avaliação da atividade biológica de células-tronco da polpa dental humana submetidas ao laser de baixa intensidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-12-18) Araújo, Ivana Maria Zaccara Cunha; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; Lins, Ruthinéia Diógenes Alves Uchôa; http://lattes.cnpq.br/4462076152744400; Leitão, Águida Cristina Gomes Henriques; http://lattes.cnpq.br/2563401100488039O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizado com a finalidade de promover cicatrização e regeneração dos tecidos. A literatura mostra um efeito positivo do LBI na proliferação celular, porém pouco se sabe sobre a sua eficácia na proliferação de células-tronco dentais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da irradiação do LBI na atividade biológica de células-tronco da polpa de dente permanente (DPSCs). Extratos de polpa dental foram isolados de cinco terceiros molares hígidos removidos por indicação cirúrgica e/ou ortodôntica. Após a digestão enzimática, as células foram caracterizadas e cultivadas em meio de cultura αMEM suplementado com antibióticos e 15% de soro fetal bovino. No terceiro subcultivo, as células foram irradiadas com um laser diodo InGaAlP, utilizando-se duas diferentes densidades de energia (0,5 J/cm2 - 16 segundos e 1,0 J/cm² - 33 segundos), comprimento de onda de 660nm e potência de 30mW. Uma nova irradiação, utilizando os mesmos parâmetros, foi realizada 48 h após a primeira. Um grupo controle (não irradiado) foi mantido nas mesmas condições experimentais de cultivo. A fim de avaliar a proliferação celular, foram utilizados o método exclusão por Azul de Tripan e a viabilidade celular medida através do ensaio de MTT, nos intervalos de 24, 48, 72 e 96 h após a primeira aplicação do laser. Nos mesmos intervalos foram avaliados os eventos do ciclo celular. Eventos relacionados à morte celular foram analisados por citometria de fluxo nos intervalos de 24 e 72 horas. Os dados das contagens celulares foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando um intervalo de confiança de 95%. Os resultados mostraram que os dois grupos irradiados exibiram uma curva de proliferação mais ascendente, com diferença estatisticamente significante (p<0,05) em relação ao grupo controle nos intervalos de 72 e 96h, sem alterações consideráveis na viabilidade celular ao longo do experimento. A distribuição das células nas fases do ciclo celular foi coerente com células em proliferação nos três grupos. Os resultados da curva de crescimento, MTT, Anexina/PI e Ciclo celular foram concordantes, dessa forma é possível concluir que o LLLI, principalmente com dose de 1,0J/cm2 , seja uma terapia de grande importância para o futuro da engenharia tecidual e medicina regenerativa envolvendo DPSCs, uma vez que neste estudo o LLLI contribuiu com o crescimento e viabilidade celular.Dissertação Avaliação imuno-histoquímica da BMP-2, BMP-4 e seus receptores (BMPRIA e BMPRII) em ameloblastomas e tumor odontogênico adenomatóide(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-02-14) Nascimento, Marcelo Anderson Barbosa; Souza, Lélia Batista de; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787927Z7&dataRevisao=null; ; http://lattes.cnpq.br/3579395672978389; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Santos, Pedro Paulo de Andrade; ; http://lattes.cnpq.br/2878739335493429As BMPs são componentes da superfamília de ligantes do fator transformador de crescimento-β (TGF-β), secretados no meio extracelular, com mecanismos de comunicação intercelular por meio de ligantes e receptores específicos em diversas células-alvo, sendo reconhecidas por sua influência na indução osteogênica, também desempenhando importante papel na homeostase tecidual, proliferação celular, no controle de diferenciação, além de estar presente no desenvolvimento de diversas neoplasias. O objetivo deste estudo foi comparar a expressão imuno-histoquímica da BMP-2, BMP-4 e seus receptores BMPRIA e BMPRII em casos de Ameloblastoma e Tumor odontogênico adenomatóide. A amostra foi constituída de 20 casos de Ameloblastoma sólido (AS), 10 casos de Ameloblastoma unicístico (AU) e 16 casos de Tumor odontogênico adenomatóide (TOA). A expressão das BMPs e seus receptores foi avaliada no parênquima e estroma das lesões, estabelecendo-se o percentual de células imunopositivas (0 negativo; 1 - 1% a 10% das células positivas; 2 - 11% a 25% das células positivas; 3 - 26% a 50% das células positivas; 4 - 51% a 75% das células positivas; 5 - mais 75% de células positivas). A análise da expressão de BMP-2 não revelou diferenças estatisticamente significativas no componente parênquimatoso (p = 0,925) e estromal (p = 0,345) entre as lesões estudadas, assim como a BMP-4 (p = 0,873 / p = 0,131). No parênquima, o AS e TOA apresentaram maior frequência do escore 5. Por sua vez, todos os casos de AU foram classificados como escore 5. A análise do componente estromal revelou não haver diferença estatisticamente significativa entre os grupos em relação às medianas dos escores de positividade para BMPRIA (p = 0,768) e BMPRII (p = 0,779). No parênquima do AS e do AU, não foram observadas correlações estatisticamente significativas entre as imunoexpressões das proteínas analisadas. Por sua vez, no grupo dos TOAs, foram constatadas correlações positivas, estatisticamente significativas, entre os escores de expressão de todas as proteínas avaliadas. No componente estromal, foram constatadas correlações positivas, estatisticamente significativas, apenas no grupo do AS em BMP-4 e BMPRII (r = 0,476; p = 0,034) e do AU em BMP-4 e BMPRIA (r = 0,709; p = 0,022). Os resultados do presente estudo sugerem que as BMPs e seus receptores estão envolvidos no processo de desenvolvimento de tumores odontogênicos. A BMP-4, por sua vez, além de estar presente em tumores odontogênicos possui a capacidade de formação de material mineralizadoDissertação Avaliação in vitro da adesão e proliferação de células mesenquimais do ligamento periodontal humano em diferentes superfícies de titânio(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2011-02-04) Ribeiro, Rodrigo Alves; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/3105816408471985; Gurgel, Bruno César de Vasconcelos; ; http://lattes.cnpq.br/4649601602612601; Godoy, Gustavo Pina; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4751939A2Nos últimos anos, várias pesquisas científicas em Implantodontia têm buscado alternativas que proporcionem maior rapidez e qualidade no processo de osseointegração. Diferentes métodos de tratamento podem ser utilizados para modificar as propriedades topográficas e químicas da sua superfície do titânio, a fim de otimizar as reações tecido-implante através de uma resposta tecidual favorável. O presente trabalho teve como objetivo analisar a adesão e proliferação de células mesenquimais de ligamento periodontal humano a diferentes superfícies de titânio, através de técnicas de cultivo celular. Discos de titânio grau II receberam diferentes tratamentos de superfície, constituindo dois grupos distintos: polido e nitretado a plasma na configuração de gaiola catódica. Células mesenquimais obtidas do ligamento periodontal de dentes humanos hígidos foram cultivadas sobre os discos de titânio em placas de cultivo de 24 poços, na densidade de 2 x 104 células/poço, incluindo poços sem discos como controle positivo. Os dados obtidos das contagens das células aderidas às superfícies de titânio (grupo polido e grupo gaiola catódica) e à superfície plástica (grupo controle), nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após o plaqueamento, foram utilizados para analisar a adesão e proliferação celular e obter a curva de crescimento celular nos diferentes grupos. Os dados foram submetidos a análises não paramétricas e as diferenças entre os grupos foram comparadas pelos testes estatísticos Kruskal-Wallis e Friedman. Não foram encontradas diferenças estatísticas significativas nas contagens celulares entre os grupos estudados (p>0,05). Conclui-se que ambos os tratamentos produziram superfícies compatíveis com adesão e proliferação de células mesenquimais do ligamento periodontal humanoDissertação Avaliação microscópica dos fragmentos ósseos obtidos por diferentes métodos de osteotomia e de irrigação em aloenxertos irradiados e congelados de coelho(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2009-08-31) Leite, Pedro Henrique de Alencar e Silva; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/0349822061454594; Moura, Sérgio Adriane Bezerra de; ; http://lattes.cnpq.br/1323062374722389; Godoy, Gustavo Pina; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4751939A2Os defeitos ósseos bucais e faciais comprometem a aparência, o bem estar psicossocial e a função estomatognática dos seus portadores. Diante da necessidade de tratamento dessas patologias, surgiram, com o decorrer do tempo, diversas estratégias para a regeneração de defeitos ósseos, dentre elas o uso de aloenxerto ósseo congelado e irradiado. A manipulação dos enxertos ósseos ainda não está determinada, podendo-se observar várias alternativas de osteotomia. Este trabalho avaliou microscopicamente os fragmentos ósseos obtidos por diferentes métodos de osteotomia e de irrigação sobre anéis e blocos de aloenxertos irradiados e congelados a 80ºC negativos de coelho. O estudo é do tipo Experimental in vitro e teve como amostra 01 coelho, adulto, da raça New Zealand. O animal foi sacrificado para obtenção de ossos longos, os quais foram congelados a 80º negativos e irradiados com Cobalto-60. Em seguida, os ossos foram seccionados em 24 peças ósseas, divididos em quatros grupos: G1 (n=06) foi realizado a osteotomia com broca esférica nº 6 formando anéis com 5 mm de espessura com caneta de alta rotação com irrigação manual; G2 (n=06) foi realizado a osteotomia com broca esférica nº 6 formando anéis com 5 mm de espessura com motor cirúrgico com irrigação manual a uma rotação de 1500 rpm; GA (n=06), osteotomia com trefina usando irrigação manual com soro fisiológico; e GB (n=06), osteotomia com trefina usando soro fisiológico proveniente de bombas peristálticas do motor cirúrgico. De cada grupo, cinco peças ósseas foram destinadas à análise em Microscopia de Luz (ML) e uma analisada por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). A análise por ML levou em consideração a presença de tecido carbonizado. Na análise por MEV levou em consideração: superfície das bordas; presença de microfissuras e Smear Layer. Ao analisar a técnica de osteotomia utilizando MEV observa-se: maior presença de microfissuras ao corte com alta rotação; maior presença de áreas cobertas por uma camada de smear layer em cortes com motor de implante. Na analise da irrigação com MEV observou-se que: a presença de microfissuras não depende do tipo de irrigação; na irrigação manual, verificou-se uma discrepância maior entre as linhas de corte. Ao avaliar descritivamente o processo de osteotomia e irrigação na ML, verificou-se que: na análise histológica as margens ósseas apresentavam uma evidente camada alterada de tecido, composta por um tecido enegrecido de aspecto carbonizado, próximo ao osso cortical; nas margens da peça óssea foram observados fragmentos ósseos deslocados durante o corte ósseo e irregularidades ósseas. Após análise dos resultados, pode-se concluir que: houve maior regularidade do corte ósseo utilizando caneta de alta rotação do que motor de implante; o corte com trefina usando irrigação com bombas peristálticas do motor de implante se mostrou mais homogênea quando comparada à técnica com irrigação manual; tecido carbonizado foi encontrado em todos os espécimes ósseos obtidos, sem diferença estatisticamente significativa na proporção de carbonização nas duas técnicas de irrigação estudadasDissertação Estudo da descelularização tecidual na produção de arcabouços biológicos para enxertos(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-03-01) Osório Junior, Haroldo Abuana; Silva, José Sandro Pereira da; ; http://lattes.cnpq.br/7625795408417124; ; http://lattes.cnpq.br/7237236470895971; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Santos, Pedro Paulo de Andrade; ; http://lattes.cnpq.br/2878739335493429A regeneração de defeitos ósseos com perda de substância permanece um desafio terapêutico na área médica. É consenso ser o osso autógeno, o material mais adequado para esta finalidade, porém há limitações até para o seu uso, especialmente a quantidade insuficiente no próprio doador. Pesquisas de engenharia tecidual evidenciam que os componentes da matriz extracelular (MEC) são geralmente conservados entre as diferentes espécies sendo bem toleradas, mesmo em receptores xenógenos. Assim, diversos estudos têm sido realizados na busca por um arcabouço substituto do osso autógeno através da técnica de descelularização. Para a obtenção destes arcabouços, os tecidos devem passar por um processo de remoção celular, que cause mínimos efeitos adversos na composição, atividade biológica e integridade mecânica na matriz extracelular remanescente. Entretanto, há controvérsias acerca do melhor protocolo de descelularização, já que cada um desses tratamentos interfere de maneira diferente na composição bioquímica, ultraestrutura e comportamento mecânico da matriz extracelular, afetando o tipo de resposta imunológica ao material. Ademais o baixo arsenal de pesquisas envolvendo a descelularização de tecidos ósseos representa mais um obstáculo à chegada de um consenso protocolar. O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência dos métodos de descelularização na produção de arcabouços biológicos a partir de órgãos ósseos de camundongos, visando sua utilização para enxertia. Trata-se de um estudo laboratorial, sequenciado em duas etapas distintas. Na primeira fase foram avaliadas 12 hemi-calvárias de camundongos, divididas em três grupos (n=4) e submetidas a três diferentes protocolos de descelularização (SDS [Grupo I], Tripsina [Grupo II], Triton X-100 [Grupo III]). Buscou-se identificar aquele que promove a mais eficiente remoção celular, simultaneamente a melhor preservação estrutural da MEC óssea. Para tanto, foi realizada análise quantitativa do número de células remanescentes e análise descritiva dos arcabouços, possibilitadas por microscopia. Na segunda etapa, foi realizado um estudo in vitro para avaliar a adesão de células mesenquimais da medula óssea de camundongos, cultivadas sobre arcabouços previamente descelularizados. Através da contagem manual de células nos arcabouços, verificou-se total remoção celular no Grupo II, remoção praticamente completa no Grupo I, e permanência de células e remanescentes no Grupo III. Os achados permitiram observar diferença significativa apenas entre os Grupos II e III (p=0,042). Melhor manutenção da estrutura colágena foi obtida com o Triton X-100, ao passo que a descelularização com Tripsina foi responsável pelas maiores alterações estruturais nos arcabouços. Após o cultivo, a adesão de células mesenquimais só foi observada nas calvárias descelularizadas com Tripsina. Devido ao potencial de remoção total das células e à capacidade de permitir a adesão destas, o protocolo baseado no uso da Tripsina (Grupo II) foi considerado o mais adequado para uso em experimentos futuros, que envolvam enxertia de arcabouços ósseos descelularizadosTese Estudo in vitro dos efeitos da BMP-2 e do seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em carcinoma epidermóide de língua(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-02-27) Carvalho, Cyntia Helena Pereira de; Pinto, Leão Pereira; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787928A2; ; http://lattes.cnpq.br/3956936720129374; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Nonaka, Cassiano Francisco Weege; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4133887J1&dataRevisao=null; Godoy, Gustavo Pina; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4751939A2; Souza, Lélia Batista de; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4787927Z7&dataRevisao=nullO carcinoma epidermóide oral (CEO) representa a neoplasia maligna mais prevalente na cavidade oral e por atingir um grande número de indivíduos, acaba se tornado um relevante problema de saúde pública. Muitos estudos demonstram alterações nos componentes da via BMP em vários tipos de tumores, como os de próstata, cólon, mama, gástricos e CEOs. É do conhecimento atual que essas proteínas podem exercer efeito pró-tumoral em estágios mais avançados do desenvolvimento neoplásico vindo a favorecer a progressão e invasão tumoral. A inibição da via de sinalização da BMP-2, através dos seus antagonistas, tem mostrado resultados positivos de ação antitumoral e que assim, o uso do Noggin pode ser um novo alvo terapêutico contra o câncer. Diante destas evidências e dos escassos trabalhos com BMP-2, Noggin e CEO, o objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da BMP-2 e seu antagonista Noggin sobre a proliferação e migração celulares em culturas de células de carcinoma epidermóide de língua humana (SCC25). Foi feita a divisão em três grupos de estudo, um grupo controle, onde as células SCC25 não sofriam tratamento com substância alguma, um grupo BMP-2, no qual as células eram tratadas com 100ng/ml de BMP-2 e um grupo de células que eram tratadas com 100ng/ml de Noggin. Para o ensaio de proliferação e ciclo celular foram estabelecidos três intervalos de tempo (24, 48 e 72 horas). A atividade proliferativa foi investigada por azul de tripan e a análise do ciclo celular através da marcação por iodeto de propídio em Citometria de fluxo. O potencial de migração/invasão das células SCC25 foi avaliado através da realização de um ensaio de invasão celular utilizando o matrigel em um intervalo de 48 horas. A curva de proliferação revelou maior crescimento celular nas células tratadas com BMP-2 no intervalo de 72 horas (p<0.05) e menor crecimento e viabilidade celular no grupo Noggin. As proteínas recombinantes favoreceram a maior porcentagem das células na fase do ciclo celular Go/G1 com diferença estatisticamente significativa no intervalo de 24 horas (p<0,05). A BMP-2 promoveu uma maior invasão das células estudadas, assim como o seu antagonista Noggin inibiu a invasão das células estudadas (p<0,05). Dessa forma, os resultados indicam que a BMP-2 favorece o fenótipo maligno, pois estimula a proliferação e invasão das células SCC25 e seu antagonista Noggin pode ser uma alternativa terapêutica pois inibiu essas características pró-tumoraisDissertação A influência da criopreservação nas células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal de humanos análise comparativa in vitro(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2011-02-04) Vasconcelos, Rodrigo Gadelha; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/0935664051881901; Lins, Ruthnéia Diógenes Alves Uchôa; ; http://lattes.cnpq.br/4462076152744400; Gurgel, Bruno César de Vasconcelos; ; http://lattes.cnpq.br/4649601602612601A criopreservação é um processo em que células ou tecidos biológicos são preservados através do congelamento a temperaturas muito baixas e objetiva cessar reversivelmente, de forma controlada, todas as funções biológicas dos tecidos vivos; ou seja, manter a preservação celular de maneira que esta possa recuperar-se com alto grau de viabilidade e integridade funcional. Este trabalho se propôs avaliar in vitro a influência da criopreservação nas células mesenquimais indiferenciadas procedentes do ligamento periodontal de terceiros molares humanos. Para tanto, foram utilizados 6 dentes sadios os quais tiveram as referidas células removidas e cultivadas em meio de cultura α-MEM contendo antibióticos e suplementado com 15% de FBS, em atmosfera úmida com 5% de CO2 a 37º C. As células isoladas de cada amostra foram divididas em dois grupos: Grupo I cultivo celular imediato (células frescas não criopreservadas) e Grupo II criopreservação celular, durante um período de 30 dias. As análises dos índices de adesão e proliferação celular nos diferentes grupos foram realizadas através das contagens das células aderidas às superfícies dos poços de cultivo celular, nos intervalos de 24, 48 e 72 horas após o início do cultivo. O número de células em cada poço foi obtido pela contagem das células viáveis através do uso do hemocitômetro e o método de exclusão das células coradas pelo azul de trypan. A diferença entre os grupos para cada um dos tempos foi analisada pelo teste de Wilcoxon. Em relação à evolução temporal para cada um dos grupos, a análise foi feita pelo teste de Friedman para verificar a existência de diferença entre os tempos e, quando ela existiu, foi aplicado o teste de Wilcoxon com penalização. Os resultados demonstraram que não houve diferença estatisticamente significativa entre os dois grupos analisados neste estudo. Portanto, conclui-se que o processo de criopreservação, após um período de 30 dias, não exerceu influência no tipo celular estudado; não havendo, portanto, nenhuma diferença na capacidade de crescimento in vitro entre os gruposDissertação Influência da laserterapia na proliferação de células-tronco do ligamento periodontal humano(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2013-01-25) Soares, Diego Moura; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; ; http://lattes.cnpq.br/2584990442587812; Silva, José Sandro Pereira da; ; http://lattes.cnpq.br/7625795408417124; Lins, Ruthnéia Diógenes Alves Uchôa; ; http://lattes.cnpq.br/4462076152744400; Seabra, Eduardo José Guerra; ; http://lattes.cnpq.br/2882454174218035O laser de baixa intensidade (LBI) tem sido utilizado na Odontologia com a finalidade de promover cicatrização e regeneração dos tecidos. A literatura mostra um efeito positivo do LBI na proliferação celular, porém pouco se sabe sobre a sua eficácia na proliferação de células-tronco. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da irradiação do LBI na taxa proliferativa de células -tronco do ligamento periodontal humano. Extratos de ligamento periodontal foram isolados de dois terceiros molares hígidos removidos por indicaç ão cirúrgica e/ou ortodôntica. Após a digestão enzimática, as células foram cultivadas em meio de cultura α-MEM suplementado com antibióticos e 15% de soro fetal bovino. No terceiro subcultivo, as células foram irradiadas com um laser diodo InGaAlP, utilizando-se duas diferentes densidades de energia (0,5J/cm 2 - 16 segundos e 1,0J/cm² - 33 segundos), comprimento de onda de 660nm e potência de 30mW. Uma nova irradiação, utilizando os mesmos parâmetros, foi realizada 48 h após a primeira. Um grupo controle (não irradiado) foi mantido nas mesmas condições experimentais de cultivo. O método de exclusão por azul de Tripan e a atividade mitocondrial das células medida através do ensaio de MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio], nos intervalos de 0, 24, 48 e 72 h pós-irradiação, foram utilizados a fim de avaliar a proliferação celular. Os dados das contagens celulares foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando um intervalo de confiança de 95%. Com o objetivo de verificar possíveis alterações morfológicas nucleares induzidas pelo laser, as células foram submetidas à marcação com DAPI (4 -6-Diamidino-2-phenylindole) no intervalo de 72 h. Os resultados do presente estudo mostraram que a densidade de energia de 1,0 J/cm² promoveu maior proliferação das células em comparação com os outros grupos (controle e laser 0,5 J/cm²) nos intervalos de 48 e 72 h. A atividade mitocondrial, medida pelo ensaio de MTT, apresentou resultados semelhantes às contagem celulares com azul de Tripan, com o grupo irradiado com 1,0 J/cm² exibindo uma atividade significativamente maior do MTT nos intervalos de 48 e 72 h, quando comparado com o grupo irradiado com 0,5 J/cm². Nenhuma alteração morfológica nuclear foi observada, tanto das células do grupo controle quanto nas células irradiadas. Conclui-se que o LBI apresenta efeitos estimulantes sobre a proliferação de células-tronco do ligamento periodontal humano. Portanto, a aplicação da laserterapia neste tipo celular pode ser importante para futuros avanços na regeneração periodontalArtigo Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and p53 protein expression in ameloblastoma and adenomatoid odontogenic tumor(SCIELO, 2005) Barbosa, Carlos Augusto Galvão; Pinto, Leão Pereira; Freitas, Roseana de Almeida; Costa, Antonio de Lisboa Lopes; Souza, Lélia Batista deIn this study, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and p53 protein expressions were analyzed in 16 cases of ameloblastoma and 8 cases of adenomatoid odontogenic tumor (AOT). The cases of ameloblastoma consisted of solid type tumors and histologic arrangements of different subtypes were observed. In some specimens, more than one histologic subtype was identified in the same lesion, and each tumor was categorized according to the predominant cell pattern. The odontogenic tumors were grouped as follows: follicular ameloblastoma (n=7), plexiform ameloblastoma (n=4), acanthomatous + follicular ameloblastoma (n=3), basal cell ameloblastoma (n=2), adenomatoid odontogenic tumor (n=8). PCNA immunohistochemical expression revealed stronger quantitative labeling index for the follicular ameloblastoma, while for p53 protein the strongest quantitative labeling index was detected in the plexiform type. Nevertheless, statistical analysis using ANOVA and Tukey's test did not detect significant differences (p>0.05) among the histologic subtypes of ameloblastoma. The findings of this study suggest that the different histologic patterns of ameloblastoma did not show a direct correlation with their clinical behavior and consequently with the prognosis of the cases. The results also indicated that the ameloblastoma has greater proliferative potential than the AOT, which can contribute to explain its more aggressive and invasive characteristics.Tese Tratamento térmico do titânio e suas consequências sobre as propriedades físico-químicas e de biocompatibilidade(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2012-02-03) Macedo, Haroldo Reis Alves de; Alves Júnior, Clodomiro; ; http://lattes.cnpq.br/7441669258580942; ; http://lattes.cnpq.br/3837581949900912; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Guerra Neto, Custódio Leopoldino Brito; ; http://lattes.cnpq.br/5387010100082241; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; ; http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4799567J8&dataRevisao=null; Lima, José de Anchieta; ; http://lattes.cnpq.br/0742445504420593; Caram Júnior, Rubens; ; http://lattes.cnpq.br/1091025573756924O titânio e suas ligas são amplamente utilizados como biomaterial em dispositivos biomédicos e devido a isso pesquisas têm sido desenvolvidas visando aperfeiçoar e/ou compreender melhor a interação biomaterial/meio biológico. O processo de fabricação desses dispositivos de titânio geralmente envolve uma série de processos térmicos e mecânicos e que têm consequências no produto final. Os tratamentos térmicos são usualmente utilizados para obtenção de propriedades diferenciadas para cada aplicação. Com o intuito de entender a influência desses tratamentos sobre a resposta biológica da superfície, foram realizados, no presente trabalho, diferentes tratamentos térmicos em titânio e analisadas suas influências na morfologia, adesão e proliferação de células pré-osteoblástica (MC3T3-E1). Para tanto os discos de titânio tratados termicamente foram caracterizados por microscopia ótica, ângulo de contato, energia de superfície, rugosidade, microdureza Vickers, difração de raios-X e microscopia eletrônica de varredura através das técnicas de EBS, EDS e EBSD. Para análise da resposta biológica foram realizados teste de proliferação por MTT, adesão por cristal violeta e expressão da integrina β1 por citometria de fluxo. Foi verificado que na presença de uma microestrutura muito ordenada, definida através de um ataque químico, as células tendem a se alongar no mesmo sentido da orientação microestrutural do material. Quando essa ordem não acontece, o fator mais importante a influenciar na proliferação celular é a tensão residual, indicada pela dureza do material. Deste modo os discos que apresentaram maior estado de tensão residual apresentaram também maior proliferação celularTese Xilanas de sabugo de milho como agente antioxidante, citotóxico, anticoagulante e imunomodulador(Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2014-10-20) Silveira, Raniere Fagundes de Melo; Rocha, Hugo Alexandre de Oliveira; ; http://lattes.cnpq.br/4651814546820796; ; http://lattes.cnpq.br/4657447123848421; Barbosa, Carlos Augusto Galvão; ; http://lattes.cnpq.br/5004397230198722; Lanza, Daniel Carlos Ferreira; ; http://lattes.cnpq.br/6851351991421755; Albuquerque, Ivan Rui Lopes de; ; http://lattes.cnpq.br/2266021166245706; Bezerra, Ranilson de Souza; ; http://lattes.cnpq.br/2205151409139871A prospecção de polissacarídeos farmacologicamente ativos provenientes de subprodutos agrícolas ainda é uma prática pouco explorada no meio científico. Dessa forma, este trabalho pretendeu ampliar o conhecimento relacionado às atividades farmacológicas de polissacarídeos extraídos do sabugo de milho. A partir da farinha de sabugo de milho, um extrato polissacarídico foi obtido ao combinar ondas de ultrassom em meio alcalino, e ao final do processo o produto foi denominado de EPSM. Esse extrato foi caracterizado fisico-quimicamente e, através de ensaios in vitro, foi avaliado como agente antioxidante, citotóxico, anticoagulante e imunomodulator. Os resultados indicaram que o EPSM apresentou significativa ação quelante de metal, além de não apresentar efeito tóxico para células de linhagem normal, mas evidenciar efeito citotóxico contra as células tumorais HeLa, quando causou a morte celular por apoptose. Em adição, outros efeitos farmacológicos foram observados, o EPSM diminuiu a produção de óxido nítrico (NO) por macrófagos ativados, e estendeu o tempo de coagulação sanguínea quando avaliado pelo ensaio de APTT. Posteriormente, frações metanólicas, etanólicas e cetônicas foram obtidas a partir do fracionamento dos polissacarídeos presentes no EPSM. Foram obtidas cinco frações metanólicas, seis frações etanólicas e duas cetônicas; e todas avaliadas quanto às atividades antioxidante, citotóxica, anticoagulante e imunomodulatória. Dentre as frações, E1.4 exibiu significativo efeito qualante de metal, ação tóxica em células HeLa por indução da apoptose, reduziu a produção de NO por macrófagos ativados, e ampliou o tempo de coagulação sanguínea. Esses resultados sinalizaram que os polissacarídeos farmacologicamente ativos do EPSM estariam presentes na fração E1.4. A partir do fracionamento da E1.4 foram obtidas seis subfrações polissacarídicas com tamanhos distintos: -3; 3-10; 10-30; 30-50; 50-100 e +100 KDa. Cerca de 80% dos polissacarídeos de E1.4 apresentou tamanho inferior a 10 KDa, e todas as subfrações apresentaram mais de 61% de açúcar em suas composições químicas. Essas subfrações exibiram diferentes composições monossacarídicas, mas todas apresentaram xilose. As subfrações evidenciaram distintos efeitos nos ensaios farmacológicos in vitro. As subfrações de menor tamanho (< 30 KDa) demonstraram maior atividade quelante de metal e maior atividade citotóxica contra células tumorais. As intermediárias (entre 30 e 100 KDa) diminuíram mais a produção de NO por macrófagos ativados, mas a de maior tamanho (+100 KDa) modulou um maior número de citocinas inflamatórias, e demonstrou um maior efeito anticoagulante. Portanto, a análise conjunta dos resultados indica que os polissacarídeos farmacologicamente ativos do ESPM são heteroxilanas e foram concentrados nas subfrações de E1.4, além disso, os efeitos farmacológicos dessas heteroxilanas dependem do seu tamanho molecular.